国家自然科学基金(81100614)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：邹大进章卫平陈榕周露婷张海更多>>
- 相关机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转录因子ChREBP-α增强小鼠原代肝细胞的脂质合成能力
- 2013年
- 目的构建含转录因子ChREBP-α基因的重组腺病毒载体,检测其在小鼠原代肝细胞中的表达及其对脂质合成的调节作用。方法将ChREBP-αcDNA克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV载体,与pAdEasy质粒在大肠杆菌BJ5183中同源重组,获得腺病毒载体pAd-ChREBP-α,在293A细胞中进行病毒的包装和扩增,检测病毒的滴度;将腺病毒Ad-ChREBP-α感染小鼠原代肝细胞,用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测ChREBP-α的表达,实时荧光定量PCR检测ChREBP-α靶基因LPK mRNA的表达。用核素14 C示踪法测定肝细胞的脂质合成速率。结果成功制备了ChREBP-α重组腺病毒,利用其在原代肝细胞过表达ChREBP-α,可显著上调靶基因LPK的表达,并增强肝细胞的脂质合成速率。结论成功制备了具有生物学活性、能在原代肝细胞中过表达的ChREBP-α重组腺病毒,为研究ChREBP-α的糖脂代谢调控作用奠定了基础。
- 周露婷杨瑞李玲陈榕张晔印慨邹大进张海章卫平
- 关键词：脂代谢障碍重组腺病毒肝细胞
- 脂肪肝小鼠的肝脏脂质代谢相关基因表达特征分析被引量：6
- 2012年
- 目的分析ob/ob肥胖小鼠脂肪肝中脂质代谢相关基因的表达特征。方法 18周龄雄性ob/ob及其同窝对照小鼠各4只,禁食16h后处死。检测小鼠体质量、肝脏湿质量/体质量、肝脏三酰甘油(TG)水平;用H-E和油红O染色观察肝脏的形态结构和脂质沉积情况;用实时荧光定量PCR方法检测肝脏脂质代谢相关基因的mRNA表达情况。结果 Ob/ob小鼠体质量、肝脏湿质量/体质量和肝脏组织TG水平均高于对照小鼠(P<0.05),H-E和油红O染色显示ob/ob小鼠发生肝脏脂质沉积;肝脏脂肪酸转位酶(CD36)、脂肪酸结合蛋白1(FABP1)、脂肪酸合酶(FASN)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、极长链脂肪酸延长酶6(ELOVL6)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)等mRNA表达水平在ob/ob小鼠肝脏均高于对照小鼠(P<0.05),而过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)、软脂酸辅酶A氧化酶1(ACOX1)、载脂蛋白B(ApoB)和微粒体TG转移蛋白(MTP)mRNA在两组小鼠肝脏中的mRNA表达水平差异无统计学意义。结论 Ob/ob小鼠肝脏的脂肪酸摄取和从头合成相关基因的mRNA表达水平升高,而脂肪酸氧化及脂质向肝外转运的相关基因的mRNA表达水平无明显改变。
- 陈榕曹怡周露婷麻献华王燕张海章卫平邹大进
- 关键词：非酒精性脂肪肝肥胖脂代谢障碍
