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用抗SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体定位研究受染器官被引量：1: 2009年; 目的利用单克隆抗体研究人体内严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)感染的靶细胞。方法利用抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体,采用免疫组织化学检测的方法,对一例SARS死亡病例进行组织定位研究。结果在该病例多器官的组织中检测到SARS-CoV。结论SARS-CoV在体内多种组织中存在得到证实,SARS是以肺脏为主要靶器官的多脏器受染的疾病,这为SARS临床诊断和实验研究提供了依据。; 戚扬郝俊勤迟淑萍孙艳玲赵景民程云; 关键词：N蛋白单克隆抗体

一株变异SARS冠状病毒N蛋白的原核表达及活性测定被引量：1: 2004年; 目的 :克隆编码严重急性呼吸综合征冠状病毒 (SARS CoV)N蛋白的DNA ,构建原核表达质粒pGEX 2T/N ,并诱导表达。方法 :采用RT PCR方法从病毒培养液中获得N基因片段 ,并克隆入T EASY载体中。经PCR、双酶切鉴定后 ,测序。将N蛋白基因序列定向插入原核表达载体pGEX 2T中 ,表达融合蛋白。用表达产物与抗SARS CoV抗体阳性血清做Westernblot。结果 :N蛋白DNA测序的结果与GenBank比对缺失 2 0个bp。GST N融合蛋白以可溶形式表达。Westernblot检测表明 ,其与抗SARS CoV抗体阳性血清的反应呈阳性。结论 :成功地构建原核表达质粒pGEX 2T/N ,并表达GST N融合蛋白 ,为下一步的研究奠定了基础。; 戚扬郑宇舒翠莉姜丽胡燕貌盼勇程云; 关键词：严重急性呼吸综合征 N蛋白

抗SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备和初步应用被引量：6: 2005年; 目的:研制抗SARSCoVN蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化的GSTN免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗SARSCoVN蛋白mAb;用免疫双扩散鉴定Ig亚类;Westernblot和免疫组化鉴定mAb的特异性;间接ELISA检测mAb的腹水效价、相对亲和常数。结果:获得1株可分泌特异性mAb的抗SARSCoVN蛋白的杂交瘤细胞系3E10H,Ig亚类为IgG2b;其腹水效价为8×10-5;其相对亲和力1.725×10-10mol/L,Westernblot和免疫组化阳性。结论:获得特异性抗SARSCoVN蛋白的mAb,为进一步用于临床诊断和实验研究创造了条件。; 孙杰文翠容戚扬李靖汪莉亚周继文程云; 关键词：N蛋白单克隆抗体

抗SARS冠状病毒N蛋白多克隆抗体的制备和鉴定: 2006年; 目的制备抗SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白的多克隆抗体。方法以纯化的GST-N免疫新西兰白兔,制备抗SARS-CoVN蛋白多抗,间接ELISA法检测兔血清效价,Westernblot和免疫组化鉴定多抗的特异性。结果制备的抗SARS-CoVN蛋白多克隆抗体经ELISA检测效价为1·2×10-5,Westernblot和免疫组化证实此抗体可与SARS-CoVN蛋白特异性结合。结论成功地制备了抗SARS-CoVN蛋白多抗,为进一步的临床诊断和实验研究创造了条件。; 戚扬文翠容迟淑萍孙杰朱雷周继文程云; 关键词：SARS病毒 N蛋白

PGEFP-C1/N载体的构建及其在转染细胞中的初步定位: 2005年; 目的观察SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白的亚细胞定位。方法将SARS-CoV N基因片段克隆入融合绿色荧光蛋白载体(PGEFP-C1)中。采用瞬时转染技术,在A549、VeroE6细胞株中利用荧光显微镜观察GPT-N蛋白的亚细胞定位,Westernblot鉴定N蛋白的表达。结果成功构建了PGEFP-C1/N表达载体,在A549、VeroE6细胞中观察到N蛋白定位于细胞胞浆中,Western blot证实了N蛋白表达。结论SARS-CoV N蛋白在真核细胞中定位于细胞胞质中。; 戚扬孙杰文翠容李靖舒翠莉程云; 关键词：SARS病毒 N蛋白亚细胞定位

Safety of convalescent sera for the treatment of viral severe acute respiratory syndrome： an experimental model in rhesus macaque被引量：1: 2013年; Serotherapy has assumed different clinical roles over the years.With the development of antibiotics,the use of serotherapy to treat bacterial diseases declined.However,interest in viral serotherapy increased due to the lack of a specific therapy for viral infections.Human convalescent sera have been used to treat and prevent measles,mumps,polio,Spanish flu,vaccinia and varicella viral infection,among others.; HE Wei-pingLI Bo-anZHAO JunCHENG Yun; 关键词：痘病毒感染呼吸系统综合症猕猴

