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U0126对缺血性脑损伤大鼠脑内水通道蛋白-4表达的影响被引量：5: 2006年; 目的研究水通道蛋白-4(aquaporin4,AQP4)在缺血性脑损伤大鼠脑内的表达,及丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号转导通路抑制剂U0126对其表达的影响。方法用线栓法建立缺血性脑损伤大鼠模型,测定脑组织含水量及伊文斯蓝含量,并采用免疫组织化学、Westernblot和逆转录-聚合酶链反应技术,检测AQP4的表达。测定预先经侧脑室给予U0126后MAPKs信号通路关键蛋白ERK1/2和ELK1磷酸化水平,同时观察U0126对脑水肿和AQP4表达的影响。结果正常组AQP4表达较低[蛋白(吸光度值,下同):123·1±1·0,mRNA(吸光度比值,下同):0·173±0·017],在缺血损伤后表达升高(蛋白:153·6±0·8,mRNA:0·400±0·015),脑组织含水量及伊文斯蓝含量增加,给予U0126后AQP4的表达和脑组织含水量降低(蛋白:149·0±1·1,mRNA:0·328±0·010,P<0·01),同时ERK1/2和ELK1磷酸化水平降低。结论缺血性损伤后AQP4表达上升,脑水肿明显,预先给予U0126可抑制AQP4的表达,减轻脑水肿。; 呙登俊陈英辉赵永波王乃东; 关键词：脑缺血脑水肿水孔蛋白类

重组大鼠质粒pEGFP-GDNF的构建及大鼠胚胎神经干细胞转染的研究: 2005年; 目的探讨携带GDNF基因的神经干细胞表达载体的构建方法。方法采用RT-PCR方法从大鼠胎脑组织总RNA中扩增出该基因的全序列cDNA,并克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-C1中,经酶切鉴定及测序分析对重组质粒pEGFP-GDNF作进一步鉴定。采用阳离子脂质体将重组质粒pEGFP-GDNF转染至鼠胚胎神经干细胞。结果大鼠GD-NF cDNA已正确地克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,而构建成重组大鼠质粒pEGFP-GDNF。GDNF基因在细胞中可稳定表达。结论神经干细胞可直接作为基因靶细胞,能被GDNF真核细胞表达载体pEGFP-GDNF有效的感染。; 赵永波王晓梅刘文文; 关键词：质粒转染 GDNF

胚胎大鼠脑纹状体和中脑神经干细胞的培养被引量：1: 2005年; 目的研究大鼠脑不同部位胚胎神经干细胞的增殖分化特性。方法采用无血清培养基分离和培养大鼠脑的纹状体和中脑的神经干细胞,通过巢蛋白(nestin)表达和5-溴脱氧尿嘧啶(5-bromo-2'-deoxyuridine BrdU)染色,鉴定细胞的增殖能力;通过新生神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性免疫细胞化学染色,鉴定培养细胞的多潜能性。通过酪氨酸羟化酶的染色(tyrosine hydroxylase,TH)鉴定多巴胺神经元。结果二者在体外培养都可增殖成球,并能分化成神经系统3个谱系的细胞。纹状体增殖传代3个月,中脑培养细胞增殖维持3周。中脑干细胞分化TH阳性细胞比例高于纹状体。结论培养的胎鼠脑细胞是神经干细胞。纹状体干细胞增殖能力高于中脑干细胞,中脑干细胞更倾向于分化成TH阳性细胞。; 赵永波王晓梅刘文文; 关键词：胚胎大鼠纹状体中脑神经干细胞

MAPKs阻断剂U0126对体外培养神经细胞缺氧损伤后细胞损伤和水通道蛋白4表达影响的研究: 2006年; 目的:研究丝裂原活化蛋白激酶信号通路抑制剂U0126对体外神经细胞缺氧损伤后细胞生长状态及水通道蛋白4(AQP4)表达的影响。方法:取出生1d的SD大鼠皮质神经细胞进行缺氧培养致细胞损伤,分为处理组和缺氧组,前者给予U0126,后者给予二甲基亚砜作为对照,检测AQP4的表达情况及细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)和Ets样因子(ELK1)蛋白磷酸化水平的变化。结果:缺氧损伤后细胞状态不佳,AQP4表达升高。给予U0126后ERK1/2和ELK1磷酸化水平降低,细胞状态有所改善,同时AQP4的表达降低。结论:缺氧损伤后细胞肿胀与AQP4的表达增高有关,U0126可抑制AQP4的表达,减轻细胞损伤。; 呙登俊赵永波陈英辉王乃东刘文文; 关键词：水通道蛋白4 丝裂原活化蛋白激酶

水通道蛋白4在脑出血患者脑内皮层的表达被引量：2: 2006年; 目的观察水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)在脑出血继发脑水肿患者脑内皮层的表达。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),免疫组织化学和Western-blot技术,分析比较10例脑出血患者脑组织与6例正常脑组织标本AQP4的mRNA和蛋白的表达情况。结果AQP4主要表达在皮层上的星形胶质细胞。脑出血继发脑水肿患者脑组织AQP4的mRNA和蛋白的表达均显著高于正常对照组(P<0.01)。结论AQP4参与了脑出血继发脑水肿的发生,可能是脑水肿产生的重要分子基础。; 陈英辉赵永波呙登俊马爱梅王乃东; 关键词：脑出血脑水肿水通道蛋白4

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