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Action of Schwann Cells Implanted in Cerebral Hemorrhage Lesion被引量：2: 2007年; Objective To investigate whether there is neogenesis of myelin sheath and neuron after transplantation of Schwann cells into cerebral hemorrhage lesion. Methods Schwann cells were expanded, labeled with BrdU in vitro and transplanted into rat cerebral hemorrhage with blood extracted from femoral artery and then injected into the basal nuclei. Double immunohistochemistry staining and electron microscopy were used to detect the expression of BrdU/MBP and BrdU/GAP-43 and remyelination. Results BrdU/MBP double positive cells could be seen at 1 week up to 16 weeks after transplantation of Schwann cells. Thin remyelination was observed under electron microscope. GAP-43 positive cells appeared after 12 weeks and were found more in Hippocamp. Conclusions Grafted Schwann cells participate in remyelination and promoter nerve restore in rat cerebral hemorrhage.; HONG WAN SHAO-DONG ZHANG JUN-HUA LI; 关键词：出血性脑损伤神经修复髓鞘形成

乙交酯-丙交酯共聚物-细胞复合体移植治疗脊髓损伤被引量：2: 2007年; 目的:观察神经干细胞、许旺细胞和组织工程支架材料乙交酯-丙交酯共聚物于大鼠髓内共移植后的生物相容性,及其对大鼠损伤脊髓形态和功能的修复作用。方法:实验于2005-05/2006-09在首都医科大学附属北京市神经外科研究所损伤修复实验室完成。①实验材料:健康成年雌性Wistar大鼠36只,随机数字表法分为单纯支架组、神经干细胞+支架复合体组、神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组,12只/组。乙交酯-丙交酯共聚物由中科院化学研究所医用高分子材料中心提供。②实验方法:各组大鼠均建立脊髓T9半横断损伤模型。神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组取2×1010L-1的许旺细胞、神经干细胞各10μL接种于乙交酯-丙交酯共聚物支架内,神经干细胞+支架复合体组取2×1010L-1的神经干细胞10μL接种于乙交酯-丙交酯共聚物支架内,单纯支架组取10μLDMEM培养液置于乙交酯-丙交酯共聚物支架内,于脊髓缺损处分别植入对应的复合物。③实验评估:应用电镜观察乙交酯-丙交酯共聚物支架的降解及轴突的再生状况;应用BBB评分和电生理技术检测大鼠脊髓功能性的恢复情况。结果:36只Wistar大鼠均进入结果分析。①行为学观察结果:移植术后4,12周,神经干细胞+支架复合体组、神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组大鼠的后肢运动功能BBB评分均好于单纯支架组(P<0.01),其中神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组尤为明显。②神经电生理检查结果:在脊髓半横断损伤后即刻,所有动物的体感诱发电位和运动诱发电位波幅都明显减低甚至消失。移植术后4周,神经干细胞+支架复合体组、神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组大鼠的体感诱发电位和运动诱发电位波幅均有所恢复;至移植术后12周恢复明显。单纯支架组移植术后4,12周体感诱发电位和运动诱发电位波幅无明显变化。③电镜观察结果:扫�; 陈刚万虹夏雷扬飞历俊华屈雪王身国王忠诚; 关键词：脊髓损伤神经干细胞许旺细胞生物相容性

乙交酯-丙交酯共聚物支架-细胞复合体移植对大鼠损伤脊髓的修复作用: 2008年; 目的观察神经干细胞、雪旺细胞和组织工程材料乙交酯-丙交酯共聚物共移植后对大鼠损伤脊髓形态和功能的修复作用。方法36只Wistar大鼠，随机数字法分为乙交酯-丙交酯共聚物移植组、神经干细胞／乙交酯-丙交酯共聚物组和神经干细胞＋雪旺细胞／乙交酯-丙交酯共聚物组。体外培养、鉴定胚胎脊髓源神经干细胞和雪旺细胞，制备和构建乙交酯-丙交酯共聚物支架细胞复合体并移植到大鼠脊髓T9半横断损伤部位，应用BBB行为评分和电生理技术在术后4、12周评价大鼠脊髓功能的恢复情况；应用透射电镜、HE染色和免疫组织化学染色方法在形态结构上观察轴突和髓鞘再生情况，以及神经干细胞在脊髓内的存活、迁移和分化情况。结果术后4、12周，细胞移植组的BBB评分较对照组明显提高（P〈0.05）；细胞移植组的体感诱发电位和运动诱发电位波幅较对照组都有所好转。术后12周移植材料正中横断面透射电镜可见新生的无髓及有髓神经纤维；脊髓标本免疫组织化学染色显示移植的神经干细胞可以在宿主脊髓内存活、迁移并分化成神经元和少枝胶质细胞，未分化成星形胶质细胞。结论神经干细胞、雪旺细胞和组织工程材料乙交酯-丙交酯共聚物共移植可以促进半横断损伤的大鼠脊髓轴突再生，改善肢体的运动功能。; 陈刚万虹夏雷杨飞历俊华屈雪王身国王忠诚; 关键词：脊髓损伤神经干细胞雪旺细胞

