国家自然科学基金(81170128)
- 作品数：27 被引量：119H指数：6
- 相关作者：薛富善廖旭李瑞萍王世玉崔昕龙更多>>
- 相关机构：北京协和医学院天津医科大学新乡医学院第三附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 线粒体通透性转换孔与心肌细胞缺氧/复氧过程中炎症反应关系的实验研究被引量：4
- 2015年
- 目的 探讨线粒体通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore,mPTP）功能状态与心肌细胞缺氧/复氧损伤过程中炎症反应的关系.方法 心肌细胞培养72 h后,采用随机数字表法将其随机分为4组：空白对照组（Sham 组）、缺氧/复氧损伤对照组（AR组）、mPTP开放抑制剂环孢素A（ciclosporin A,CSA）后处理组（CSA组）、mPTP开放剂苍术苷（atractyloside,ATR）后处理组（ATR组）.实验结束后检测各组心肌细胞乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）漏出率、心肌细胞凋亡、线粒体膜电位的变化和心肌细胞核转录因子-κB p65（nuclear factor-κB p65,NF-κB p65）与磷酸化核转录因子-κBp65 Ser536（p-NF-κB p65 Ser536）蛋白的表达量,并检测心肌细胞培养上清液白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）与肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的浓度.结果 与AR组比较,CSA组LDH漏出率显著降低[（27.2±2.6）％,（19.0±2.3）％]（P＜0.01）,早期凋亡细胞百分比显著降低[（33.4±2.8）％,（15.4±2.3）％]（P＜0.01）,p-NF-κB p65 Ser536蛋白表达量显著降低（5.1±0.7,4.4±0.4）（P＜0.01）,IL-6和TNF-α浓度均显著降低[IL-6 （190±10）,（170±11） ng/L;TNF-α（129±9）,（118±12） ng/L]（P＜0.01）.与AR组比较,ATR组LDH漏出率显著升高[（27.2±2.6）％,（32.1±3.6）％]（P＜0.01）,早期凋亡细胞百分比显著升高[（33.4±2.8）％,（43.0±3.3）％]（P＜0.0l）,p-NF-κB p65 Ser536蛋白表达量显著升高（5.1±0.7,5.8±0.6）（P＜0.01）,IL-6和TNF-α浓度均显著升高[IL-6 （189±10）,（205±9） ng/L;TNF-α（129±9）,（144±10） ng/L] （P＜0.01）.结论 mPTP开放状态能够通过调控心肌细胞缺氧/复氧过程中的炎症反应而显著影响缺氧/复氧心肌细胞损伤的程度.
- 程怡薛富善李瑞萍崔昕龙王世玉刘高谱杨桂珍孙超廖旭
- 关键词：心肌细胞线粒体通透性转换孔
- 联合应用α7nAChR激动剂和肢体远隔缺血后处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤和炎症反应的影响被引量：3
- 2017年
- 目的 探讨特异性 α7亚基烟碱型乙酰胆碱受体（α7 subunit-containing nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR）激动剂后处理联合应用肢体远隔缺血后处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury,I/RI）和炎症反应的影响.方法 采用随机数字表法将60只雄性SD大鼠分为6组（每组10只）：假手术组（S组）、对照组（C组）、缺血预处理组（IPC组）、特异性α7nAChR激动剂PNU282987后处理组（P组）、肢体远隔缺血后处理组（L组）、联合应用PNU282987后处理和肢体远隔缺血后处理组（P＋L组）.监测I/R期间的HR和MAP,并计算HR和SBP乘积（rate pressure product,RPP）作为心肌氧耗指数.再灌注120 min采集静脉血样,采用ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）、肌酸激酶心肌型同工酶（myocardial-bound creatine kinase,CK-MB）、TNF-α、IL-6、IL-10和高迁移率族蛋白1（high mobility group box 1,HMGB1）浓度;采用伊文氏蓝和氯化三苯基四氮唑双染色法测定心肌梗死面积（infarction size,IS）.结果 与C组比较,IPC组、P组、L组和P＋L组的血清cTnI和CK-MB浓度以及IS明显降低（P〈0.05）;与IPC组比较,P组、L组和P＋L组血清cTnI和IS明显升高（P〈0.05）;与P组和L组比较,P＋L组的血清cTnI和CK-MB浓度以及IS明显降低（P〈0.05）;与S组比较,血清TNF-α浓度在C组、IPC组和L组明显增高（P〈0.05）,IL-6和HMGB1浓度在C组、IPC组、P组和L组明显增高（P〈0.05）;与C组比较,血清TNF-α、IL-6和HMGB1浓度在IPC组、P组、L组和P＋L组明显降低（P〈0.05）;与IPC组比较,血清TNF-α、IL-6和HMGB1浓度在P组和P＋L组明显降低（P〈0.05）;与P组比较,血清TNF-α、IL-6和HMGB1浓度在L组明显升高（P〈0.05）;与L组比较,血清TNF-α、IL-6和HMGB1浓度在P＋L组亦明显降低（P〈0.05）.结论 联合应用α7nAChR激动剂和肢体远隔缺血后处理可产生更强的心肌保护作用,但不增�
