江苏省自然科学基金(2011104SBZ0122)
- 作品数:3 被引量:6H指数:2
- 相关作者:孟庆国黄艳青王文顾伟陈静更多>>
- 相关机构:中国水产科学研究院东海水产研究所南京师范大学更多>>
- 发文基金:江苏省教育厅自然科学基金江苏省水产三项工程项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 中华绒螯蟹螺原体类螺旋蛋白SLP25对中华绒螯蟹和RAW264.7细胞免疫反应的研究被引量:2
- 2013年
- 中华绒螯蟹螺原体是一种引起中华绒螯蟹颤抖病的新型病原微生物,对中华绒螯蟹养殖业造成了很大的损失.本文研究了螺原体的一个特有蛋白——螺旋蛋白所引起的中华绒螯蟹和小鼠RAW264.7细胞的免疫反应.克隆和原核表达中华绒螯蟹螺原体类螺旋蛋白SLP25后,用以感染中华绒螯蟹和小鼠巨噬细胞RAW264.7,用实时定量PCR和Western Blot的方法检测宿主免疫相关基因或蛋白表达量的变化.类螺旋蛋白SLP25刺激后,中华绒螯蟹的抗脂多糖因子、酚氧化酶原、消极素轻链和Peroxiredoxin 6等基因的mRNA表达量变化显著;RAW264.7细胞内的TNF-α、IL-1β和IL-10等基因的mRNA表达量变化显著,而TGF-β1和CD40的mRNA表达量变化不显著;同时RAW264.7细胞内P38和ERK蛋白的磷酸化水平变化显著,而JNK蛋白的磷酸化水平变化不显著.通过本文的研究表明类螺旋蛋白SLP25可以引起宿主广泛的免疫变化,进而证明其是重要的毒力相关因子.
- 孟庆国陈静黄艳青靳明建顾伟王文
- 关键词:螺原体中华绒螯蟹免疫反应
- 红螯螯虾冷休克蛋白Y-box编码基因的克隆及表达分析被引量:3
- 2012年
- 采用RT-PCR和RACE技术,从红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)血细胞中分离到冷休克蛋白Y-box编码基因的cDNA序列。结果显示,冷休克蛋白Y-box编码基因的长度为1 733 bp,其中包括82 bp的5'非翻译区、676 bp的3'非翻译区和975 bp的编码序列,可编码324个氨基酸。理论相对分子质量和等电点分别为35 800和9.81。结构域分析和序列比对显示,红螯螯虾冷休克Y-box蛋白由3部分组成:富含丙氨酸或脯氨酸区域、冷休克结构域和带电荷区域,其中冷休克结构域高度保守。系统进化树分析表明,红螯螯虾冷休克Y-box蛋白与水蚤等节肢动物冷休克Y-box蛋白聚类,且三级结构非常相似。最适温度养殖条件下,冷休克蛋白Y-box的虾组织分布特异性研究表明,红螯螯虾神经组织的冷休克蛋白Y-box转录活性最强,而后依次为肝脏、血淋巴和鳃,在肠和心脏中也有活性,在肌肉组织中转录保持较低水平,揭示神经组织是重要的冷休克Y-box蛋白表达区。
- 孟庆国陈静黄艳青靳明建顾伟王文
- 中华绒螯蟹螺原体对中华绒螯蟹和RAW264.7细胞免疫反应研究被引量:1
- 2012年
- 中华绒螯蟹螺原体是一种引起中华绒螯蟹颤抖病的新型病原微生物,对中华绒螯蟹养殖业造成了很大的损失.虽然很多无脊椎动物免疫反应的研究已经报道,但是螺原体引起宿主免疫反应的研究目前还未见报道.中华绒螯蟹螺原体既可以感染中华绒螯蟹,也可以感染乳鼠.本文在动物个体水平上研究了中华绒螯蟹螺原体与中华绒螯蟹的免疫关系,中华绒螯蟹经螺原体刺激后,其体内抗脂多糖因子、酚氧化酶原、酚氧化酶原激活因子、消极素轻链等基因的mRNA的表达水平显著上升,而抗氧化蛋白Prx 6的表达量显著下降.本文还在细胞水平研究了中华绒螯蟹螺原体与小鼠巨噬细胞之间的免疫关系,中华绒螯蟹螺原体刺激后,细胞中CD40、IL-1β、IL-10基因的mRNA表达量显著下降,而TGF-β1和TNF-α等基因的表达量上升.本实验结果说明螺原体可以引起寄主很广泛的免疫反应.
- 孟庆国黄艳青靳明建顾伟王文
- 关键词:中华绒螯蟹RAW264.7细胞螺原体免疫反应