中央高校基本科研业务费专项资金(XDJK2010C094)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：宋振辉卿家超夏庆友刘劲冷勇更多>>
- 相关机构：西南大学新疆农业大学重庆大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家高技术研究发展计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 烟草组织蛋白酶B基因的结构特征分析及mRNA表达被引量：1
- 2012年
- 为了明确烟草中组织蛋白酶B基因的功能,对烟草组织蛋白酶B基因(NbCathB)进行了序列分析。该基因ORF长951 bp,编码316个氨基酸。该基因蛋白质的预测分子量为35.2 kD,等电点为6.14。对NbCathB的基因结构分析显示,该基因具有8个外显子,外显子/内含子边界处均符合GT-AG规则。比较NbCathB和AtCathB基因,显示两者编码氨基酸序列一致性为61%。通过SMART软件分析,NbCathB和AtCathB基因的结构域很相似。在上清液、菌体、菌液以及水4种处理烟叶中的表达谱鉴定显示,在喷施MP制剂(巨大芽孢杆菌)菌体和菌液的烟叶中NbCathB的表达量明显高于在喷施MP制剂上清液的烟叶中的表达量,而在喷施水的烟叶中的表达量最低。说明NbCathB很可能发挥了AtCathB相同的作用。
- 赵敏汪长国刘劲寇明钰李宁吴艳戴亚夏庆友
- 关键词：烟草
- 微生物制剂MP喷施烟叶后的差异蛋白分析被引量：3
- 2012年
- 为明确微生物制剂MP(芽孢杆菌)喷施烟叶后对其品质的影响,以喷施微生物制剂MP和清水的烟叶作为研究材料,采用蛋白质双向凝胶电泳法分析了烟叶中蛋白质的表达差异。结果显示,在MP制剂诱导烟叶后,有6个蛋白质的表达量发生了显著变化,其中5个蛋白点上调表达,1个蛋白点下调表达。利用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱法(MALDI TOF/TOF MS)对这6个差异蛋白进行了分析,结果共鉴定出4个差异蛋白,分别为烟草酸性几丁质酶PR-P、烟草几丁质酶前体、内切几丁质酶A前体和逆渗透蛋白。几丁质酶和逆渗透蛋白与植物的抗病性密切相关,说明在喷施MP制剂后烟叶可能产生抵御外源病菌的应急机制并进而提高其抗病性。
- 赵敏汪长国刘劲寇明钰李宁吴艳戴亚夏庆友
- 关键词：烟叶双向凝胶电泳差异蛋白
- 猪传染性胃肠炎病毒样颗粒在杆状病毒表达系统中的体外组装被引量：1
- 2014年
- 利用RT-PCR方法扩增TGEV M、sM和N结构蛋白基因,分别将M、sM和N基因克隆入杆状病毒供体质粒pFastBacTMDual,获得转移质粒pFastBacTM Dual-M、pFastBacTM Dual-sM和pFastBacTM Dual-N,将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,经抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-M、Bacmid-sM和Bacmid-N,在Cellfection作用下,将杆状病毒重组质粒转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒rBac-M、rBac-sM和rBac-N。通过间接免疫荧光试验检测显示,重组蛋白在杆状病毒感染的sf9细胞中获得正确表达。将重组杆状病毒按照以下感染组合进行TGEV VLPs组装的研究:rBac-M、rBac-sM、rBac-N单独感染sf9细胞,rBac-M+rBac-N、rBac-M+rBac-sM联合感染sf9细胞。结果表明,rBac-M、rBac-M+rBac-sM、rBac-M+rBac-N感染的昆虫细胞可见类病毒样粒子,rBac-sM、rBac-N单独感染sf9细胞未见形成明显的病毒样颗粒。试验结果为进一步研究TGEV结构蛋白在病毒装配过程中的作用提供了理论依据。
- 宋振辉卿家超买买提.艾孜子齐晓娟叶翠芳
- 关键词：杆状病毒表达系统病毒样颗粒
- 猪传染性胃肠炎病毒M、sM基因重组杆状病毒的构建及病毒样颗粒的组装被引量：8
- 2013年
- 利用RT-PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）M和sM结构蛋白基因，将其分别克隆人载体pFastBac^TM Dual，获得转移质粒pFastBac^TM Dual-M和pFastBac^TM Dual-M-sM，将重组质粒转化至DHl0Bac感受态细胞，经抗性与蓝白斑筛选，获得杆状病毒重组质粒Bacmid-M和Bacmid-M-sM，在Cellfection作用下，将杆状病毒重组质粒转染昆虫细胞sf9，获得重组杆状病毒rBac-M和rBac-M-sM。通过WesternBlot、间接免疫荧光试验（IFA）进行检测，结果显示：重组蛋白在杆状病毒感染的sf9昆虫细胞中获得正确表达。将重组杆状病毒rBac-M和rBae-M-sM分别感染sf9昆虫细胞，进行TGEV病毒样颗粒（VLPs）的体外组装试验。结果表明，M蛋白在sf9细胞内单独表达，M蛋白和sM在sf9细胞内共同表达，都可形成TGEV病毒样颗粒，而且病毒粒子大小不等，直径在61～101nm。试验结果为进一步研究TGEV结构蛋白在病毒装配过程中的作用提供了理论依据。
- 冷勇宋振辉卿家超翟少华买买提.艾孜子
- 关键词：M基因SF9细胞病毒样颗粒
