浙江省中医药重点研究计划(2012ZZ002) 作品数:10 被引量:36 H指数:4 相关作者: 徐志远 程向东 杜义安 吕航 汪丽菁 更多>> 相关机构: 浙江省肿瘤医院 浙江中医药大学 浙江中医药大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 浙江省中医药重点研究计划 浙江省中医药科技计划项目 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
槐耳清膏抑制小鼠模型人胃癌MKN-45细胞生长和转移的实验研究 被引量:8 2016年 目的研究槐耳清膏对人胃癌MKN-45细胞在裸鼠体内生长和转移的抑制作用,并探讨其作用机制。方法采用BALB/c裸鼠建立人胃癌MKN-45细胞淋巴结转移模型,随机分为槐耳清膏组、空白对照组,每组20只。建模后,每5天测量裸鼠荷瘤并计算肿瘤相对体积(RTV);用药5周后处死裸鼠,Real-time q PCR检测肿瘤组织Wnt、β-catenin、E-cadherin、N-cadherin和VEGF表达水平。结果槐耳清膏组末次测得的足垫瘤RTV为(662.75±450.66)mm3,明显小于空白对照组的(1611.85±611.83)mm3(P<0.01)。槐耳清膏组淋巴结转移率8/20(40%)与对照组15/20(70%)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。槐耳清膏组肿瘤组织Wnt、β-catenin、N-cadherin和VEGF的△CT值分别为(11.36±1.32)、(11.31±1.76)、(12.82±2.22)、(13.22±1.52),均高于对照组的(9.48±2.07)、(9.37±1.88)、(7.74±2.64)、(11.04±1.61),而E-cadherin的△CT值(8.26±2.39)低于对照组的(10.64±1.48)(P<0.05)。结论槐耳清膏可抑制人胃癌MKN-45细胞在裸鼠上的生长及转移,其机制可能与抗血管生成和阻碍上皮间质转化(EMT)过程有关。 张袁骕 程向东 徐志远 吕航 杜义安 汤加宁 罗华荣关键词:裸鼠 槐耳清膏 淋巴结转移 上皮间质转化 槐耳清膏负性调控PI3K/Akt通路抑制裸鼠胃癌腹膜转移 被引量:5 2016年 目的:研究槐耳清膏抑制裸鼠胃癌腹膜转移的机制。方法:建立裸鼠胃癌模型24只,随机分为生理盐水组(n=12,每2天腹腔注射0.9%氯化钠溶液1.5m L)、槐耳清膏组(n=12,每2天腹腔注射15mg/m L的槐耳清膏1.5m L)。记录各组裸鼠体质量变化,实验性腹膜转移癌指数(e PCI),原位肿瘤相对体积(RTV),q RT-PCR检测各组胃癌组织PI3K、Akt、MMP-2、MMP-9、u PA m RNA表达情况。结果:生理盐水组与槐耳清膏组在体质量变化上无统计学差异,槐耳清膏组的实验性腹膜癌转移指数(e PCI)和RTV均显著低于生理盐水组(P<0.05),槐耳清膏组胃癌组织PI3K、Akt、MMP-2、MMP-9、u PA m RNA表达也低于生理盐水组(P<0.05)。结论:槐耳清膏可以抑制胃癌腹膜转移,可能是通过负性调控PI3K/Akt通路这一机制实现的。 汤加宁 程向东 徐志远 杜义安 张袁骕 谢华夏 吕航 黄挺 郑国淀 陈佳辉关键词:槐耳 胃癌 腹膜转移 槐耳清膏增加人胃腺癌细胞MKN45对顺铂敏感性研究 被引量:11 2015年 目的:体外观察槐耳清膏在增加人胃腺癌MKN45细胞对顺铂(DDP)敏感性中的作用并探讨可能的机制。方法:MTT法观察不同浓度槐耳清膏、DDP单独或联合应用对MKN45细胞生长的抑制作用,并通过计算Q值判定两药合用的效果;用流式细胞仪检测槐耳清膏与DDP联用对MKN45细胞凋亡和细胞周期的影响。