国家自然科学基金(31200012)
- 作品数：9 被引量：46H指数：5
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- 相关领域：生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 珍稀食药用真菌朱红硫磺菌多糖的分离纯化及其免疫调节活性的研究被引量：5
- 2013年
- 真菌多糖是指10个以上单糖通过糖苷键连接形成直链或支链的一类糖,具有提高免疫,抗氧化,抗辐射,抗肿瘤等多种生理活性.朱红硫磺菌(Laetiporus sulphureus(Fr.)Murrill var.miniatus(Jungh.)Imaz.)是珍贵的药膳兼用菌.本研究从朱红硫磺菌子实体中,经过除杂、粉碎、热水浸提、醇沉处理后,得到了朱红硫磺菌杂聚糖粗提物,并运用DEAE-cellulose column进行柱层析分离纯化,得到朱红硫磺菌多糖纯品(LSF-A).通过硫酸苯酚法检测,水解,单糖分析,扫描电镜(SEM),红外光谱技术(IR)和核磁共振技术(NMR)对朱红硫磺菌多糖LSF-A进行了初步的结构分析.结果显示,朱红硫磺菌多糖由两种单糖构成,其结构中含有葡萄糖成分.在体外研究了不同浓度的朱红硫磺菌多糖对巨噬细胞吞噬作用的影响.结果显示朱红硫磺菌多糖具有显著的刺激巨噬细胞吞噬的作用,并且呈剂量依赖关系.这些结果说明朱红硫磺菌多糖(LSF-A)具有显著的免疫调节活性,可以作为一种理想的天然免疫调节剂资源.
- 丁祥
- 关键词：多糖分离纯化免疫调节
- 德钦乌头根部化学成分的研究被引量：7
- 2012年
- 从乌头属植物德钦乌头(Aconitum ouvrardianum Hand.-Mazz.)根部的乙酸乙酯提取物中共分得6个二萜生物碱类化合物,应用光谱(NMR,ESIMS)和对照TLC对所有的化合物的结构进行了鉴定,均为C-3位或C-6位含氧取代的C19-二萜生物碱,分别是:滇乌碱(yunaconi-tine)(1),8-去乙酰滇乌碱(8-deacetylyunaconitine)(2),印乌碱(indaconitine)(3),查斯曼宁(chasmanine)(4),14-苯甲酰查斯曼宁(14-benzoyl chasmanine)(5),伪乌头宁(pseudaco-nine)(6).C19-二萜生物碱为德钦乌头药材的主要药用化学成分及毒性成分,以上化合物均为首次从该植物中分离得到.
- 丁祥侯怡铃罗利
- 关键词：毛茛科
- 外加电场刺激对菲降解菌的影响
- 2014年
- 以菲为主要C源,吐温80作为增溶剂,研究细菌Enterobacter dissolvens在直流电和交流电条件下的生长和代谢过程。实验结果表明:当施加10 mA直流电时,通电8 h后,菌液中细胞的菲降解率较对照增长1.6倍,细胞生长亦有所加快;而施加交流电时,细菌生长和菲降解率均低于直流电刺激。
- 宋波侯怡铃丁祥
- 关键词：交流电直流电ENTEROBACTER生物修复
- 生物类似药(YD057)与杜拉鲁肽关键质量属性比对研究
- 2018年
- 目的通过基因重组表达的生物类似药GLP-1-Fc融合蛋白(YD057)与上市产品杜拉鲁肽进行关键质量属性比对研究,分析其有无显著差异。方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、分子排阻色谱法(SEC)、毛细管电泳法(CE-SDS)、毛细管等电聚焦(CIEF)分析其理化性质在相对分子质量、纯度、电荷异质性是否存在差异,通过肽图分析其在氨基酸一级序列是否一致,通过寡糖分布测定N糖修饰比例是否一致,在体外生物学活性测定以及GLP-1受体结合力分析来评价细胞学功能与分子结合力方面是否一致。结果生物类似药(YD057)与杜拉鲁肽在理化性质、氨基酸一级序列、N糖修饰比例、细胞生物学功能与受体结合力都无显著差异。结论两者关键质量属性(CQA)基本一致。
- 代亚东彭红卫苟凡铖侯怡铃丁祥
- 利用rDNA-ITS序列法对马尔康地区的7个红菇科菌株的亲缘关系和系统发育研究被引量：1
- 2016年
- 以在四川马尔康地区采取的7个红菇科菌株作为研究材料,通过现代分子生物学技术提取其总DNA,并对其ITS序列进行PCR扩增并测序,将测序结果运用BLAST工具在Gene Bank中选择与之同源性最相似的14个物种序列,将这7个序列与已知的14个序列运用DNAMAN和Clustalx1.83软件进行完全比对,用MEGA5.0软件采用N-J法构建系统进化树。结果表明,B1、B6为红菇属真菌,B3、B4、B5、B7为乳菇属真菌,且乳菇属中窝柄黄乳菇和亚白乳菇的序列差异较小,亲缘关系较近;而J2与它们的序列差异较大,亲缘关系较远。
- 朱洪庆张萌陈嘉慧丁祥
- 关键词：红菇亲缘关系系统发育
- 珍稀食药用真菌猴头菇寡聚糖的分离纯化及抗氧化活性的研究被引量：9
- 2013年
- 从猴头菇(Hericium erinaceus)子实体中,经过除杂、粉碎、热水浸提、醇沉处理后,得到了猴头菇杂聚糖粗提物,并运用DEAE-cellulose column进行柱层析分离纯化,得到猴头菇寡聚糖(HEO-A).通过水解,单糖分析,扫描电镜技术(SEM),高效凝胶渗透色谱(HPGPC),红外光谱技术(IR)和核磁共振技术(NMR)对猴头菇寡聚糖进行了初步的结构分析.结果显示,猴头菇寡聚糖由木糖和葡萄糖两种单糖构成,均重分子量为1877D.在体外化学模拟条件下,研究了不同浓度的猴头菇寡聚糖对羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)及ABTS自由基的清除作用.对DPPH·自由基的清除能力,其IC50值为12.5mg/mL;对·OH自由基的清除能力,当HEO-A浓度达到5mg/mL时,其清除率可达到最大(37.51%);对ABTS自由基的能力,其IC50值为0.93mg/mL,且当HEO-A的浓度为1.5mg/mL时,清除率即可达95.44%.这些结果说明猴头菇寡聚糖(HEO-A)具有显著的抗氧化功能,可以作为一种理想的天然抗氧化剂资源.