严重急性呼吸综合征相关抗体与激素应用的相关性及其临床意义被引量：4: 2003年; 目的 :探讨严重急性呼吸综合征 (SARS)患者体内 SARS相关抗体出现时间、抗体滴度与激素应用的相互关系及其可能的临床意义。方法 :采集 2 2例 SARS患者 (临床诊断 )不同发病期及 3例 SARS密切接触者血清 ,采用酶联免疫吸附试验(EL ISA)检测其中的 SARS相关抗体 ,并对使用激素治疗的 17例 SARS患者进行追踪检测。结果 :多数 SARS患者在发病后1～ 3d肺部未出现炎性病变征象前即可检测到 SARS相关抗体 ;3例密切接触者 SARS相关抗体也为阳性。 17例患者使用激素后 SARS相关抗体滴度均有所下降 ,其中 11例患者激素减至小剂量或停用后 ,有 10例患者 SARS相关抗体滴度较前上升 ,1例继续下降。结论 :SARS相关抗体滴度与激素应用具有相关性 ,该抗体与; 何卫平郑宇赵军陈昊李伯安李靖高蓉程云; 关键词：严重急性呼吸综合征相关抗体激素传染性非典型肺炎 ELISA

严重急性呼吸综合征自身免疫指标的初步研究: 2005年; 目的　探讨严重急性呼吸综合征(SARS)患者是否存在着自身免疫现象,寻找患者体内异常出现的抗自身组织器官的抗体。方法　随机选取2 7例SARS患者及18例健康献血员对照血清同时应用免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗线粒体抗体(AMA)、抗胃壁细胞抗体(PCA)、抗心肌抗体(HRA) ,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗肝肾微粒体抗体(LKM)及抗线粒体M2亚型抗体,同时利用猴肺组织基质片应用免疫荧光法定位血清中的SARS相关抗体的靶细胞。结果　2 7例SARS患者中有3例ANA阳性、1例SMA阳性、1例AMA阳性、1例LKM阳性、其余均为阴性;18例献血员中有1例ANA阳性、1例AMA阳性,其余均为阴性。统计分析表明SARS患者与献血员间各项自身抗体阳性率差异均不具有统计学意义。在2 7例SARS患者血清中有2 6例在肺组织细小支气管柱状上皮细胞的腔面尖端呈现强阳性荧光信号,献血员中有5例,统计分析表明两者阳性率差异有统计学意义。结论　SARS患者未出现抗肺外组织、器官的自身抗体。患者血清中出现了抗肺组织的自身抗体,定位于细小支气管柱状上皮细胞。; 李伯安何卫平刘岩舒翠利李靖高蓉侯俊李进程云; 关键词：SARS患者柱状上皮细胞免疫荧光法自身免疫现象抗平滑肌抗体

SARS相关抗肺自身抗体产生机制的初步研究被引量：4: 2003年; 目的 :检测严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中抗 SARS病毒抗体与肺组织的反应性。方法 :采用酶联免疫吸附法检测 SARS患者恢复期血清中抗 SARS病毒抗体 ,并采用肺组织与抗体共同孵育的方法 ,吸附抗 SARS病毒抗体中同肺组织反应的 SARS相关抗体。结果 :与肺组织共同孵育后 ,抗 SARS病毒抗体被部分中和 ,中和率为 13.6 %～ 32 .2 %。结论 :部分抗 SARS病毒抗体可以与肺组织反应 ,SARS病毒抗原同肺组织抗原有部分同源性。机体对 SARS病毒抗原和肺组织的交叉免疫性可能是; 陈昊李伯安赵军何卫平郑宇李靖高蓉程云; 关键词：严重急性呼吸综合征 SARS 自身抗体酶联免疫吸附法

严重急性呼吸综合征患者血清中存在抗肺组织抗体被引量：10: 2003年; 目的 :建立特异性的检测严重急性呼吸综合征 (SARS)相关抗体的血清学方法。方法 :制备 SARS患者肺组织包被抗原 ,采用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)检测 SARS患者血清中特异性抗体。结果 :SARS患者血清中存在 SARS相关的抗人肺组织抗体 ,其阳性率达 92 .86 %(2 6 / 2 8) ,正常献血员为 11.4 3%(12 / 10 5 ) ,统计学分析表明 ,SARS相关抗体的检出率在患者和献血员之间存在明显差异。结论 :SARS患者血清中存在抗肺组织抗体 ,该抗体的存在提示机体免疫反应可能参与了疾病病理损伤过程 ;检测该抗体可能有助于; 郑宇李伯安何卫平陈昊赵军李靖貌盼勇毛远丽高蓉程云; 关键词：严重急性呼吸综合征非典型肺炎酶联免疫吸附试验血清学方法

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