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浙江省医学会临床科研基金(2006ZYC06)
作品数:
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相关作者:
金锡御
丁砺蠡
杜传军
宋波
龚宇
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相关机构:
第三军医大学西南医院
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发文基金:
浙江省医学会临床科研基金
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相关领域:
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金锡御
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2007
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E2F“诱骗”策略抑制膀胱出口梗阻后逼尿肌细胞的表型转化
2007年
目的利用自建的膀胱出口梗阻(BOO)细胞水平的模型,探讨转录因子 E2F"诱骗"(decoy)策略抑制逼尿肌细胞(DSMC)的表型转化作用。方法对培养的 DSMC 施加周期性张力负荷以建立细胞水平的 BOO 模型;以 Lipofectamine 2000介导 E2F-decoy 脱氧寡核苷酸(ODN)转染DSMC,设立 E2F-decoy ODN 转染组(Decoy 组),错配 E2F-decoy ODN 转染组(Mis-decoy 组)及空白对照组(非转染组);四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定细胞的增殖活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA 表达水平,Western 印迹检测 PCNA 和细胞周期依赖性蛋白激酶cdk2表达。结果 Lipofectamine 介导转染 E2F-decoy ODN 后24 h 可获得表达;Decoy 组增殖活性显著低于非转染组和 Mis-decoy 组(均 P<0.01);Decoy 组 PCNA mRNA 表达显著低于非转染组(P<0.01);Decoy 组 PCNA 和 cdk2蛋白表达显著低于非转染组(126±14 vs 180±10;155±6 vs210±22,均 P<0.01);而 Mis-decoy 组与非转染组之间以上指标差异均无统计学意义(均 P>0.05)。结论 E2F-decoy ODN 能够转染 DSMC 并获得表达;转录因子 E2F"诱骗"策略有效抑制了 BOO 后DSMC 的表型转化,显示了从逼尿肌结构的角度改善梗阻后膀胱功能的前景。
龚宇
杜传军
丁砺蠡
宋波
金锡御
关键词:
膀胱颈梗阻
逼尿肌
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