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湖北省自然科学基金(2006ABA197)

作品数:11 被引量:45H指数:4
相关作者:刘德立贲亚琍朱德锐崔古贞熊丽更多>>
相关机构:华中师范大学江汉大学更多>>
发文基金:湖北省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:医药卫生农业科学环境科学与工程化学工程更多>>

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生
  • 4篇农业科学
  • 2篇环境科学与工...
  • 1篇化学工程

主题

  • 4篇球菌
  • 4篇克隆
  • 4篇肺炎
  • 4篇肺炎链球菌
  • 3篇抗原
  • 2篇多克隆
  • 2篇多克隆抗体
  • 2篇农药
  • 2篇人工抗原
  • 2篇呋喃丹
  • 2篇抗体
  • 2篇基因
  • 2篇合成酶
  • 2篇HMG-CO...
  • 1篇调节系统
  • 1篇动力学
  • 1篇动力学研究
  • 1篇叶蝉散
  • 1篇异丙基
  • 1篇杀虫

机构

  • 10篇华中师范大学
  • 6篇江汉大学

作者

  • 10篇刘德立
  • 9篇贲亚琍
  • 4篇崔古贞
  • 4篇朱德锐
  • 2篇胡芹芹
  • 2篇熊丽
  • 2篇陆文昌
  • 1篇刘盛华
  • 1篇张立媛
  • 1篇张青叶
  • 1篇韩睿
  • 1篇李娜
  • 1篇贲亚俐

传媒

  • 1篇江西农业大学...
  • 1篇哈尔滨医科大...
  • 1篇山东医药
  • 1篇环境科学与技...
  • 1篇基础医学与临...
  • 1篇环境科学研究
  • 1篇环境化学
  • 1篇农药
  • 1篇广西医科大学...
  • 1篇Biomed...
  • 1篇化学与生物工...