- 关键词：心肌胆碱能抗炎通路
- 真性红细胞增多症发生机制的研究进展被引量：3
- 2018年
- 真性红细胞增多症(PV)为Ph-骨髓增殖性肿瘤(MPN)的主要疾病类型,表现为以红细胞增多为主的二系或者三系血细胞计数增高。在PV的发生、发展过程中,首先,JAK2基因突变,TET2、IDH1/2与ASXL1基因突变及其导致的表观遗传学改变发挥着重要作用。其次,慢性炎症过程中,异常产生的细胞因子促进造血干细胞(HSC)恶性克隆,亦可能是PV发生的重要机制之一。再者,造血微环境改变亦与PV后骨髓纤维化(MF)进展具有一定的相关性。笔者拟就相关基因突变、慢性炎症及造血微环境的改变等多个方面,对PV的发病机制进行综述。
- 付莉霞王颖韶白洁
- 关键词：造血干细胞细胞因子类肿瘤微环境
- miR-30c-2-3p调控X-box结合蛋白-1对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响被引量：7
- 2018年
- 目的探讨miR-30c-2-3p调控X-box结合蛋白-1(X box-binding protein-1,XBP1)对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法制备新生大鼠心肌细胞,随机分为对照组、缺氧/复氧组和miR-30c-2-3p处理组。对照组心肌细胞正常培养,缺氧/复氧组和miR-30c-2-3p处理组心肌细胞进行缺氧3h/复氧6h处理;miR-30c-2-3p处理组心肌细胞于缺氧前48h采用miR-30c-2-3p抑制剂转染慢病毒,对照组和缺氧/复氧组感染慢病毒包装的无义寡核苷酸序列。复氧6h后,采用比色法检测3组心肌细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率,流式细胞术检测正常心肌细胞比率及凋亡水平,实时荧光定量PCR法检测miR-30c-2-3p和XBP1mRNA表达水平,Western blot法检测XBP1蛋白表达情况,双荧光素酶基因检测验证miR-30c-2-3p和XBP1的靶向关系。结果缺氧/复氧组和miR-30c-2-3p处理组心肌细胞LDH漏出率[(28.8±4.9)%、(22.2±3.0)%]、细胞凋亡率[(28.5±3.9)%、(19.2±2.6)%]、miR-30c-2-3p(2.87±0.57、1.57±0.21)、XBP1mRNA(1.68±0.68、3.96±0.69)和XBP1蛋白(1.96±0.40、2.73±0.61)表达均高于对照组[(4.6±1.1)%、(6.5±1.2)%、1、1、1],正常心肌细胞比率[(63.8±4.2)%、(71.6±4.0)%]低于对照组[(91.4±2.4)%](P<0.05);miR-30c-2-3p处理组心肌细胞LDH漏出率、细胞凋亡率及miR-30c-2-3p表达低于缺氧/复氧组,正常心肌细胞比率、XBP1mRNA和XBP1蛋白表达高于缺氧/复氧组(P<0.05);双荧光素酶基因检测结果证实,XBP1为miR-30c-2-3p的靶基因。结论在大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,miR-30c-2-3p、XBP1及XBP1蛋白呈高表达,抑制miR-30c-2-3p可通过上调XBP1表达来减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤。
- 李瑞萍薛富善杨桂珍刘亚洋李慧娴廖旭
- 关键词：内质网应激缺氧
- 自噬与糖尿病因素影响缺血预处理对大鼠心肌保护作用的关系
- 2018年
- 目的评价自噬与糖尿病因素影响缺血预处理对大鼠心肌保护作用的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠,12周龄,体重290~320g,在高脂高糖饮食喂养1周后,腹腔注射链脲佐菌素50mg/kg,连续2d,制备糖尿病模型。取糖尿病模型制备成功的大鼠30只,体重350-450g,采用随机数字表法分为3组(n=10):假手术组(DM-S组)、心肌缺血再灌注组(DM-IR组)和缺血预处理组(DM-IP组)。另取非糖尿病大鼠30只,采用随机数字表法分为3组(n=10):假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(IR组)和缺血预处理组(IP组)。采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注120min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型。