结果:单药槐耳清膏及DDP均能抑制MKN45细胞的增殖,且抑制率呈明显的剂量、时间依赖关系;两药联用作用24h时,表现为协同效应,而作用48h时主要表现为相加效应;槐耳清膏与DDP联用能显著增加MKN45细胞的凋亡率,并诱导细胞阻滞于S期。结论:槐耳清膏不仅能直接抑制胃癌细胞MKN45的增殖,与DDP联用时还能增加胃癌细胞对化疗的敏感性,而这种增敏作用可能是通过增加诱导细胞凋亡和S期阻滞而实现的。 汪丽菁 谢华夏 徐志远 杜义安 程向东关键词:胃癌 顺铂 槐耳 ZIP4蛋白在胃癌中的表达及其临床意义 被引量:3 2013年 [目的]研究ZIP4蛋白在胃癌中的表达并分析其临床意义。[方法]免疫组化检测70例手术切除胃癌组织及相应癌旁组织标本中ZIP4的表达,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。[结果]胃癌及癌旁组织中ZIP4阳性表达率分别为52.9%(37/70)及92.9%(65/70)。与癌旁组织相比,68.6%(48/70)病人的胃癌组织中ZIP4表达明显下降;ZIP4的表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤大小、部位、浸润深度、淋巴结转移均无相关性(P>0.05),而与肿瘤的Lauren’s分型、TNM分期明显有关(P<0.05);单因素及多因素分析均显示,肿瘤侵犯深度、淋巴结转移、Lauren’s分型、TNM分期及ZIP4表达水平是影响胃癌预后的独立危险因素(P<0.05),ZIP4低表达组患者5年生存率明显降低。[结论]ZIP4表达水平与胃癌Lauren’s分型、临床分期及预后密切相关,可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要参考指标。 徐志远 程向东 杜义安 黄灵关键词:胃肿瘤 预后 免疫组织化学 槐耳浸膏逆转胃癌耐药细胞上皮间质转化的实验研究 被引量:1 2016年 目的研究槐耳浸膏对胃癌耐药细胞(SGC7901/Fu)耐药性的逆转作用及对上皮间质转化(EMT)的影响。方法CCK-8法计算SGC7901/Fu细胞的耐药性;光镜观察细胞形态的改变;realtimeRT-PCR检测EMT相关标记物、转录因子的表达;Western.blot法检测snail.及Zeb2蛋白的表达;激光共聚焦显微镜观察E—cadherin表达及分布。结果0.1-0.5mg/m1浓度范围内,槐耳浸膏能增加sGc-7901/Fu细胞对5-Fu、DDP的敏感性;槐耳浸膏作用后sGc7901/Fu呈上皮样细胞形态改变,伴上皮表型标记物表达下调、间质表型标记物表达上调,侵袭能力增强。结论槐耳浸膏能部分逆转SGC.7901/Fu细胞的耐药性,其机制可能是通过调控EMT实现的。 徐志远 程向东 杜义安 吕航 张袁驌 陈佳辉关键词:胃癌 化疗耐药 上皮间质转化 槐耳 外周血miRNA与胃癌早期诊断相关研究进展 被引量:2 2015年 胃癌(Gastric Cancer)在我国恶性肿瘤发病率和病死率均排在第2位,目前主要依靠早期明确诊断和手术相结合的方法提高胃癌患者的生存率,且按TNM分期标准,经个体化综合治疗后Ⅲ、Ⅳ期患者的5年生存率显著低于Ⅰ、Ⅱ期。〉80%胃癌患者中晚期才被确诊,因此有必要探索一种新的特异性和敏感性高的肿瘤标记物应用于胃癌的早期诊断。 张袁骕 裘华森 程向东 徐志远关键词:MIRNA 外周血 TNM分期标准 个体化综合治疗 肿瘤标记物 转基因小鼠胃癌模型的研究进展 被引量:1 2014年 在研究建立胃癌小鼠模型的初期,研究者利用幽门螺杆菌(Hp)感染、化学致癌等方式诱导近郊品系小鼠胃发生癌变。