广西青年科学基金(0832047)
- 作品数:6 被引量:9H指数:2
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- 染尘巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞中HSP27表达的影响
- 2009年
- 采用大鼠巨噬细胞(AMs)和人胚肺成纤维细胞(HELF)组成体外模型,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术及免疫印迹(western blot)方法分别检测二氧化硅粉尘处理AMs 24 h的培养上清液刺激HELF细胞的HSP 27 mRNA及蛋白表达。同时用二氧化钛作为阴性对照,以不用粉尘处理的AM培养上清液作为正常对照。结果HSP 27能被染尘AMs诱导表达,且mRNA表达水平和蛋白质表达水平变化趋势一致,均呈良好的剂量-效应关系。提示HSP 27可能参与了矽尘致肺纤维化过程。
- 张海英邹伟明金泰廙杨莉陈世艺
- 关键词:矽尘人胚肺成纤维细胞热休克蛋白
- 染尘肺泡巨噬细胞上清液致人胚肺成纤维细胞蛋白谱改变被引量:5
- 2009年
- 目的探讨蛋白质组学技术研究二氧化硅粉尘处理的肺泡巨噬细胞(AM)上清液对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)蛋白质表达变化的影响。方法实验组采用二氧化硅处理大鼠AM的培养上清液刺激MRC-5,对照组MRC-5采用等量无粉尘处理的AM培养上清液作用;提取MRC-5总蛋白,进行双向凝胶电泳识别差异表达蛋白,经质谱分析、数据库搜索进行蛋白鉴定。结果对照组MRC-5细胞检测到(410±21)个,染尘组为(398±19)个蛋白点。组间的匹配性较好,染尘上清刺激后35个蛋白斑点发生变化,初步鉴定出数个与氧化应激相关的蛋白:热休克蛋白(HSP27)、Per-oxiredoxinⅡ亚型b、钙网蛋白-3和钙网蛋白-5类似物等。结论应用蛋白质组学方法有助于筛选到经不同处理细胞间的蛋白表达差异,为进一步研究矽肺机制提供分子基础。
- 张海英梁钢杨小丽黄明立陈世艺
- 关键词:蛋白质组双向凝胶电泳肺泡巨噬细胞人胚肺成纤维细胞
- 矽尘对人胚肺成纤维细胞MMP9/TIMP1表达影响被引量:1
- 2010年
- 目的观察染尘细胞模型中人胚肺成纤维细胞(MRC-5)基质金属蛋白酶9(MMP9)及其组织抑制因子1(TIMP1)诱导表达的时间-效应关系。方法大鼠巨噬细胞(AM s)和MRC-5组成体外模型,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测体外染尘细胞模型中MRC-5分别在0,12,24,36,48,60 h等时段MMP9和TIMP1表达情况。结果 MMP9和TIMP1基因表达呈现明显时间-效应关系,S iO2染尘组相关系数r分别为0.639和0.976,2基因表达存在一定时差,早期以MMP9增高为主。结论基质金属蛋白酶生物合成的变化可能发生在转录水平。
- 张海英金泰廙李慧祺黄明立
- 关键词:矽尘肺泡巨噬细胞人胚肺成纤维细胞
- 离体染尘模型中人胚肺成纤维细胞血红素氧合酶-1及热休克蛋白27表达的时间-效应观察被引量:1
- 2010年
- 目的观察染尘巨噬细胞(AM)上清液对人胚肺成纤维细胞(HELF)血红素氧合酶-1(HO-1)及热休克蛋白27(HSP27)诱导表达的时间-效应关系。方法经二氧化硅(SiO2)粉尘处理的AM上清液刺激HELF组成离体染尘模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测0、2、8、12、16、24 h培养时段的HO-1、HSP27mRNA表达。同时以二氧化钛(TiO2)为对照。结果HO-1、HSP27mRNA相对表达丰度有随时间变化的趋势,且时间因素的作用随着SiO2、TiO2组的不同而有所区别(P<0.05)。结论染尘AM上清液对HELF的HO-1、HSP27表达的诱导具有时间-效应关系,且2种应激蛋白的表达时相不同,两者可能交错对细胞起到保护作用。
- 张海英金泰廙韦艳邓敬桓刘勇
- 关键词:矽尘人胚肺成纤维细胞应激蛋白
- 体外染尘细胞模型中不同时段HSP70各亚型的诱导表达
- 2010年
- 本实验拟观察染尘巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞热休克蛋白70(HSP70)各亚型(HSP70-1、HSP70-2,HSP70-hom)诱导表达的时间-效应关系。采用大鼠巨噬细胞(AMs)和人胚肺成纤维细胞(HELF)组成体外模型,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术,检测二氧化硅粉尘处理AMs培养上清液刺激HELF细胞分别在0、2、8、12、16、24h等多个时段HSP70各亚型表达的情况。同时用二氧化钛作为阴性对照,以不用粉尘处理的AM培养上清液作为正常对照。结果HSP70-1、HSP70-2、HSP70-hom基因表达与培养时间呈现明显的时间-效应关系。HSP70可能参与了矽肺发生的氧化应激机制,且具有不同的诱导动力学特征。
- 张海英金泰廙李慧祺韦艳邓敬桓
- 关键词:矽尘肺泡巨噬细胞人胚肺成纤维细胞热休克蛋白70
- HSP70各亚型在染尘体外细胞模型中表达被引量:2
- 2009年
- 目的观察染尘巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞热休克蛋白70(HSP70)各亚型(HSP70-1、HSP70-2、HSP70-hom)表达的影响。方法采用大鼠巨噬细胞(AMs)和人胚肺成纤维细胞(HELF)构成体外模型,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测二氧化硅粉尘处理AMs24h的培养上清液刺激HELF细胞的HSP70各亚型表达情况。同时用二氧化钛作为阴性对照,以不用粉尘处理的AM培养上清液作为正常对照。结果HSP70-1、HSP70-2、HSP70-hom基因表达与粉尘浓度的相关系数(R)依次为0.931(P<0.01)、0.923(P<0.01)、0.818(P<0.05),呈现明显的剂量-反应关系。结论受染尘肺泡巨噬细胞上清液刺激的人胚肺成纤维细胞HSP70各亚型在转录水平呈表达增加,且可能参与了矽尘致细胞氧化应激过程。
- 张海英杨莉梁艺怀黄明立金泰廙
- 关键词:矽尘肺泡巨噬细胞人胚肺成纤维细胞