IP组和DM—IP组缺血5min,再灌注5min,共3个循环,行缺血预处理,然后制备心肌缺血再灌注损伤模型。再灌注120min时,经颈内静脉采集血样,采用ELISA检测血清cTnI和CK-MB的浓度,然后处死大鼠,取心肌组织,测定心肌梗死体积,采用Westem blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、Beclin-1、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达水平,计算p-Akt/Akt比值。结果与S组比较,IR组血清cTnI和cK—MB的浓度升高,心肌梗死体积百分比升高,心肌组织LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调,PI3K和mTOR表达下调,p-Akt/Akt比值降低(P<0.05)。与IR组比较,IP组血清cTnI和CK—MB的浓度降低,心肌梗死体积百分比降低,心肌组织LC3Ⅱ和Beclin-1表达下调,PI3K和InTOR表达上调,p-Akt/Akt比值升高(P<0.05)。与DM—S组比较,DM-IR组血清cTnI和CK—MB的浓度升高,心肌梗死体积百分比升高,心肌组织LC3 Ⅱ和Beclin-1表达上调,PI3K和mTOR表达下调,p-Akt/Akt比值降低(P<0.05)。与DM-IR组比较,DM—IP组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论糖尿病因素取消缺血预处理对大鼠心肌保护作用的机制可能与抑制PI3K—Akt—mTOR信号通路激活,导致自噬增强有关。
- 孙超杨桂珍薛富善刘亚洋李慧娴廖旭
- 关键词：自噬糖尿病缺血预处理心肌再灌注损伤
- ASXL1突变的髓系肿瘤患者共突变基因谱及其临床意义被引量：5
- 2018年
- 目的探讨具有ASXL1突变的髓系肿瘤患者的共突变基因谱及其临床意义。方法采用包含112个血液肿瘤相关基因的靶向测序技术对1 335例髓系肿瘤患者进行基因突变检测,筛选出ASXL1突变患者,对这部分患者的共突变基因谱进行分析,并分析其发病特征及预后情况。结果 1 335例髓系肿瘤患者中筛选出138例ASXL1突变阳性患者,包括骨髓增生异常综合征(MDS)52例(37.68%),骨髓增殖性肿瘤(MPN)29例(21.01%)、MDS/MPN10例(7.25%),急性髓系白血病(AML)47例(34.06%)。与ASXL1共突变基因谱分析结果显示,96.4%(133例)的患者伴有至少1个共突变基因;共突变基因谱中,表观遗传学基因占55.8%(77/138),信号传导通路相关基因占65.9%(91/138),转录因子基因占36.9%(51/138),细胞周期与凋亡相关基因占18.8%(26/138)。其中最常见的共突变基因组为RAS(25.4%)、SETBP1(21.7%)、FAT1(18.8%)、CREBBP(15.9%)及TET2(15.2%)。五大共突变基因组中,与ASXL1+RAS-患者相比,ASXL1+RAS+患者预后较差,表现为血红蛋白及血小板减少,染色体核型异常比例升高,生存时间缩短;而ASXL1合并SETBP1、FAT1、CREBBP及TET2突变患者的临床特征和预后差异无统计学意义。结论 ASXL1突变的髓系肿瘤患者常伴随多种基因共突变,其中伴随RAS通路基因共突变患者预后较差。
- 滕广帅王颖韶徐晶杜晨霄王艳陈亚芳盛梦瑶白姣姣张磊周圆杨逢春白洁
- 关键词：髓系肿瘤
- 自噬与糖尿病心肌缺血/再灌注损伤被引量：6
- 2019年
- 现有的证据显示,糖尿病心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)较非糖尿病损伤加重,但是其详细的分子机制尚不完全清楚。虽然尚需进一步研究,但是自噬及其相关磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B-雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol-3-kinase-protein kinase B-mammalian target of rapamycin,PI3K-Akt-mTOR)信号转导通路在糖尿病心肌I/RI过程中发挥的作用越来越受到关注,将来可能成为防治糖尿病心肌I/RI的重要靶点。文章回顾自噬及其相关PI3K-Akt-mTOR信号转导通路与糖尿病I/RI的关系,重点综述自噬及其相关的PI3K-Akt-mTOR信号转导通路在糖尿病心肌I/RI和缺血预处理心肌保护中的地位和发挥的调节作用。
- 孙超薛富善李慧娴刘亚洋杨桂珍
- 关键词：自噬糖尿病缺血预处理
- 糖原合成酶激酶3β在心肌缺血／再灌注损伤及保护中的作用被引量：2
- 2015年
