国家自然科学基金(30460162)
- 作品数：11 被引量：77H指数：7
- 相关作者：赵宏斌梁红锁李林芝李世和马秋野更多>>
- 相关机构：昆明医学院第一附属医院昆明医学院昆明学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 普伐他汀对激素性坏死股骨头内Cbfa1表达的影响被引量：8
- 2006年
- 目的研究普伐他汀对激素性坏死股骨头内Cbfa1基因表达的影响.方法54只新西兰白兔随机分为正常组(A组)、模型组(B组)和普伐他汀治疗组(C组),每组18只.B、C两组应用大肠杆菌内毒素及甲强龙造成股骨头坏死模型,C组于造模后4周开始用普伐他汀灌胃,A、B两组以等量蒸馏水灌胃.分别于喂药后第4、8、12周分批取兔股骨头行实时荧光定量PCR检测股骨头内Cbfa1 mRNA的表达.结果B、C两组各时相点Cbfa1 mRNA的表达水平均低于A组,但C组喂药后第8、12周的表达量明显高于B组,差异有显著性(P(0.01).结论普伐他汀可促进激素性坏死股骨头内Cbfa1 mRNA的表达,有可能成为临床治疗激素性股骨头坏死的有效药物.
- 梁红锁赵宏斌马秋野胡敏李世和
- 关键词：股骨头坏死核心结合因子普伐他汀
- 恒古骨伤愈合剂促进兔坏死股骨头内核心结合因子α1基因表达的实验研究被引量：18
- 2006年
- 目的研究中药恒古骨伤愈合剂(简称中药合剂)对兔坏死股骨头内核心结合因子α1(cbfα1)基因表达的影响。方法用大肠杆菌内毒素(LPS,10μg/kg体重)间隔24h两次静脉注射加甲基泼尼松3次肌肉注射制作的兔股骨头坏死模型,用中药合剂治疗后取股骨头行免疫组化,并提取总RNA行实时荧光定量多聚酶链反应(PCR),观察兔股骨头内cbfα1基因表达的动态变化特点。结果给药第4周时,中药组与模型组股骨头内cbfα1基因表达均为阴性,至第8、12周时,中药组免疫组化结果为弱阳性,模型组为阴性;至第12周时中药组股骨头内cbfα1mRNA的表达量是模型组的2·87倍。正常给药组与空白组比较差异无显著性。结论中药恒古骨伤愈合剂可促进坏死α股骨头内源性cbfα1基因的表达,以用药时间长者效果明显。
- 赵宏斌胡敏梁红锁王建伟尹继波
- 关键词：股骨头坏死模型恒古骨伤愈合剂核心结合因子Α1实时荧光定量PCR
- 激素相关性股骨头坏死股骨头内VEGF和BMP-2的表达被引量：16
- 2006年
- [目的]研究兔激素相关性股骨头坏死股骨头内血管内皮生长因子(vascu lar endothelial growth factor,VEGF)和骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic prote in-2,BMP-2)基因表达的动态变化特点。[方法]用LPS(10μg/kg体重)间隔24 h两次静注加MPS 3次肌注的方法制作的兔股骨头坏死模型,设计兔相关的探针和引物,通过免疫组化、原位杂交并直接提出股骨头内总RNA进行实时荧光定量PCR,研究不同时相点兔坏死股骨头内VEGF和BMP-2基因表达的动态变化特点。[结果]在造模至第4、8、12、16周时,股骨头内VEGF和BMP-2基因的表达免疫组化、原位杂交结果均为阴性;实时荧光定量PCR结果发现表达量均远低于空白对照组。[结论]在LPS加MPS制作的兔股骨头坏死模型中,股骨头内的VEGF和BMP-2基因表达均受抑制。
- 赵宏斌李林芝李世和
- 关键词：股骨头坏死兔模型骨形态发生蛋白原位杂交
- 普伐他汀对激素性坏死股骨头内血管内皮细胞生长因子表达的影响被引量：10
- 2006年
- 目的研究普伐他汀对激素性坏死股骨头内血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法54只新西兰白兔随机分为正常组(A组)、模型组(B组)和普伐他汀治疗组(C组),每组18只。B、C2组应用大肠杆菌内毒素及甲泼尼龙琥珀酸钠造成激素性股骨头坏死模型,C组于造模后4周开始应用普伐他汀灌胃,A、B2组灌服等容量的蒸馏水。分别于喂药后4、8、12周分批处死动物,实时定量逆转录聚合酶链反应检测股骨头内VEGF mRNA的表达。结果B、C2组各期VEGF的mRNA表达水平均低于A组,但C组喂药后第8、12周VEGF mRNA的表达量明显高于B组,差异有显著性(P<0.01)。结论普伐他汀可诱导激素性坏死股骨头内VEGF mRNA表达的上调,有可能成为临床治疗激素性股骨头坏死的有效药物。