种植神经干细胞-许旺细胞的共聚物支架移植修复大鼠损伤脊髓被引量：4: 2012年; 背景:前期实验显示,在体外乙交酯-丙交酯共聚物支架与神经干细胞和许旺细胞有良好的相容性。目的:观察与许旺细胞共移植,神经干细胞是否能在乙交酯-丙交酯共聚物取向支架内存活、分化,乙交酯-丙交酯共聚物组织工程复合物是否能促进轴突再生及其髓鞘化。方法:制作成年Wistar大鼠T8段半横断脊髓损伤模型,随机分为3组:支架组植入乙交酯-丙交酯共聚物支架,神经干细胞组植入接种神经干细胞(标记绿色荧光蛋白)的乙交酯-丙交酯共聚物取向支架,联合组植入接种神经干细胞(标记绿色荧光蛋白)和许旺细胞的乙交酯-丙交酯共聚物取向支架。结果与结论:移植的神经干细胞可在大鼠脊髓内存活,并迁移至邻近脊髓,联合组标记绿色荧光蛋白阳性细胞存活率显著高于神经干细胞组(P<0.001)。联合组胶质纤维酸性蛋白/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞多于神经元特异性烯醇化酶/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞,神经干细胞组未发现神经元特异性烯醇化酶/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞。联合组有少部分绿色荧光蛋白阳性细胞表达突触素,再生轴突和有髓轴突数量高于其他两组,但差异无显著性意义(P=0.058)。表明与许旺细胞共移植,可促进神经干细胞向神经元样细胞分化,少部分神经元样细胞还可能形成了突触连接;种植了神经干细胞和许旺细胞的乙交酯-丙交酯共聚物支架可促进轴突再生及其髓鞘化。; 夏雷郝淑煜李德志陈刚高川川历俊华万虹; 关键词：脊髓损伤细胞移植神经干细胞许旺细胞

转染绿色荧光蛋白的神经干细胞移植于半横断脊髓损伤处的体内外分化研究被引量：3: 2010年; 目的观察转染绿色荧光蛋白（GFP）的大鼠脊髓神经干细胞移植于半横断脊髓损伤处的体内外分化情况.方法将表达GFP的慢病毒载体转染胎鼠脊髓神经干细胞,体外用10%胎牛血清诱导分化.转染后的神经干细胞与PLGA支架移植于大鼠半横断脊髓损伤处,术后1个月和3个月取材,行GFAP、NF和CNP免疫荧光染色.结果转染GFP的神经干细胞球表达强烈的绿色荧光,体外分化可见GFAP/GFP、NF/GFP和CNP/GFP双阳性细胞,GFAP/GFP双阳性细胞明显多于其他两种.移植后3个月,GFP阳性细胞在脊髓内明显减少,可见少数GFAP/GFP和CNP/GFP舣阳性细胞,未见NF/GFP双阳性细胞.结论转染GFP的神经干细胞可在体外增殖和分化,但大部分分化成胶质细胞.移植于急性期脊髓损伤处的神经干细胞不被诱导分化成神经元样细胞,可被诱导分化成神经胶质细胞.; 郝淑煜夏雷李德志历俊华杨飞王身国万虹; 关键词：绿色荧光蛋白神经干细胞分化

神经干细胞-施万细胞-聚乳酸-羟基乙酸共聚物支架移植对脊髓损伤大鼠的影响被引量：3: 2012年; 目的探讨种植神经干细胞(NSCs)与施万细胞(SCs)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)支架移植促进脊髓损伤大鼠神经功能恢复的作用及机制。方法体外培养NSCs和SCs,以PLGA为支架移植入大鼠T8半横断脊髓损伤处。实验动物随机分为PLGA组、PLGA+NSCs组和PLGA+NSCs+SCs组。术前和术后进行皮层运动诱发电位(CMEPs)检查及BBB评分;然后在同侧或对侧进行T6再次半横断,并进行CMEPs检测及BBB评分。结果 CMEPs的恢复率及波幅在PLGA+NSCs+SCs组最高。移植后,大鼠BBB评分逐渐改善;在移植后第2周及以后,PLGA+NSCs组和PLGA+NSCs+SCs组的BBB评分显著高于PLGA组(P<0.001)。同侧再次半横断后,CMEPs消失,BBB评分快速恢复;对侧再次半横断后,大鼠双下肢完全瘫痪。结论种植NSCs和SCs的PLGA支架移植有利于脊髓损伤功能重建,再生轴突可能形成了功能性连接;但是同侧再生轴突对脊髓功能的恢复作用有限。; 夏雷郝淑煜李德志陈刚高川川历俊华万虹; 关键词：脊髓损伤神经干细胞施万细胞聚乳酸-羟基乙酸共聚物