- 王芳丁祥宋波王婷李健曾益春许婷钟洁侯万儒侯怡铃
- 关键词：寡聚糖分离纯化抗氧化
- 电场刺激技术在微生物工程中的应用被引量：5
- 2012年
- 电场刺激是利用电解法将惰性电极插入电解液中,形成一种电解池系统,电解液对细胞培养物会产生不同影响,并导致生物过程发生改变。电场刺激对微生物会产生促进和杀灭两种不同作用,并在微生物工程中已有所应用,如促进微生物生长和代谢、强化废水处理、进行生物修复和用于杀菌消毒等。研究表明电场刺激在微生物工程和环境生物工程等方面有广泛的应用前景。
- 宋波
- 关键词：电场刺激杀菌生物修复
- rDNA-ITS序列分析法与传统分类法相结合在真菌鉴定中的应用被引量：18
- 2016年
- 采集了四川马尔康地区3种真菌,根据其形态学特征结合卯晓岚的《中国大型真菌》图谱,初步确定其疑似为黄菇、松乳菇、红菇3个种。为提高鉴定的准确性,通过构建基因池;用特异性引物进行PCR扩增,并对扩增产物进行测序;将测得的实验样品的序列在Gene Bank中进行BLAST比对;并与相似性较高的已知的种,利用DNAMAN、Clustalx1.83和MEGA5.0软件采用N-J法构建进化树,探寻他们与已知物种的相关关系。结果表明,三种疑似菌株扩增出的目的条带为500—750bp,J1、J2、J3号菌株分别与臭黄菇、松乳菇、红菇的序列相似度最高。并利用序列的相似性做出了它们各自的进化树。最终得出结论:J1号菌株为臭黄菇(Russula foetens),J2号菌株为松乳菇(Lactarius deliciosus),J3号菌株为红菇(Russula.)。利用r DNA-ITS序列分析法和形态学分类法相结合的方法鉴定菌种,不仅丰富了三种真菌的基因库,而且也克服了单纯的r DNA-ITS序列分析法因受基因库的完善程度、高度相似性序列的多少以及具体物种ITS区的可变程度等限制而不能鉴定出所有真菌的缺点,提高了真菌分类鉴定中一些模糊性状的区分度。
- 朱洪庆王盼盼张萌陈嘉慧丁祥
- 关键词：真菌RDNAITSPCR测序
- 大熊猫核糖体蛋白RPL5基因的克隆、表达与比较分析被引量：1
- 2013年
- 为了解大熊猫(Ailurophilic melanosome)核糖体蛋白亚基RPL5基因的结构特点及其与已报道的人和其他哺乳动物核糖体蛋白亚基RPL5基因的异同,运用RT-PCR技术,从大熊猫的肌肉组织总RNA中和DNA中分别对核糖体蛋白亚基RPL5基因的表达序列和其结构基因进行了克隆、测序;采用ORF finder软件对表达序列的开放阅读框(ORF)进行了查找和氨基酸序列的推定;采用Gen scan对结构基因进行了分析;采用DNAMAN Version 6对基因序列和氨基酸序列进行了同源性比较;采用ExPASy软件进行蛋白质功能位点和生化特性进行了预测分析;对大熊猫核糖体蛋白亚基RPL5基因进行了超表达实验.结果表明:大熊猫RPL5结构基因长为8 633bp,具有8个外显子和7个内含子;mRNA长为918bp,ORF为894bp,编码295个氨基酸,该蛋白的相对分子质量为34 402.6,等电点为9.73,含有1个依赖于AMP和GMP的蛋白激酶磷酸化位点,4个蛋白激酶C磷酸化位点,2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,1个酪氨酸激酶磷酸化位点,8个十四(烷)酰化位点.分析表明,大熊猫RPL5基因的表达序列及其编码的氨基酸序列与已报道的部分哺乳动物包括人(Homo sapiens)、牛(Bos Taurus)、猪(Sus scrofula)、小家鼠(Mus altocumulus)和褐家鼠(Rat-hauser nonstrategic)具有很高的相似性,大熊猫RPL5核苷酸序列与这些物种的相似性分别为94.52%、92.51%、91.95%、91.05%和89.15%,而氨基酸序列相似性分别为99.33%、98.65%、98.65%、98.32%和98.65%.超表达实验结果显示:大熊猫RPL5基因能在大肠杆菌BL21中有效表达,且在2h时达到表达高峰.运用分子生物学原理与相应的技术手段,成功地扩增出大熊猫RPL5基因的表达序列,并对其编码的蛋白进行了初步分析,丰富和完善了哺乳动物RPL5基因资料库,同时也为深入研究大熊猫RPL5基因的功能提供了相关基础数据.
- 王芳王芳丁祥侯怡铃王婷宋波王婷侯万儒
- 关键词：大熊猫RT-PCR克隆
