贵州省科学技术基金([2009]2173)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：乔宝民马毅郭战军李三华孙光更多>>
- 相关机构：天津市泌尿外科研究所遵义医学院天津市奶牛发展中心更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 利用精子介导法建立hHT/hDAF双基因转移小鼠模型被引量：1
- 2010年
- 为探讨超急排斥反应(Hyperacute rejection,HAR)及延迟性异种排斥反应(Delayed xenograft rejection,DXR)的分子调控机制,采用优化的精子介导法(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)对建立hHT/hDAF双基因转移小鼠模型进行了研究。结果表明,应用树枝状聚合物(Dendrimers)优化SMGT后,2细胞胚GFP+RFP的阳性率达到4.51%,同对照组相比差异极显著(P<0.01)。选取标记基因GFP+RFP双阳性的胚胎进行移植后获得36只仔鼠,PCR及Southern Blot检测结果表明,17只小鼠PCR结果呈hHT+hDAF双阳性,其中5只小鼠Southern Blot结果呈hHT+hDAF双阳性。上述结果表明,成功建立了Hht/hDAF双基因转移小鼠模型。
- 郭战军马毅李三华韩瑞发李胜芝孙光乔宝民马腾骧陈永福
- 关键词：精子介导法HHT转基因小鼠
- hHT/GFP融合基因表达载体的构建及在小鼠成纤维细胞中的表达
- 2010年
- 为探讨超急排斥反应(hyperacute rejection,HAR)及延迟性异种排斥反应(delayed xenograft rejec-tion,DXR)分子调控机制,进行-α1,2岩藻糖苷转移酶基因(hHT)与绿色荧光蛋白基因(green fluorescent protein,GFP)融合表达载体pEGFP-C1-hHT的构建及在小鼠成纤维细胞表达的研究。采用脂质体法转染小鼠成纤维细胞48 h后观察到GFP阳性细胞。同时对GFP阳性小鼠成纤维细胞进行PCR及Western blot,检测hHT基因的整合及表达情况。PCR结果表明hHT基因整合入小鼠基因组,Western blot检测到hHT基因的表达。研究结果表明,成功克隆hHT基因并构建了融合表达载体pEGFP-C1-hHT,可应用于进一步转基因研究。
- 郭战军马毅张钥李三华王广友杨慧祥孙光乔宝民
- 关键词：GFP基因小鼠成纤维细胞