Schwann细胞移植在脊髓损伤治疗中的应用进展被引量：3: 2006年; Schwann细胞具有很强的神经保护和髓鞘化的能力,是脊髓损伤治疗研究中运用最早和最多的细胞之一。目前Schwann细胞常常作为联合治疗的平台,将各种干预手段整合起来。本文主要讨论Schwann细胞在联合治疗脊髓损伤中所遇到的问题,各种有关Schwann细胞的联合治疗的效果,Schwann细胞共移植对神经干细胞的积极影响,Schwann细胞移植后的存活、迁移情况以及内源性Schwann细胞在脊髓损伤修复中的作用。; 夏雷万虹王忠诚; 关键词：脊髓损伤神经再生 SCHWANN细胞

Co-transplantation of neural stem cells and Schwann cells within poly （L-lactic-co-glycolic acid） scaffolds facilitates axonal regeneration in hemisected rat spinal cord被引量：15: 2013年; XIA LeiWAN HongHAO Shu-yuLI De-zhiCHEN GangGAO Chuan-chuanLI Jun-huaYANG FeiWANG Shen-guoLIU Song; 关键词：SCHWANN细胞轴突再生成年大鼠 L-乳酸

聚乳酸-乙醇酸支架移植对脊髓半横断损伤大鼠后肢运动能力和运动诱发电位的影响被引量：4: 2010年; 目的观察聚乳酸—乙醇酸(Poly Lactic—co—glycolicacid,PLGA)支架对脊髓半横断损伤大鼠后肢运动功能的影响。方法雌性成年Wistar大鼠随机分为正常组(n=15)、假手术组(n=15)、脊髓半横断(hemisectedspinal cord injury,hSCI)组(n=15)和脊髓半横断移植PLGA(PLGA)组(n=15),术后进行行为学评分:BBB评分(Basso Beattie Bresnahan locomotor rating scale)和斜板(inclined plane,IP)试验,并观察皮层运动诱发电位(motor evoked ptentials,MEPs)的改变。结果第4周时PLGA组BBB评分高于hSCI组(7.9±1.2 vs 7.1±1.5,P=0.042);在第4、8周时PLGA组IP评分高于hSCI组(56.0±2.0 vs 54.7±2.3,P=0.030;64.7±2.4 vs 62.3±2.3,P=0.038);在第12周时PLGA组MEPs波幅高于hSCI组(29.9±11.0μV vs 21.4±10.4μV,P=0.039)。结论 PLGA支架移植能促进脊髓半横断损伤大鼠后肢运动功能和电生理功能的恢复。; 张绍东郝淑煜历俊华万虹; 关键词：脊髓损伤

乙交酯-丙交酯共聚物与神经生长因子复合支架的细胞相容性及缓释作用被引量：2: 2007年; 目的:体外实验观察生物可降解材料乙交酯-丙交酯共聚物与神经生长因子复合支架的细胞相容性及其缓释作用。方法:实验于2005-05/09在首都医科大学附属北京市神经外科研究所损伤修复实验室完成。①实验方法:乙交酯-丙交酯共聚物采用专利技术(200510011350.9)制备,体外将许旺细胞和神经干细胞与乙交酯-丙交酯共聚物共培养。②实验评估:扫描电镜下观察许旺细胞和神经干细胞在乙交酯-丙交酯共聚物内生长状况;应用组织工程技术将神经生长因子整合入乙交酯-丙交酯共聚物内,0.02g乙交酯-丙交酯共聚物(干质量)中含有1μg神经生长因子,ELISA法检测每天神经生长因子释放的质量浓度。结果:①扫描电镜下乙交酯-丙交酯共聚物横断面可见其为网格状,纵断面可见其直孔道。②许旺细胞和神经干细胞在乙交酯-丙交酯共聚物支架上生长良好,与其紧密贴附。③培养后第4天神经生长因子释放的质量浓度达峰值,第7天趋于平稳,稳定释放的质量浓度为100μg/L。结论:①乙交酯-丙交酯共聚物与许旺细胞和神经干细胞具有良好的生物相容性及细胞亲和性。②按神经生长因子(1μg)与乙交酯-丙交酯共聚物(干质量0.02g)的比例合成的神经生长因子-乙交酯-丙交酯共聚物组织工程材料可缓慢稳定释放神经生长因子,达到其可以发挥生物学活性的质量浓度100μg/L。; 李继业万虹杨飞历俊华李德志王亚杰王身国; 关键词：许旺细胞神经干细胞神经生长因子

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国家自然科学基金(30540450581)

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