- 背景糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase 3β，GSK-3β）是一种多功能丝氨酸廓氨酸激酶，在细胞代谢、生长、分化以及凋亡中发挥重要作用。GSK-3β通过磷酸化作用参与细胞内多条信号转导通路的调节。目的综述GSK-3β在心肌缺血／再灌注损伤（ischemia／reperfusion injury，I/RI）及相关保护措施中的作用。内容活化的GSK-3β通过放大炎症反应、诱导线粒体通透性转换孔不可逆性高水平开放以及激活多条凋亡途径参与心肌I／RI的发生，而抑制GSK-3β活性能明显提高心肌对I／RI的耐受性。另外，GSK-3β及其信号转导通路在病态心肌的异常改变是阻断多种干预措施发挥保护作用的重要原因。趋向恢复GSK-3β相关信号转导通路的正常反应性将有助于解决心肌I／RI相关研究的临床转化困局。
- 程怡薛富善李瑞萍刘高谱
- 关键词：糖原合成酶激酶3Β炎症反应线粒体通透性转换孔细胞凋亡
- 自噬和PI3K-Akt-mTOR信号转导通路在缺氧预处理对高糖心肌细胞缺氧/复氧损伤保护中的作用被引量：6
- 2018年
- 目的 探讨自噬和磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 hydroxy kinase， PI3K）-蛋白激酶B（protein kinase B， Akt）-雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin， mTOR）信号转导通路在缺氧预处理（hypoxia preconditioning， HPC）对高糖心肌细胞缺氧/复氧（anoxia/reoxygenation， AR）损伤中的作用及机制。 方法 将采用高糖培养基培养72 h的心肌细胞用随机数字表法分为5组：空白对照组（S组）、AR损伤对照组（AR组）、HPC组、渥曼青霉素＋HPC组（Wo＋HPC组）、雷帕霉素＋HPC组（Ra＋HPC组）。采用乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase， LDH）检测试剂盒检测心肌细胞LDH漏出率，Annexin V/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况，蛋白印迹法检测心肌细胞微管相关蛋白1轻链3（microtubulesas sociated protein light， LC3）-Ⅱ、Beclin-1、mTOR、PI3K表达和磷酸化（phospho， p）蛋白激酶B/蛋白激酶B（p-Akt/Akt）比值。 结果 与AR组比较，Wo＋HPC组LDH漏出率、早期和晚期凋亡率降低（P〈0.05），LC3-Ⅱ和Beclin-1表达降低（P〈0.05），mTOR、PI3K表达和p-Akt/Akt比值升高（P〈0.05）。HPC组各指标与AR组比较，差异均无统计学意义（P〉0.05）。与HPC组比较，Wo＋HPC组LDH漏出率、早期和晚期凋亡率降低（P〈0.05），Beclin-1表达降低（P〈0.05），mTOR、PI3K表达和p-Akt/Akt比值升高（P〈0.05）。 结论 激活PI3K-Akt-mTOR信号转导通路抑制自噬可明显改善HPC对高糖心肌细胞AR损伤的保护作用。
- 孙超杨桂珍薛富善李慧娴刘亚洋廖旭
- 关键词：心肌细胞高糖缺氧预处理自噬磷脂酰肌醇3激酶
- 细胞凋亡抑制参与联合应用吗啡和肢体远隔缺血后处理的心肌保护作用被引量：2
- 2017年
- 探讨抗细胞凋亡在联合应用吗啡和肢体远隔缺血后处理（remote ischemic postconditioning, RIP）心肌保护中的作用。 方法 采用大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury, I/RI）模型，根据随机数字表法将60只SD大鼠分为4组（每组15只）：缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）组（I/R组）、肢体RIP组（RIP组）、吗啡后处理组（M组）以及联合应用吗啡和肢体RIP组（M＋RIP组）。再灌注末留取缺血中心区、缺血边缘区和非缺血区心肌组织标本，应用Tunel染色法检测心肌细胞凋亡指数（apoptotic index, AI），应用实时定量PCR技术检测心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达，光学和电子显微镜观察缺血中心区心肌细胞形态。 结果 I/R组、RIP组、M组和M＋RIP组缺血中心区心肌细胞AI分别为（49.1±4.9）%、（34.2±2.9）%、（39.7±3.2）%和（29.0±4.9）%，缺血边缘区心肌细胞AI分别为（12.7±2.2）%、（8.2±1.6）%、（10.4±2.7）%和（5.9±1.4）%。在缺血中心区和缺血边缘区，M＋RIP组心肌细胞AI较I/R组和M组明显降低（P＜0.05），M＋RIP组的Bcl-2 mRNA表达较I/R组、RIP组和M组明显增强（P＜0.05），而M＋RIP组的Bax mRNA表达则较I/R组、RIP组和M组明显降低（P＜0.05），M＋RIP组的Bcl-2/Bax较I/R组、RIP组和M组明显升高（P＜0.05）。光学和电子显微镜检查显示，M＋RIP组的心肌形态和线粒体结构明显改善。 结论 Bcl-2相关信号通路的细胞凋亡抑制是联合应用吗啡和肢体RIP的心肌保护作用机制之一。
- 王世玉崔昕龙薛富善刘和平李瑞萍刘高谱杨桂珍孙超廖旭
- 关键词：吗啡后处理凋亡心肌保护
