河南省科技发展计划项目(112102310210)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：毕凌云杨达胜胡丹更多>>
- 相关机构：新乡市中心医院新乡医学院第一附属医院新乡医学院更多>>
- 发文基金：新乡医学院省级重点学科开放课题河南省科技发展计划项目河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂肪源间充质干细胞对小鼠急性肾损伤后干细胞因子及其受体表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的研究脂肪源间充质干细胞(ADMSCs)对急性肾损伤(AKI)的治疗作用,并探讨ADMSCs治疗小鼠AKI可能的机制。方法 30只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组和治疗组,每组10只。应用腹腔注射顺铂建立AKI模型,治疗组于注射顺铂12 h后尾静脉注射ADMSCs悬液,模型组于注射顺铂12 h后尾静脉注射等量生理盐水。注射顺铂7 d后处死小鼠,通过测定血清尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)水平及观察小鼠肾组织形态学改变判断肾损伤情况;免疫组织化学法检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、干细胞因子受体(c-KIT)及干细胞因子(SCF)表达情况。结果与模型组比较,治疗组BUN、Scr和NGAL水平显著下降(P<0.01),肾小管坏死(ATN)评分显著降低(P<0.01),c-KIT、SCF表达显著增加(P<0.01);与正常对照组比较,模型组c-KIT、SCF表达亦显著增加(P<0.01)。结论在AKI小鼠模型中,外源性ADMSCs可能通过旁分泌SCF、c-KIT,并激活SCF/c-KIT信号通路来促进肾小管细胞的修复,继而达到保护受损肾脏的作用。
- 周龙豪谢遂亮毕凌云杨达胜
- 关键词：脂肪源间充质干细胞中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白干细胞因子干细胞因子受体
- 小鼠脂肪源间充质干细胞的培养鉴定及增强绿色荧光蛋白-慢病毒载体转染被引量：3
- 2013年
- 目的探索脂肪源间充质干细胞（ADMSCs）的分离培养方法、生长特性及筛选出慢病毒载体感染间充质干细胞的最佳感染指数（MOI），并鉴定其感染后的增殖能力，为ADMSCs移植治疗急性肾小管损伤提供实验依据。方法取4周龄昆明小鼠腹股沟脂肪组织，差速贴壁法培养分离昆明小鼠脂肪源间充质干细胞。经细胞培养液洗涤、离心后接种于细胞培养瓶，放置体积分数5％CO2孵箱中培养，24h后换液，以后每3d更换培养基，待细胞融合达到约90％时，传代培养。取第3代ADMSCs用流式细胞术（FCM）检测其表型、茜素红染色及油红O染色鉴定其多向分化潜能；用携带增强绿色荧光蛋白（EGFP）的慢病毒载体（LV）感染ADMSCs，FCM检测病毒感染效率，四甲基偶氮唑蓝（MTY）比色法检测感染后的细胞活力。结果（1）差速贴壁法培养分离7-11d时细胞融合达80％以上。原代细胞融合达80％～90％进行1：4传代，细胞贴壁和生长速度快于原代细胞培养。第3代及再传代细胞形体趋于一致，细胞呈梭形。细胞连续传代10次，生长速度未见明显减缓；（2）FCM检测第3代细胞CD29阳性表达98．93％，CD34阳性表达0．17％；（3）第3代细胞成脂诱导14d油红O染色阳性，成骨诱导14d茜红染色阳性；（4）当MOI=25感染第3代细胞72h后，共聚焦荧光显微镜观察细胞EGFP阳性表达60％～70％，细胞活力不受影响；（5）MrIT法显示重组慢病毒转染细胞与未转染慢病毒细胞比较，细胞增殖能力无差异。结论从昆明小鼠腹股沟脂肪组织中分离的ADMSCs可在体外稳定传代；差速贴壁法可以简便、高效地提取ADMSCs；携带EGFP的LV可有效感染ADMSCs，并且感染后其增殖能力不受影响。
- 谢遂亮杨达胜毕凌云胡丹
- 关键词：脂肪源间充质干细胞原代细胞培养生物学特性慢病毒转染小鼠