年份

  • 5篇2010
  • 1篇2009
  • 5篇2008
11 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
聚磷菌生物除磷机理研究进展被引量:18
2008年
废水中过量磷酸盐是引起水体富营养化的主要原因之一,生物除磷是一项新型的水处理技术。聚磷菌生物在多聚磷酸盐的合成和降解过程中发挥重要作用。文章综述了目前聚磷菌生物除磷的生化机理,聚磷过程中涉及的主要酶类及磷酸盐转运过程相关基因的表达调控。
朱德锐贲亚琍韩睿刘德立
关键词:聚磷菌
靶标酶在农药研发中的作用被引量:7
2008年
靶标酶在农药研发中具有极其重要的作用,大多数新开发的超高活性农药的靶标都是各种重要的代谢酶系统,了解靶标酶的作用机理,将有助于开发新型高效、低毒、专一性好的农药。综述了除草剂和杀虫剂作用于靶标酶的机理、针对专一靶标酶开发的除草剂和杀虫剂品种、昆虫和杂草产生抗药性的机制,并对新型除草剂和杀虫剂的开发前景进行了展望。
张立媛贲亚俐刘德立
关键词:靶标酶农药除草剂杀虫剂抗性
呋喃丹多克隆抗体的制备与初步应用被引量:5
2008年
以呋喃丹为原料,在强碱性(pH〉12)下水解生成呋喃酚,与对硝基苯氯甲酸酯和6-氨基己酸反应,合成呋喃丹半抗原,即6-[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]己酸(BFNH).通过活性酯法将半抗原与载体BSA偶联制备的呋喃丹人工免疫抗原免疫家兔获得了抗呋喃丹多克隆抗体,免疫抗原BFNH-BSA和包被抗原BFNH-OVA的结合比分别为18∶1和5∶1.采用辛酸-硫酸铵二步沉淀法纯化兔Ⅱ抗体,抗体最高效价为5.12×10^6,重、轻链分子量分别约为55和22 ku.通过间接竞争ELISA鉴定抗体质量,测得在10^-7~0.01 mg/mL范围内,抑制率与标准农药浓度的线性关系显著,呋喃丹残留最低检测限为10^-7mg/mL,与5种结构相似的氨基甲酸酯类的交叉反应率低于10%.并初步应用于果蔬样品呋喃丹残留的快速检测.
贲亚琍朱德锐胡芹芹李娜熊丽刘德立
关键词:呋喃丹多克隆抗体ELISA
农药人工抗原合成方法的设计与优选被引量:14
2008年
农药人工抗原的合成直接影响后期制备抗体的质量,对于建立农药分子特异、灵敏的免疫分析方法具有关键性作用。综述了国内外农药人工抗原合成过程中的农药分子半抗原的设计原则、合成方法,人工抗原的设计、优选及影响因素等方面的研究进展。并对农药残留免疫分析技术存在的问题和应用前景进行了讨论。
贲亚琍朱德锐刘德立
关键词:农药人工抗原
叶蝉散人工抗原中间产物2-异丙基苯甲酰氯的合成
2010年
根据叶蝉散分子结构的特点,对叶蝉散人工抗原的合成进行了3步实验设计,即以叶蝉散为原料,在强碱性(pH>12)下水解生成2-异丙基苯酚,再加入三光气反应生成活性中间体2-异丙基苯甲酰氯,然后再与6-氨基己酸合成2-苯异丙基-N-(5-羧基戍烷)氨基甲酸酯。此研究成功地进行2步化学反应,并获得2步化学反应产物:2-异丙基苯酚和2-异丙基苯甲酰氯,从而为叶蝉散多克隆抗体和单克隆抗体的制备提供帮助。
贲亚琍陆文昌刘德立
关键词:叶蝉散人工抗原
肺炎链球菌HMG-CoA合成酶动力学研究
2010年
目的:在克隆表达肺炎链球菌HMG-CoA合成酶(HMGS)的基础上,对HMGS进行动力学研究。方法:采用紫外分光光度法,以乙酰-CoA作为底物,检测乙酰乙酰-CoA在300 nm处吸收值的变化。结果:肺炎链球菌HMGS的最适pH 9.75、最适温度37℃、最适MgCl2浓度为10 mol/L,粗酶提取物的比活为0.76μmol/min.mg-1,分离纯化后的比活为3.24μmol/min.mg-1,比活提高4.26倍。结论:在37℃、pH 9.755、mol/L MgCl2的最适反应条件下,肺炎链球菌HMGS的Vmax和Km值分别为4.69μmol/min.mg-1和213μmol。
贲亚琍崔古贞刘德立
关键词:肺炎链球菌
肺炎链球菌HMG-CoA合成酶基因克隆和表达
2010年
目的克隆、表达肺炎链球菌3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme Asynthase,HMGS)。方法采用基因工程技术克隆肺炎链球菌HMGS基因,对T226进行反突变,构建重组表达载体pET-HMGSm并表达HMGS。结果序列分析表明该基因与文献中报道的肺炎链球菌HMGS基因(No.AF290098)相比较有98.5%的同源性,存在18个核苷酸的差异,其中有2个核苷酸的不同导致编码的氨基酸改变,分别是Asn259→Ser,Ala349→Val,该基因编码蛋白由398个氨基酸组成。结论优化重组HMGS表达条件,在18℃0.4 mmol/L IPTG诱导表达4 h,用Ni-NTA层析柱分离纯化得到46 kDa特异性蛋白。
贲亚琍崔古贞刘德立
关键词:肺炎链球菌克隆
Expression,Purification,Characteristics and Homology Modeling of the HMGS from Streptococcus pneumoniae被引量:1
2009年
Objective To understand the molecular basis for a potential reaction mechanism and develop novel antibiotics with homology modeling for 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A (HMG-CoA) synthase (HMGS). Methods The genetic engineering technology and the composer module of SYBYL7.0 program were used, while the HMGS three-dimensional structure was analyzed by homology modeling. Results The mvaS gene was cloned from Streptococcus pneumoniae and overexpressed in Escherichia coli from a pET28 vector. The expressed enzyme (about 46 kDa) was purified by affinity chromatography with a specific activity of 3.24 μmol/min/mg. Optimal conditions were pH 9.75 and 10 mmol/L MgCl2 at 37 ℃ The Vmax and Km were 4.69 μmol/min/mg and 213 μmol/L respectively. The 3D model of S.pneumoniae HMGS was established based on structure template of HMGS of Enterococcus faecalis. Conelusion The structure of HMGS will facilitate the structure-based design of alternative drugs to cholesterol-lowering therapies or to novel antibiotics to the Gram-positive cocci, whereas the recombinant HMGS will prove useful for drug development against a different enzyme in the mevalonate pathway.
YA-LI BENGU-ZHEN CUICHEN LIRUI HANJIE ZHANGQING-YE ZHANGJIAN WANDE-LI LIU
肺炎链球菌HMGS和HMGR有利于寻找抑制先导化合物
2010年
目的对肺炎链球菌3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶和还原酶(HMGS和HMGR)进行动力学和功能研究。方法克隆表达肺炎链球菌HMGS和HMGR,检测洛伐他汀对它们的抑制作用,分别以HMGS酶促反应的产物和3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)作为底物检测几种苗头化合物对HMGR的抑制性。结果洛伐他汀对HMGR有抑制作用,对HMGS无抑制作用,HMGS酶促反应的产物和HMG-CoA在HMGR检测苗头化合物抑制性的筛药反应中效果相似。结论 HMGS酶促反应的产物可以代替HMG-CoA进行苗头化合物初筛,可降低筛药成本,利于寻找新型高效抑制先导化合物。
贲亚琍崔古贞刘德立
关键词:肺炎链球菌
呋喃丹免疫半抗原的合成与应用
2008年
以呋喃丹、对硝基苯氯甲酸酯和6-氨基己酸合成呋喃丹半抗原:6-[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]己酸(BFNH).将半抗原与载体蛋白(BSA,OVA)偶联制备呋喃丹人工免疫抗原和包被抗原.利用BFNH-BSA免疫家兔获得抗呋喃丹的多克隆抗体,并通过间接ELISA法测定抗体的效价.结果表明,家兔抗血清效价达1.28×106.采用正辛酸-硫酸铵二步沉淀法纯化抗体,纯化后抗体效价达到1.024×107,经10%SDS-PAGE分析,重、轻链分子量分别约为55kD和22kD.
朱德锐贲亚琍胡芹芹陆文昌熊丽刘盛华刘德立
关键词:呋喃丹免疫半抗原
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