- 梁红锁赵宏斌胡敏马秋野
- 关键词：股骨头坏死血管内皮细胞生长因子普伐他汀
- 恒古骨伤愈合剂对激素性坏死股骨头内VEGF基因表达的影响被引量：15
- 2007年
- 目的:研究中药恒古骨伤愈合剂对兔坏死股骨头内VEGF基因表达的影响。方法:成年新西兰大白兔分为4组:A组(空白对照组),B组(正常兔服用恒古骨伤愈合剂),C组(造模后不喂恒古骨伤愈合剂),D组(造模后喂恒古骨伤愈合剂),每组24只。以大肠杆菌内毒素(LPS)(10μg/kg体重)间隔24h静注2次加甲基强的松龙(MPS)肌注3次制作兔股骨头坏死模型后,B组和D组用恒古骨伤愈合剂,A组和C组用等量生理盐水,按计算出的药量灌胃,1次/2d。于喂药至第4、8、12周时取股骨头行免疫组化、原位杂交并提取总RNA行实时荧光定量PCR,动态观察兔股骨头内VEGF基因表达的变化特点。结果:喂药至第4、8周时,比较D组与C组股骨头内VEGF基因表达量的差别无统计学意义。喂药至第12周时,D组与C组股骨头内VEGF基因表达量的差别具有统计学意义(P=0.042<0.05)。B组与A组比较差别无统计学意义。结论:LPS加MPS制作的兔股骨头坏死模型中股骨头内VEGF基因表达受抑制。中药恒古骨伤愈合剂可促进坏死股骨头内源性VEGF基因的表达,以用药时间长者效果明显。恒古骨伤愈合剂对正常兔股骨头内VEGF基因的表达无影响。
- 赵宏斌胡敏王维琦李林芝
- 关键词：恒古骨伤愈合剂股骨头坏死原位杂交血管内皮生长因子
- 普伐他汀修复激素性股骨头坏死兔模型的超微结构评价被引量：8
- 2010年
- 背景:研究表明普伐他汀可通过上调内源性骨形成蛋白2、核心结合因子α1和血管内皮生长因子等基因的表达从而产生促进激素性股骨头坏死兔模型坏死股骨头修复的作用。目的:验证性观察普伐他汀干预激素性股骨头坏死兔模型的超微结构改变。方法:将80只新西兰白兔按随机数字表法分为对照组18只,实验组62只。实验组制备兔激素性股骨头缺血坏死模型。造模第5周,以随机数字表法分配36只模型兔至模型组和他汀组,每组18只。他汀组以普伐他汀(1.2mg/kg)1次/d灌胃,模型组和对照组以等体积的蒸馏水灌胃。造模后8,12,16周,截取股骨头行透射电镜观察。结果与结论:透射电镜观察显示模型组骨细胞变性坏死严重,大部分骨陷窝内骨细胞消失,残存的骨细胞内脂肪沉积增多;与模型组比较,他汀组骨细胞受损程度较轻,形态基本正常,胞浆内脂肪沉积少。说明普伐他汀可有效促进早期激素性股骨头坏死兔模型坏死股骨头的修复。
- 胡敏赵宏斌董锡亮罗德军周旭
- 关键词：普伐他汀激素性股骨头坏死超微结构骨组织工程
- 恒古骨伤愈合剂促进坏死股骨头内BMP-2基因表达研究被引量：15
- 2006年
- 目的:研究恒古骨伤愈合剂对兔坏死股骨头内BMP-2基因表达的影响。方法:以小剂量LPS间隔24h两次静注加甲基强的松龙(MPS)3次肌注制作的兔股骨头坏死模型,用恒古骨伤愈合剂治疗后取股骨头行免疫组化、原位杂交并提取总RNA行实时荧光定量PCR,观察兔股骨头内BMP-2基因表达的动态变化。结果:喂药至第4、8周时,恒古骨伤愈组与模型组股骨头内BMP-2基因表达均为阴性,表达量比较差别无统计学意义。喂药至第12周时,恒古骨伤愈组免疫组化和原位杂交结果为弱阳性,模型组为阴性,恒古骨伤愈组股骨头内BMP-2mRNA的表达量是模型组的3.13倍。正常兔喂药组与空白对照组比较差别无统计学意义。结论:小剂量LPS加MPS制作的兔股骨头坏死模型中股骨头内BMP-2基因表达受抑制,恒古骨伤愈合剂可促进坏死股骨头内源性BMP-2基因的表达,以用药时间长者效果明显。恒古骨伤愈对正常兔股骨头内BMP-2基因的表达无影响。
- 赵宏斌梁红琐胡敏李林芝陈洁
