浙江省自然科学基金(LY13C200009)
- 作品数：2 被引量：17H指数：2
- 相关作者：张明洲吴莹莹马骉方结红龚云飞更多>>
- 相关机构：中国计量学院杭州迪恩科技有限公司更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金浙江省自然科学基金浙江省重点科技创新团队项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程更多>>
- 副溶血性弧菌PMA-LAMP方法的建立被引量：9
- 2016年
- 副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)是一种常见的食源性致病菌,在海鲜等食物中检出率很高,食用没有煮熟的带菌食物或者腌制品,极易引起食物中毒。目前用以检测副溶血性弧菌的快速检测方法都不能区别死活菌,容易出现假阳性结果。本研究基于DNA结合染料叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA),利用荧光染料钙黄绿素(Calcein)的特性,建立了一种实时的可视化环介导等温扩增方法(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),并与q PCR方法进行比较。实时可视化LAMP方法的反应结果,既可以肉眼直接观测,也可以借助荧光分析设备实时监测,并对半定量分析进行初探,为之后向定量分析深入研究打下基础。实验结果表明,实时可视化PMA-LAMP方法的灵敏度可达5.0×102 CFU/m L,模拟食样灵敏度为1.9×102 CFU/m L,与PMA-q PCR方法结果一致。除去前增菌时间,整个检测过程只需2 h,且准确率高,为副溶血性弧菌快速检测的开展提供了有效的技术支持。
- 马骉吴莹莹戴明雁方结红张明洲
- 关键词：副溶血性弧菌实时荧光定量PCR
- 链霉素残留检测直接竞争ELISA法的建立被引量：8
- 2013年
- 目的：在多克隆抗体的基础上研制1种用于检测牛奶、蜂蜜中链霉素残留量的直接竞争酶联免疫吸附测定法（ELISA）。方法：以兔抗链霉素多抗为包被原,以链霉素-辣根过氧化物连接物为标记物,TMB为显色底物,建立了1种链霉素残留量检测的竞争性直接酶联免疫快速检测方法,并与高效液相色谱（HPLC）分析方法比较和验证。结果：用该检测方法分别检测牛奶、蜂蜜中的链霉素残留情况。结果表明,在0.5~40.5 ng/mL的浓度范围内标准曲线方程为y=-0.4341x＋1.1786（r=0.9708）,半抑制率IC50为3.60 ng/mL,最低检测限IC10为0.43 ng/mL,平均批内与批间变异系数分别为5.78%与8.11%。在牛奶、蜂蜜样品中的检测限分别为2.7 ng/mL、2.8 ng/mL。在添加10.0~400.0 ng/mL范围内,平均回收率在97%~107%。除双氢链霉素外,与其他抗生素药物均无交叉反应。牛奶、蜂蜜样品采用ELISA和HPLC 2种检测方法的相关系数分别为0.99和0.97,说明本研究建立的ELISA方法与HPLC方法具有很好的相符性。结论：直接竞争ELISA法可以满足牛奶、蜂蜜中链霉素残留的检测要求。
- 奚茜张明洲李沐洁龚云飞王旻子陈宗伦王唯芬
- 关键词：链霉素