然而,该系小鼠胃癌模型产生的肿瘤多为鳞状细胞胃癌,不同于人常见的胃腺癌。近年来,基因工程技术的快速发展促进了转基因小鼠胃癌模型的出现。转基因小鼠胃癌模型是直接将调控胃癌发生的相关基因转染到小鼠胚胎中而形成肿瘤的一种新技术,其形成肿瘤的形态特征与人肿瘤的自然发生极为相似,且发生于特定组织,特异性较高。因此,转基因动物在胃癌形成、发展机制,尤其是信号通路研究中具有独特的优势,对研究基因突变而引起的遗传疾病发病机制十分有效,是一种极为理想的胃癌模型。 谢华夏 程向东 徐志远关键词:胃癌 小鼠模型 转基因 苦参碱联合Ⅹ线对肝癌细胞协同杀伤作用的实验 被引量:2 2015年 目的探讨苦参碱和X线对人肝癌Hep G2细胞协同杀伤作用以及诱导细胞凋亡的机制。方法采用MTT法检测细胞活力;ELISA试剂盒检测细胞凋亡;Real-time RT-PCR检测Bcl-2及Bax表达;Western blot检测caspase-9、pro-caspase-9及细胞色素C(cytochondrial-C)的表达;Nobi Flow GOT-IFCC和Nobi Flow LDH-L试剂盒测定LDH、AST水平。结果 0.3 mg/ml苦参碱预处理12 h能显著增加X线(3Gy)对Hep G2细胞的杀伤作用,增加Hep G2细胞凋亡率,抑制Bcl-2的表达,提高胞质内细胞色素C及caspapase-9水平;联合应用X线及苦参碱后人肝细胞中LDH及AST水平、细胞形态均未发生显著改变。结论苦参碱联合X线能协同抑制Hep G2细胞生长、诱导细胞凋亡,同时不会加重对人肝细胞的损害。 汪丽菁 程向东 徐志远 应莉莎 谢华夏关键词:苦参碱 X线 凋亡 肝癌 胃癌腹膜种植转移动物模型建立的研究进展 2014年 腹膜转移是胃癌进展过程中以及胃癌患者术后复发的常见现象,严重影响患者5年生存率。建立一个成熟、稳定、可靠、价廉的胃癌腹膜种植转移动物模型,将有助于研究胃癌腹膜转移的分子机制、病理机制以及抗癌药物的作用,腹腔热灌注化疗的效应等。研究者曾用幽门螺杆菌(Hp)感染动物,化学致癌物质诱导动物,基因工程技术构建转基因动物等方式建立胃癌模型。这些方法具有造模时间长、腹膜种植转移率低、潜在生物威胁、价格昂贵的缺陷。这些年来,国内外主要采用细胞系建立胃癌腹膜种植转移动物模型,具有成瘤周期短、成瘤率高、可以根据不同实验目的建立针对性模型等特点,极大推动了胃癌腹膜转移的研究。本文主要对当前采用细胞系建立胃癌腹膜种植转移动物模型的方法及其应用进行综述。 汤加宁 程向东 徐志远关键词:胃癌 腹膜种植转移 动物模型 细胞系 槐耳浸膏逆转人胃癌耐药细胞多药耐药性的实验研究 被引量:10 2016年 [目的]体外观察槐耳浸膏对胃癌耐药细胞(SGC-7901/FU)多药耐药性的影响。[方法]CCK-8法检测SGC7901/FU细胞的耐药性;谷胱甘肽(GSH)还原酶循环法检测SGC-7901/FU细胞内GSH含量的变化;流式细胞仪检测SGC-7901/FU细胞的凋亡率。[结果]SGC-7901/FU细胞内GSH含量[(13.20±1.51)nmol/10~6细胞]较SGC7901细胞[(6.47±0.85)nmol/10~6细胞]显著增高(P〈0.05);槐耳浸膏能抑制SGC7901/FU细胞增殖,24h、48h的半数抑制浓度(IC50)分别为2.43mg/ml和2.04mg/ml;0.1~0.5mg/ml浓度范围内槐耳浸膏增加SGC-7901/FU细胞对5-Fu、DDP的敏感性,并降低GSH含量;槐耳浸膏与5-Fu联用能显著增加SGC-7901/FU细胞凋亡率(P〈0.05)。[结论]槐耳浸膏能部分逆转SGC-7901/FU细胞的耐药性,其机制可能是通过抑制细胞的GSH合成、诱导细胞凋亡而实现的。 徐志远 程向东 杜义安 吕航 汤加宁 张袁骕 陈加辉关键词:化疗耐药 槐耳