- 关键词：恒古骨伤愈合剂原位杂交实时荧光定量PCR
- 普伐他汀对激素性坏死股骨头内骨形成蛋白-2表达的影响被引量：4
- 2006年
- 目的研究普伐他汀对激素性坏死股骨头内骨形成蛋白-2(BMP-2)表达的影响。方法54只新西兰白兔随机分为正常组、模型组和普伐他汀治疗组,每组18只。模型组和普伐他汀治疗组应用大肠杆菌内毒素及甲泼尼龙琥珀酸钠造成股骨头坏死模型,普伐他汀治疗组于造模后4周开始普伐他汀灌胃,正常组和模型组灌服等容量蒸馏水。分别于喂药后第4、8、12周分批处死动物,实时荧光定量RT-PCR检测股骨头内BMP-2mRNA的表达。结果模型组和普伐他汀治疗组各时相点BMP-2的mRNA表达水平均低于正常组,但普伐他汀治疗组喂药后第4、8、12周的表达量明显高于模型组,差异具有显著性(P<0.01)。结论普伐他汀可诱导激素性坏死股骨头内源性BMP-2mRNA的表达。
- 胡敏赵宏斌梁红锁
- 关键词：股骨头坏死骨形成蛋白-2普伐他汀
- 普伐他汀干预激素性股骨头坏死兔模型的组织学变化:大体和光镜下比较和印证被引量：5
- 2010年
- 背景:研究表明普伐他汀可通过上调内源性骨形成蛋白2、核心结合因子α1和血管内皮生长因子等基因的表达从而产生促进激素性股骨头坏死兔模型坏死股骨头修复的作用。目的:验证性观察普伐他汀干预激素性股骨头坏死兔模型大体和光镜下的组织学改变,并进行相互比较和印证。方法:将80只新西兰白兔按随机数字表法分为对照组18只,实验组62只。向实验组耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素(10μg/kg)2次,注射间隔24h。并于第2次注射大肠杆菌内毒素后,臀肌注射甲强龙(20mg/kg)3次,注射间隔24h,制备兔激素性股骨头缺血坏死模型。造模第5周,将造模成功的39只新西兰白兔以随机数字表法分配其中的36只至模型组和他汀组,每组18只。他汀组以普伐他汀(1.2mg/kg)灌胃,1次/d;模型组和对照组以等体积的蒸馏水灌胃。造模后8,12,16周,取股骨头,分别进行大体和光镜观察。结果与结论:大体观察及光镜观察显示模型组出现明显的骨坏死灶,骨髓腔内可见大量脂肪细胞增生;与模型组比较,他汀组骨细胞受损程度较轻,骨小梁密度较高,空骨陷窝比率较少,骨坏死面积和髓腔内脂肪细胞数量明显减少,骨坏死修复迹象明显。说明普伐他汀可有效促进早期激素性股骨头坏死兔模型坏死股骨头的修复。
- 胡敏赵宏斌董锡亮罗德军周旭
- 关键词：普伐他汀激素性股骨头坏死组织学评价骨组织工程
- 从兔股骨头中提取总RNA的方法特点被引量：5
- 2007年
- 目的:建立一种高效、快速的骨组织总RNA提取方法。方法:实验于2005-01/2006-01在昆明医学院实验动物中心和中国科学院昆明动物研究所中科院细胞与分子进化重点实验室完成。取健康新西兰大白兔1只,截取其股骨头,迅速置于液氮罐中保存,于研钵中研磨,使骨组织始终保存于液氮中,继续研磨,如此重复3次,然后利用Trizol使骨细胞结构迅速破坏,将粉末转入离心管,室温静置5min。随后加入氯仿等有机溶剂处理、离心,使RNA与细胞DNA、蛋白质及其他成分分离从而得到总RNA。最后鉴定RNA的质量、纯度及产率,取2μL提取出的RNA在体积分数为0.008的甲醛变性琼脂糖凝胶上进行电泳,主要观察RNA的28S、18S及5S三个条带是否清晰,有无降解和DNA污染。以99μLDEPC水稀释1μLRNA样品,紫外分光光度计测量其吸光度(A)值,A260/A280之比值表示RNA的纯度,同时根据吸光度值计算其质量浓度。结果:①对提取的兔股骨头RNA进行琼脂糖凝胶电泳,可显示清晰的28S、18S两个条带,5S条带亦可见,表明了RNA是完整的。②用紫外分光光度法测定兔股骨头中提取出的RNAA260/A280,结果表明由本法提取的RNA纯度高,无DNA和蛋白质的污染。③经紫外分光光度计吸收定量,每毫克兔股骨头组织能提取1.0～1.2μg的总RNA。结论:本法提取骨组织总RNA方便、快捷,质量高,可用于骨组织的分子生物学研究。
- 赵宏斌梁红锁
- 关键词：股骨头RNA
