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国家自然科学基金(30660185)

作品数:1 被引量:0H指数:0
相关作者:裴秀英高玉婧丁晓王博蒲静更多>>
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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇生物信息
  • 1篇生物信息学
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  • 1篇结核
  • 1篇结核分枝杆菌
  • 1篇基因
  • 1篇基因融合
  • 1篇分枝杆菌
  • 1篇杆菌
  • 1篇AG85B

机构

  • 1篇宁夏医科大学

作者

  • 1篇蒲静
  • 1篇王博
  • 1篇丁晓
  • 1篇高玉婧
  • 1篇裴秀英

传媒

  • 1篇宁夏医科大学...

年份

  • 1篇2013
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
结核分枝杆菌Ag85B、TB10.4及Ag85B-TB10.4融合基因的克隆表达及生物信息学分析
2013年
目的构建结核分枝杆菌Ag85B、TB10.4及Ag85B-TB10.4融合表达载体,并进行抗原的生物信息学分析,为候选疫苗筛选奠定基础。方法从结核分枝杆菌H37Rv菌株中分别扩增出Ag85B基因,TB10.4基因,Ag85B-TB10.4;将Ag85B克隆入pET-28a(+)表达载体中,将TB10.4和Ag85B-TB10.4分别克隆入pET-SUMO表达载体中。上述重组质粒转化入大肠埃希杆菌BL21菌中(DE3),经IPTG诱导表达,并对其进行生物信息学分析。结果 (1)成功将结核分枝杆菌Ag85B和TB10.4,Ag85B-TB10.4基因分别克隆入pET28a(+)和pET-SUMO表达载体中,经IPTG诱导蛋白表达后,对经超声裂解的菌液上清进行SDSPAGE电泳,表明获得了与预期蛋白大小一致的表达产物,重组融合蛋白pET-SUMO-Ag85B-TB10.4蛋白分子质量约为54kDa。(2)生物信息学分析显示Ag85B-TB10.4融合蛋白具有多个潜在抗原位点。结论成功构建了重组质粒pET-28a-Ag85B,pET-SUMO-TB10.4和pET-SUMO-Ag85B-TB10.4,并获得了Ag85B,TB10.4和Ag85B-TB10.4的可溶性原核表达产物;生物信息学分析在Ag85B与TB10.4蛋白加入一段蛋白linker后蛋白的亲水性增强,抗原决定簇面积增大,为后续的功能实验研究奠定了基础。
王博丁晓颜贝高玉婧蒲静裴秀英
关键词:结核分枝杆菌AG85B基因融合生物信息学
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