广东省自然科学基金(2004B34001007)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：安靓孙冰刘军陈金拳孙晓艳更多>>
- 相关机构：南方医科大学中国人民解放军总医院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 胎鼠肝nestin阳性细胞的分离培养和诱导分化研究被引量：2
- 2006年
- 目的建立胎鼠肝nestin阳性细胞的体外分离、培养和诱导分化的方法。方法采用机械分离法结合悬滴培养法获得胎肝干细胞,原代培养2d后改变培养基,添加含20%胎牛血清的DMEM(含25ml/L葡萄糖,100U/ml青链霉素,pH值7.6),添加烟酰胺10mmol/L,胰岛素1mg/L,N2添加剂,碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、干细胞因子、白血病抑制因子各20μg/L诱导分化为nestin阳性细胞。结果和结论大鼠胎肝内存在nestin阳性细胞,在体外扩增后加入诱导剂可定向分化为胰岛β细胞。
- 刘军安靓陈金拳
- 关键词：巢蛋白阳性细胞肝干细胞细胞培养技术
- 构建EGFP-PDX-1融合表达载体电穿孔转染大鼠胎肝干细胞的研究
- 2006年
- 目的构建PDX-1绿色荧光蛋白融合表达载体,电穿孔转染入大鼠胎肝干细胞以得到稳定表达。方法从SK900/BLSCRIPT质粒中扩增PDX-1,将其插入pEGFP-C1的多克隆位点中,构建重组质粒pEGFP-C1-PDX-1;分离培养大鼠胎肝干细胞,经鉴定后用电穿孔法转染;分析转染前后细胞生长曲线,荧光显微镜下观察、RT-PCR鉴定转染结果。结果重组质粒经酶切鉴定正确无误,经电穿孔转染后GFP和PDX-1基因均能在胎肝干细胞中保持较长时间稳定表达,并对胎肝干细胞的生长增殖影响较小。结论成功构建了PDX-1绿色荧光蛋白融合表达载体,能在胎肝干细胞中较稳定表达,为研究PDX-1在干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞中的调控作用提供了物质基础。
- 孙冰孙晓艳安靓
- 关键词：肝干细胞电穿孔
- 肝卵圆细胞的研究进展被引量：1
- 2005年
- 肝卵圆细胞(hepaticovalcells,HOC)是存在于肝脏中的一类肝干细胞,目前已证实了它在人及 多种动物中存在。HOC来源并定位于肝内的胆管系统中,具有多向分化潜能,正常时处于静止状态,只有当 肝脏发生严重损伤且肝细胞再生障碍时才受到激活并大量增殖,可分化为肝细胞和胆管细胞,以修复重建肝 脏组织、恢复生化功能。本文就HOC的来源、定位、生物学特性、研究方法及应用方面的进展情况作一综述。
- 孙冰安靓
- 关键词：肝卵圆细胞肝脏肝细胞再生肝内胆管细胞
- 胎肝干细胞的分离、培养与鉴定被引量：6
- 2006年
- 目的体外扩增培养大鼠胎肝干细胞,研究其形态、生物学特性及表面标志物,探讨胎肝干细胞的性质。方法分离培养胎龄12-16d的胎肝细胞,SABC法检测原代、传代后及细胞克隆中的肝干细胞特异表面标志物OV-6、CK-19及nestin的表达。结果原代、传代培养的胎肝细胞部分表达OV-6、CK-19及nestin;培养3d开始出现小细胞团,1个月即形成肉眼可见的细胞集落,5-7d传代一次;细胞克隆几乎全部为干细胞标志阳性细胞。结论胎肝干细胞可通过克隆筛选法进行体外扩增,胎肝内存在nestin阳性干细胞,可能是一种更为原始的干细胞,在胚胎发育中起重要作用。
- 孙冰安靓
- 关键词：胎肝干细胞细胞培养巢蛋白
