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真菌耐药性产生的新机制:热休克蛋白90的作用被引量：3: 2009年; 近年来白念珠菌病发病率呈上升趋势。随着抗真菌药物的广泛应用,临床出现的耐药菌株也不断增多。最近对耐药菌株的产生机制的研究有了重大突破,对Hsp90的作用有了更深的了解,即Hsp90可以参与由于快速选择而出现的真菌耐药机制,而且对耐药性的维持也起到一定作用。该文对Hsp90对真菌产生耐药性的机制及其临床应用的研究进展作一综述。; 许辉李若瑜刘伟; 关键词：HSP90 耐药真菌

根癌农杆菌介导的尿嘧啶缺陷烟曲霉转化是基因敲除的有效方法被引量：6: 2008年; 目的:探讨用嘧啶营养缺陷作为筛选标记、根癌农杆菌介导的转化方法敲除烟曲霉基因。方法:以pyrG作为筛选标记,在双元载体pDHt/sk上分别构建烟曲霉FAP1和SHO1基因的打靶序列。构建好的质粒分别转化入根癌农杆菌。24℃条件下,含打靶质粒的根癌农杆菌与烟曲霉在不含尿嘧啶和尿苷的诱导培养基上共培养48h;然后将培养物转移到37℃,筛选转化子。结果:根癌农杆菌介导的烟曲霉转化同源重组率较高,FAP1基因为44%(7/16)、SHO1基因为35%(7/20)。结论:以pyrG作为筛选标记、根癌农杆菌介导的转化方法能高效敲除烟曲霉基因,为烟曲霉基因功能研究提供了有效方法。; 乔建军刘伟马彦万喆李若瑜; 关键词：根瘤菌曲霉菌基因

地塞米松对过氧化氢体外氧化杀伤烟曲霉的影响: 2009年; 目的研究地塞米松对过氧化氢(H2O2)体外杀伤烟曲霉(Aspergillus fumigatus,A.fumigatus)的影响。方法用不同浓度的地塞米松(0 mg/mL,0.02 mg/mL,0.2 mg/mL)处理烟曲霉孢子,按照处理时间不同分为A(0.5 h),B(2 h),C(7 h),D(16 h)4组。用测定H2O2杀伤真菌的标准方法——斑点法分别测定各组烟曲霉孢子对H2O2的氧化杀伤敏感性。结果在H2O2浓度为1.5 mmol/L下,未用地塞米松处理的孢子(阴性对照)氧化杀伤敏感性为5×101(生长良好)。A(0.5 h)组:地塞米松0.02 mg/mL处理后孢子的氧化杀伤敏感性为5×103;地塞米松0.2 mg/mL处理后孢子的氧化杀伤敏感性为5×104。B(2 h)组:地塞米松0.02 mg/mL和0.2 mg/mL处理后孢子的氧化杀伤敏感性均为5×103。C(7 h)和D(16 h)组:不同浓度地塞米松处理后氧化杀伤敏感性与阴性对照没有差别(均为5×101)。结论地塞米松使H2O2在体外杀伤烟曲霉的能力增强,这种作用仅发生在地塞米松接触烟曲霉孢子的早期(<2 h)。; 许辉陈伟李丽娟万喆王晓红李若瑜刘伟; 关键词：烟曲霉地塞米松

近平滑念珠菌ERG 11基因编码区的克隆及生物信息学分析被引量：1: 2010年; 目的克隆、测序近平滑念珠菌ERG11基因的编码区序列并进行生物信息学分析。方法运用生物信息学的方法 ,通过与白念珠菌ERG11基因碱基序列同源性比对,在近平滑念珠菌基因组(www.sanger.ac.uk/sequencing/Candida/pa-rapsilosis/)中寻找可能的ERG11基因序列(CpERG11),并据此序列设计引物,经PCR扩增近平滑念珠菌标准株(ATCC22019)的ERG11基因片段,产物经电泳、纯化、克隆到质粒prG-AMAI-NotI中,转染DH10B大肠杆菌细胞,并酶切鉴定筛选阳性克隆测序分析。结果近平滑念珠菌ERG11编码区由1569个碱基组成,编码一段含522个氨基酸的多肽。近平滑念珠菌ERG11的编码区序列与白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、酿酒酵母菌ERG11基因的同源性分别为74%、75%、65%、64%。该近平滑念珠菌ERG11的编码区为唑类药物作用靶酶基因。结论成功克隆、测序、并生物信息学分析近平滑念珠菌ERG11基因的编码区序列,为进一步的功能研究奠定基础。; 冯丽娟万喆王晓红李若瑜刘伟; 关键词：近平滑念珠菌 ERG11基因克隆测序

布洛芬对曲霉的体外抗真菌活性评价: 2009年; 目的观察布洛芬对曲霉临床分离株的体外抗真菌活性。方法分别用微量液基稀释法和纸片扩散法,测定布洛芬对10株烟曲霉、黄曲霉和土曲霉的抗菌活性。结果微量液基稀释法显示布洛芬对曲霉的最低抑菌浓度(MIC)范围为1000～2000μg/mL,最低杀菌浓度(MFC)范围为2000～8000μg/mL;纸片扩散法也显示布洛芬有体外抗曲霉活性:48h时,1000μg布洛芬对曲霉产生的抑菌圈直径为(20.1±3.89)mm。结论布洛芬有体外抗曲霉活性。; 李丽娟陈伟许辉万喆李若瑜刘伟; 关键词：曲霉布洛芬抗真菌药物敏感性试验体外

几种新型抗真菌药物简介被引量：6: 2007年; 脂质型二性霉素B,新型唑类药物如伏立康唑,以及作用于真菌细胞壁的药物如卡泊芬净和米卡芬净的问世,反映了抗真菌药物研究向高效、广谱、低毒的方向发展的一个特点,无疑为各种类型真菌感染的药物治疗提供了新型的有力的手段;与传统的抗真菌药物如脱氧胆酸二性霉素B和氟康唑等相比,这些药物临床疗效好,毒副作用低,对于系统性真菌感染的防治具有重大意义,文中就这方面的信息做了简介。; 刘伟李若瑜; 关键词：伏立康唑卡泊芬净米卡芬净

申克孢子丝菌体外药敏试验研究近况被引量：4: 2009年; 申克孢子丝菌是孢子丝菌病的致病菌,如何选择高效敏感的抗真菌药物对于有效治疗孢子丝菌病具有重要意义,抗真菌药物体外药敏试验是评价抗真菌药物抗真菌活性的重要手段。综述了申克孢子丝菌体外药敏试验的研究近况,展望了研究及应用前景。; 王晓慧刘伟李若瑜; 关键词：申克孢子丝菌药敏试验体外

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教育部科学技术研究重点项目(107002)