教育部科学技术研究重点项目(107037)
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
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- 二色补血草液泡膜H^+-ATP酶C亚基(LbVHA-C)基因克隆和表达分析被引量：2
- 2009年
- 从二色补血草cDNA文库中分离出一个V-H+-ATP酶C亚基(LbVHA-C)基因全长cDNA序列。该基因全长为729bp。其中,开放读码框(ORF)为498bp,编码165个氨基酸,预测编码蛋白的分子量为16.6kDa,理论等电点为8.62。用实时定量RT-PCR方法进一步研究二色补血草在NaCl、NaHCO3和NaCO3胁迫下的不同时间内该基因表达模式的结果表明,NaCl强烈诱导二色补血草叶组织中LbVHA-C基因的表达,但其根部的表达变化不明显。NaHCO3胁迫下LbVHA-C基因在根部组织的表达受抑制。Na2CO3胁迫24h时的LbVHA-C基因在根和叶部组织中的表达都强烈受抑制,随后在根和叶组织的表达量逐步升高。
- 蒋丽丽杨传平徐晨曦马辉王玉成
- 关键词：二色补血草实时定量RT-PCR
- 二色补血草凝集素(Lectin)序列分析及表达被引量：2
- 2008年
- 从二色补血草cDNA文库中分离出一个凝集素(Lectin)基因全长cDNA序列。该基因全长977bp。其中:5′非翻译区(UTR)103bp,3′非翻译区(UTR)208bp,开放阅读框(ORF)全长663bp,编码由221个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白的相对分子质量为25kD,理论等电点为8.82。利用实时定量RT-PCT方法进一步研究了二色补血草在植物病原菌(尖孢镰刀菌)侵染条件下不同时间点该基因的表达情况。结果表明,在尖孢镰刀菌胁迫处理的条件下,能诱导Lectin基因在二色补血草的根、叶中表达,说明该基因与植物抗病相关。
- 齐晓天王玉成杨传平曾丽萍
- 关键词：二色补血草凝集素RT-PCR
- 紫杆柽柳MnSOD基因在非生物胁迫中的作用被引量：8
- 2008年
- 构建了酵母表达载体pYES2-MnSOD,并将其转入酿酒酵母INVSc1,以转空载体pYES2的酵母INVSc1为对照,检测其抗NaCl、Na_2CO_3、NaHCO_3和紫外线胁迫能力。结果表明,转MnSOD基因酵母在以上逆境因素胁迫下的存活率有明显提高,说明MnSOD基因具有较强的抗NaCl、Na_2CO_3、NaHCO_3和紫外线胁迫能力。
- 班巧英刘桂丰姜静常万霞王玉成
- 关键词：酿酒酵母非生物胁迫
- 二色补血草硫氧还蛋白(Trx)的克隆和表达分析被引量：6
- 2008年
- 从二色补血草cDNA文库中分离出1个硫氧还蛋白基因全长cDNA序列。基因全长1138 bp,其中,5′非翻译(UTR)区128 bp,3′非翻译区212 bp,开放阅读框(ORF)全长798 bp,编码265个氨基酸,编码蛋白的分子量为28.58 kDa,理论等电点(pI)为9.68。BlastP分析表明二色补血草Trx与拟南芥Trx序列同源性为52%,与葡萄Trx序列同源性为76%,从11个物种的氨基酸多序列比对可以看出Trx氨基酸序列保守性较高。实时定量RT-PCR方法检测低温、NaCl和PEG胁迫不同时间后的基因在二色补血草中表达模式的结果表明,NaCl能诱导Trx基因在二色补血草叶中表达,胁迫24 h后达到高峰,而聚乙二醇和低温处理则抑制Trx在二色补血草根和叶的表达.
- 张大伟杨传平王玉成班巧英马辉
- 关键词：二色补血草硫氧还蛋白基因克隆实时荧光定量PCR
- 一个新的二色补血草金属硫蛋白基因LbMT2的克隆及其表达分析被引量：8
- 2008年
- 从二色补血草cDNA文库中分离出一个新的金属硫蛋白基因LbMT2全长cDNA序列。该基因全长518bp,其中5′非翻译区(UTR)64bp,3′非翻译区205bp,开放阅读框(ORF)249bp,编码由82个氨基酸组成的蛋白质,编码蛋白的分子量为8.1kDa,理论等电点(pI)为4.72。利用实时定量PCR方法研究了二色补血草在CuSO4、CdCl2、NaCl、低温和PEG胁迫下不同时间该基因的表达模式。结果表明,CuSO4、CdCl2、NaCl和低温处理均能诱导LbMT2基因在二色补血草的根和叶中的表达,而PEG处理则抑制了LbMT2在根和叶中的表达。构建LbMT2基因的原核表达载体pGEX-LbMT2,通过IPTG诱导在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中融合表达,SDS-PAGE电泳获得35kDa的蛋白条带,大小与预期相符。
- 班巧英刘桂丰王玉成张大伟蒋丽丽
- 关键词：金属硫蛋白实时定量PCR原核表达
- 二色补血草OEE2基因的克隆和表达被引量：2
- 2009年
- 从二色补血草中分离出一条含有完整开放读码框(ORF)序列的OEE2基因。该基因全长994bp,其中5'非翻译区27bp,3'非翻译区160bp,ORF全长807bp,共编码264个氨基酸,编码蛋白的分子量为28.2kDa,理论上的等电点为7.66。BlastP分析表明,二色补血草OEE2与马铃薯OEE2序列同源性最高,与喇叭水仙OEE2序列同源性最低,从9个物种的氨基酸多序列比对中可以看出,OEE2的氨基酸序列保守性较高。实时定量RT-PCR方法检测该基因对低温、NaCl和聚乙二醇(PEG)胁迫的基因表达模式的结果表明,PEG和低温能诱导OEE2基因在二色补血草叶中表达,这两种处理的OEE2基因表达量于胁迫48h后都达到高峰,而在NaCl胁迫下OEE2在二色补血草根和叶中表达都受抑制。
- 张大伟王玉成杨传平
- 关键词：二色补血草基因表达
