广东省科技计划工业攻关项目(2007B080701008)
- 作品数：7 被引量：27H指数：4
- 相关作者：周玉萍程惠贞陈琼华田长恩柯德森更多>>
- 相关机构：广州大学更多>>
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- 相关领域：生物学环境科学与工程轻工技术与工程化学工程更多>>
- 拟南芥突变体lac8-2和lac8-3的鉴定被引量：1
- 2009年
- 本课题组已通过基因工程方法证实,拟南芥At5g01040的编码蛋白Lac8具有漆酶活性.本研究通过PCR扩增技术,成功筛选出Lac8基因的T-DNA插入突变体lac8-2和lac8-3的纯合子.RT-PCR分析表明,突变体中没有Lac8基因的表达.因此,lac8-2和lac8-3均可作为Lac8基因的功能缺失突变体,这为进一步研究Lac8基因在拟南芥生长发育中的功能奠定了材料基础.
- 周玉萍陈琼华林丽丽雷德柱雷德柱姚焱刘顺枝程惠贞柯德森
- 关键词：拟南芥基因表达
- 韦伯灵芝漆酶的分离纯化及其性质被引量：8
- 2010年
- 采用硫酸铵分级盐析、透析、聚乙二醇浓缩和高效液相色谱柱层析从韦伯灵芝TZC-1发酵液中分离纯化得到电泳纯漆酶,其纯化倍数为37.1倍,酶活性回收率为21.3%。活性-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)结果表明该漆酶由一种同工酶组成,纯化漆酶经SDS-PAGE检测显示为单一条带,其分子质量约为40kD。该漆酶催化底物ABTS的最适反应温度为50～60℃,最适反应pH值为4.6,在60℃以下和pH3.0～5.0范围内保持稳定,以ABTS为底物的表观Km值为13.8μmol/L。Fe2+完全抑制酶活,Al3+和Mn2+对该漆酶也有明显抑制作用,Hg+、Cu2+和Mg2+对该酶有明显激活作用,而Zn2+、Ba2+及K+对该酶活性影响不大。
- 陈琼华周玉萍陈晓柯德森程惠贞田长恩
- 关键词：漆酶纯化酶活
- 灵芝漆酶催化阳离子红2GL脱色的研究被引量：10
- 2010年
- 真菌漆酶在纺织物染料脱色及其废水净化等领域有着巨大的应用潜力。阳离子红2GL是使用广泛又难以处理的一种染料,现有的方法治理效果差。本研究优化了灵芝漆酶催化阳离子红2GL脱色的主要工艺参数:最适pH、温度、ABTS用量、漆酶用量和染料浓度分别为4.5、20℃、0.083mmol/L、10U/mL和50mg/L。在所得的最优条件下反应30min,阳离子红2GL的脱色率可达90.3%;反应24h,脱色率达100.0%。
- 乔治杰马斌陈琼华周玉萍程惠贞田长恩
- 关键词：纺织染料脱色
- 韦伯灵芝发酵产漆酶及其对靛蓝脱色作用的研究被引量：4
- 2010年
- 从广州花都芙蓉彰分离纯化得到1株产漆酶的野生灵芝菌株,形态学与分子鉴定表明该菌株为韦伯灵芝。对该菌株液态发酵产漆酶的营养条件进行了优化,并就粗酶液对靛蓝染料的脱色能力进行了探讨。结果表明,发酵产漆酶的最佳碳源为35.0g/L麸皮和10.0g/L葡萄糖;最佳氮源为2.5g/L酵母膏;添加0.5mmol/L的Cu2+对漆酶的合成有一定促进作用,在优化条件下培养6d,漆酶活力高达10943.8U/L,是优化前的68.3倍。采用漆酶粗酶液可直接对靛蓝染料(100mg/L)进行有效脱色,在pH3.0、50℃条件下反应120min,脱色率可达92.6%。
- 陈琼华周玉萍江桂杰李广宇程惠贞田长恩
- 关键词：漆酶液体发酵靛蓝脱色
- 一个推测的拟南芥漆酶基因在巴斯德毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2009年
- At5g01040基因是一个推测的拟南芥漆酶基因。根据其编码序列设计引物,利用RT-PCR方法扩增出1755bp的片段。测序结果表明,该片段存在3个突变位点,其中一个突变位点改变了所编码的氨基酸。将该片段克隆到表达载体pPICZaB上,电击转化毕赤酵母。经筛选获得80个候选重组菌株,其中18个菌株的培养液中存在漆酶活性,说明所克隆的基因在毕赤酵母中实现了分泌表达,证实了At5g01040编码的蛋白具有漆酶活性。
- 周玉萍陈琼华陈佩程惠贞田长恩
- 关键词：漆酶拟南芥巴斯德毕赤酵母
- 灵芝漆酶催化直接耐晒翠蓝GL脱色条件的优化被引量：8
- 2009年
- 采用灵芝菌株发酵所得的漆酶,对酞菁类染料直接耐晒翠蓝GL进行了催化脱色实验,确定了脱色反应的最适条件。结果表明:单独使用灵芝漆酶粗酶液对直接耐晒翠蓝GL具有很好的脱色效果。其最适脱色pH为3.0,最适脱色温度为40°C,最适漆酶用量是40U/mL,最适染料浓度为60mg/L。以上述最适脱色条件对直接耐晒翠蓝GL进行脱色实验,反应70min,脱色率可达94.3%。研究结果显示,所试灵芝漆酶在印染废水治理方面具有良好的应用前景。
- 陈琼华周玉萍杨桃芳程惠贞田长恩
- 真菌漆酶高产菌株的筛选被引量：10
- 2009年
- 利用在PDA培养基中添加愈创木酚和α-萘酚的平板法,对43株大型真菌进行产漆酶初筛,根据平板菌落周围产生的褐色和紫色氧化圈的显著程度初步筛选得到明显分泌漆酶的21个菌株.进一步将这21个菌株分别进行摇瓶发酵,用ABTS法检测发酵液中漆酶的活力,复筛出3个漆酶产量较高的菌株,分别为香菇L03、灵芝T1和糙皮侧耳5.33,其酶活分别为382.3、324.9和297.1 U.L-1.
- 陈琼华周玉萍毕凡星程惠贞田长恩
- 关键词：漆酶菌种筛选愈创木酚Α-萘酚
