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常州市社会发展科技计划项目(CS2008215)
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小干扰RNA抑制大鼠不成熟树突状细胞MyD88基因的表达
2011年
目的观察小干扰RNA(siRNA)对大鼠骨髓来源不成熟树突状细胞(iDC)MyD88基因表达的抑制作用。方法采用粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子体外培养大鼠骨髓来源iDC;设计并合成针对MyD88基因的siRNA,阳离子脂质体作为转染介质;siRNA转染iDC48h后,分别检测iDC活力、转染效率、表面分子表达、吞噬能力、MyD88基因mRNA转录水平及蛋白表达。结果培养6d后收集iDC。采用适当浓度siRNA(1ug/500ul)和阳离子脂质体(3ug/500ul)转染48h,转染iDC活力平均(98.50±1.04)%,转染效率平均(85.60±3.50)%,转染iDC表面分子与未转染iDC比较无显著差异,转染前后iDC吞噬能力无湿著变化,MyD88基因mRNA转录水平和蛋白表达分别为内参的0.098±0.012和0.087±0.015。结论化学合成MyD88-siRNA是诱导iDCMyD88基因沉默的一种有效、可行的方法。
朱春富
王仕忠
杨晓俊
徐皓
吴文溪
关键词:
树突状细胞
MYD88
RNA干扰
TOLL样受体
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