国家自然科学基金(81170183)
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- 大鼠平滑肌细胞和平滑肌祖细胞的体外培养及二者间表型转化的初步研究
- 2013年
- 目的探讨体外分离培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)和平滑肌祖细胞(SPC)的方法,并初步比较不同培养条件下大鼠SPC对VSMC表型转化的影响。方法原代培养细胞,通过蛋白印迹实验(Western Blot)检测平滑肌α-肌动蛋白(α-SMA)鉴定VSMC,SPC培养后经流式细胞术鉴定分选贴壁细胞CD14和CD105双阳性表达细胞继续培养为SPC,通过SPC与VSMC共培养以及利用Transwell装置条件培养、空白对照3种条件干预后,应用Western Blot法分别测定三组骨桥蛋白水平变化,以检测并初步比较不同条件下SPC对VSMC表型转化的影响。结果两种细胞分别原代培养后,Western Blot鉴定VSMC,结果显示α-SMA表达呈阳性;鉴定SPC免疫细胞化学染色α-SMA表达呈阳性,且流式细胞仪分析显示CD14和CD105呈双阳性表达。与空白对照相比,两种细胞共同培养和条件培养时VSMC表达骨桥蛋白水平明显升高,共同培养较条件培养骨桥蛋白水平升高效果更为明显。结论 SPC对VSMC的表型由收缩型向合成型转变具有一定作用,SPC通过直接作用与旁分泌作用不同程度地增强了VSMC的表型转化;对比发现,两细胞直接接触培养时VSMC表型转化的影响更为明显(P<0.05)。
- 谢晓晨李飞包楠迪左惠荣张荣庆郭文怡
- 关键词：血管平滑肌细胞平滑肌祖细胞细胞培养表型转化
