国家自然科学基金(81161120498) 作品数:5 被引量:5 H指数:2 相关作者: 李廷玉 黄鸿眉 陈洁 任兰 吴小凤 更多>> 相关机构: 重庆医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
全反式视黄酸通过RARα抑制缺氧缺糖引起的原代神经元凋亡 2016年 目的 :探讨全反式视黄酸(all-trans retinoic acid,ATRA)是否能够抑制缺氧缺糖损伤(oxygen and glucose-deprivation,OGD)诱导的原代神经元凋亡。方法 :采用原代神经元作为研究对象,分为对照组、OGD组、OGD+ATRA组;体外分离培养原代神经元,用神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)鉴定神经元;倒置显微镜观察OGD损伤前后细胞形态变化;流式细胞技术研究OGD损伤后各组原代神经元凋亡水平;Real-time PCR检测视黄酸核受体α(retinoic acid receptor alpha,RARα)、转录生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、转录生长因子β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-3)mRNA表达水平;Western blot印迹检测RARα、TGF-β、Caspase-3蛋白表达水平。结果 :成功培养原代神经元;原代神经元OGD损伤后,倒置显微镜观察发现OGD组死亡的原代神经元较OGD+ATRA组明显增多,细胞更加杂乱;流式细胞计数发现OGD+ATRA组(26.11±2.96)%细胞凋亡率较OGD组(52.14±5.23)%明显降低(P=0.025);OGD+ATRA组RARαmRNA表达水平(1.52±0.43)和蛋白表达水平(0.22±0.02)较OGD组的m RNA表达水平(0.49±013)和蛋白表达水平(0.10±0.02)均明显增高(P=0.006,P=0.005),而OGD+ATRA组TGF-β1、TGF-β2 m RNA表达水平(0.45±0.10,0.41±0.08)分别较OGD组(0.81±0.15,0.98±0.15)明显降低(P=0.034,P=0.018),而且OGD+ATRA组TGF-β、Caspase-3蛋白表达水平(0.22±0.04,0.18±0.03)分别较OGD组(0.39±0.05,0.47±0.06)也明显降低(P=0.016,P=0.002),OGD+ATRA组(1.08±0.49)与OGD组(1.00±0.15)Caspase-3 m RNA表达水平无明显差异(P=0.148)。结论 :ATRA可以激活其受体RARα进而下调TGF-β,抑制凋亡因子Caspase-3的表达,最终抑制OGD损伤引起的原代神经元凋亡。 郭敏 江伟 侯娜丽 谷燕 黄鸿眉 陈洁 李廷玉关键词:全反式视黄酸 缺氧缺糖损伤 海马细胞胞浆RARα表达对大鼠学习记忆功能的影响 被引量:2 2017年 目的探讨海马细胞胞浆视黄酸受体(retinoic acid receptor,RAR)α蛋白表达对大鼠空间学习记忆功能的影响。方法 SD大鼠采用完全随机化分组方法分为Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)训练组(n=6)和未训练组(n=6),检测海马组织RARα和GluR1表达水平。分别将AAV-control sh RNA和AAV-RARαsh RNAs海马定位注射SD大鼠后,检测其学习记忆功能及海马组织RARα和GluR1表达水平变化。体外利用神经生长因子(neuron growth factor,NGF)诱导PC12细胞成熟分化,检测RARα和GluR1表达水平、胞内钙活性及静息膜电位。结果水迷宫训练组大鼠海马组织RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平均较未训练组显著增加(P<0.01)。海马定位注射2周后,Morris水迷宫检测发现AAV-RARαsh RNAs组大鼠学习记忆功能较对照组明显减弱(P<0.05),同时海马RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平也明显下降(P<0.01)。经NGF诱导后的PC12细胞静息膜电位更接近于神经元静息膜电位(P<0.01),RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平较对照组明显增高(P<0.01),胞内钙活性明显增强(P<0.05)。结论海马细胞胞浆RARα蛋白表达与学习记忆能力呈正相关,在调节突触可塑性中发挥重要作用。 吴小凤 任兰 侯娜丽 杨亭 何慕兰 谷燕 黄鸿眉 陈洁 李廷玉关键词:海马细胞 GLUR1 学习记忆功能 塑造儿童良好行为的基本原理及应用 2013年 中国正处于二代独生子女时代,儿童良好行为塑造成为家长关注热点,行为受多种因素的影响,与气质、认知局限性、自我为中心思维方式、语言发育、父母的行为及家庭环境、甚至当地的文化等有很大的关系。应用行为改变的基本原理及技术,用较多的实例讲述了条件反射与操作性条件反射原理及应用,介绍了实际生活中塑造儿童行为的两个基本原则及应用实例,希望对儿科医生指导家长有所裨益。 李廷玉关键词:儿童 siCBP慢病毒降低大鼠原代海马神经元乙酰化组蛋白表达 被引量:1 2015年 本研究目的为构建携带针对大鼠环磷酸腺苷反应元件结合因子的结合蛋白(CBP)基因的siRNA重组慢病毒,感染原代海马神经元并检测其对乙酰化组蛋白表达的抑制作用。本文构建了4种siCBP,并检测其对神经元中CBP表达的抑制作用,选择效果最好的一种检测神经元中HAT活性及乙酰化组蛋白Ac-H3、Ac-H4的表达。酶切及测序鉴定证实siCBP正确克隆至慢病毒质粒中,4种siCBP感染原代海马神经元后CBP mRNA和蛋白表达有不同程度降低,效果最佳的GR806对神经元的HAT活性及Ac-H3、Ac-H4表达均有显著抑制作用。本研究为后续应用siCBP阐明CBP依赖的组蛋白乙酰化对海马区学习记忆功能调节的相关分子机制提供了实验工具。 侯娜丽 吴小凤 任兰 郭敏 毕杨 刘友学 陈洁 黄鸿眉 李廷玉关键词:慢病毒载体 海马神经元 组蛋白乙酰化 PINK1-mediated Drp1^(S616) phosphorylation modulates synaptic development and plasticity via promoting mitochondrial fission 被引量:2 2022年 Dynamic change of mitochondrial morphology and distribution along neuronal branches are essential for neural circuitry formation and synaptic efficacy.However,the underlying mechanism remains elusive.We show here that Pink1 knockout(KO)mice display defective dendritic spine maturation,reduced axonal synaptic vesicles,abnormal synaptic connection,and attenuated long-term synaptic potentiation(LTP).Drp1 activation via ^(S616) phosphorylation rescues deficits of spine maturation in Pink1 KO neurons. Qingtao Gao Runyi Tian Hailong Han Jesse Slone Caifang Wang Xiao Ke Tongmei Zhang Xiangyu Li Yuhong He Panlin Liao Fang Wang Ye Chen Shiqing Fu Kexuan Zhang Fangfang Zeng Yingxuan Yang Zhuo Li Jieqiong Tan Jiada Li Youming Lu Taosheng Huang Zhonghua Hu Zhuohua Zhang关键词:PLASTICITY ACTIVATION SYNAPTIC