国家自然科学基金(30470711)
- 作品数：9 被引量：16H指数：2
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- 人类ether-à-go-go相关基因通道的动力学分析和分析机制
- 2008年
- 探讨在电生理记录的过程中,由人类ether-à-go-go相关基因(HERG)编码的通道应分析的通道动力学参数及机制。使用双电极电压钳技术,记录表达于爪蟾卵母细胞的HERG通道,编制不同的刺激脉冲分析各动力学参数。结果显示:(1)HERG通道在去极化脉冲下由于存在快失活而呈内向整流性。激活曲线可通过拟合去极化脉冲及随之的尾电流峰值而得到。激活的时间依赖性可通过拟合去极化不同时程与相应的尾电流峰值而得到。(2)HERG的去激活的I-V(电流-电压)关系曲线仍呈明显的内向整流性,尾电流的衰减路径用双指数方程拟合可得到快和慢两个时间常数。(3)HERG通道的失活呈电压依赖性,分别用两个不同的三脉冲程序,可得到通道的失活曲线以及去除失活后近乎线性的I-V关系。因此虽然HERG通道动力学复杂,仍可设计不同脉冲程序对其通道动力学间接进行分析,为HERG的分子位点作用研究提供基础。
- 王宪沛李璐邹安若涂丹娜廖玉华
- 关键词：钾通道爪蟾卵母细胞
- 替米沙坦对表达在卵母细胞上Kv1.5通道的抑制效应被引量：1
- 2008年
- 目的:研究替米沙坦对表达在卵母细胞上的克隆人类Kv1.5通道的作用,探讨其在心脏复极中的潜在效应。方法:在非洲爪蟾卵母细胞上异源表达克隆人类Kv1.5通道基因,使用双电极电压钳技术记录全细胞电流,检测药物对Ikur电流的影响。结果:替米沙坦以电压依赖性和浓度依赖性方式抑制Kv1.5通道电流,且对峰电流及1.5s末端电流的抑制效应不同,在1μmol/L浓度下,抑制效应分别达到(7.75±2.39)和(52.64±3.77),其半抑制浓度(IC50)分别为(2.25±0.97)μmol/L和(0.82±0.39)μmol/L。替米沙坦对通道的稳态失活没有显著改变,在对照条件下,V1/2的值为(14.47±3.71)mV,斜坡因子k为(23.24±3.86)mV;在1μmol/L替米沙坦作用下,V1/2和k的值分别为(14.38±4.62)mV和(26.26±5.04)mV(n=6,P>0.05)。同时,替米沙坦显著加速了Kv1.5通道的失活。在对照条件下,Kv1.5通道的失活慢时间常数是(693.74±23.16)ms,在应用1μmol/L替米沙坦后,其失活的慢时间常数下降为(523.85±10.28)ms(n=5,P<0.05)。结论:替米沙坦在临床有效浓度范围内能显著抑制表达在卵母细胞上的Ikur电流,提示它兼有选择性阻滞Kv1.5通道的作用。
- 涂丹娜廖玉华邹安若肖华杜以梅郭和平王敏
- 关键词：替米沙坦卵母细胞
- 一种新的呫诺美林衍生物改善老年小鼠的记忆能力(英文)
- 2008年
- 目的为了分析EUK1001- 新的呫诺美林衍生物的功能性质,本实验以老年小鼠为实验材料,研究了该化合物的急性毒理以及对突触可塑性和识别记忆的影响。方法通过口服及腹腔注射途径,对小鼠进行梯度剂量的毒理学实验,测定EUK1001的半致死剂量(median lethal dose, LD50); 采用新奇物体识别任务和离体脑片电生理学技术研究EUK1001对老年小鼠识别记忆和海马突触可塑性的影响。结果 EUK1001 比呫诺美林呈现出更小的毒副作用。在新奇事物识别实验中,EUK1001 能够显著改善老年小鼠在识别记忆任务中的表现。此外,海马脑片灌流1 μmol/L的EUK1001,能直接诱导产生长时程突触增强(long-term potentiation)。结论 EUK1001能够改善正常老龄化过程中学习记忆能力的衰退。
- 崔一卉司文殷亮安述明金晶邓世宁曹晓华
- 关键词：半致死剂量海马长时程增强记忆
- 阿司咪唑阻断HERG通道的生物学特性及分子机制被引量：1
- 2008年
- 目的观察阿司咪唑对野生型和Y652突变型HERG通道阻断的生物物理学特性,探讨HERG通道分子位点改变对阻断的影响。方法将HERG通道表达于非洲爪蟾卵母细胞,利用双电极电压钳技术测量其电流,观察阿司咪唑不同浓度、不同电压、不同作用时间下,对野生型和Y652A、Y652R突变型HERG通道电流的阻断作用。结果阿司咪唑以电压、浓度、时间依赖性阻断HERG通道电流;与野生型比较,Y652A和Y652R突变型可显著减弱阿司咪唑对HERG通道的阻断作用。结论阿司咪唑优先阻断开放状态的HERG通道,Y652是阿司咪唑与通道结合的关键位点,其极性和侧链长度改变可影响阿司咪唑与通道结合。
- 涂丹娜廖玉华邹安若杜以梅肖华王宪沛李璐
- 关键词：HERG钾通道阿司咪唑
- 胺碘酮和维拉帕米对体外激活的淋巴细胞分泌细胞因子的影响被引量：1
- 2007年
- 目的研究胺碘酮(AMI)和维拉帕米(VER)对体外脂多糖(LPS)激活的人外周血淋巴细胞分泌细胞因子的影响,初步探讨此类药物发挥免疫调节作用的机理。方法AMI和VER作用于LPS激活的人外周血淋巴细胞,用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测培养液上清中细胞因子白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素10(IL-10)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平。结果AMI和VER均可浓度依赖性抑制IL-2、TNF-α和TGF-β1的分泌,提高IL-10的分泌。结论AMI和VER通过对体外淋巴细胞的直接作用调节细胞因子的产生,淋巴细胞膜离子通道可能为其作用靶点之一。
- 王宪沛廖玉华胡钢邹安若李璐袁璟涂丹娜
- 关键词：胺碘酮维拉帕米细胞因子免疫调节
- HERG通道在爪蟾卵母细胞的持续表达与电流变化
- 2008年
- 目的:探索一个HERG通道在爪蟾卵母细胞持续稳定表达HERG通道的方法,研究表达培养不同时期卵母细胞膜静息电位和通道电流特性的变化。方法:用含HERG片段的pSP64载体质粒体外转录制备的mRNA注射表达于卵母细胞,用双电极电压钳技术记录通道电流。结果:①本方法可成功在卵母细胞持续表达与HERG通道电生理特性一致的功能性通道,并可在10～15d内稳定用于电生理记录。②在培养的第3、6和9d细胞膜静息电位负值逐渐升高,在第12d又开始降低。异源表达的HERG通道内向整流的最大电位在第3、6和9d逐渐向正向转移,在第12d又回复,激活曲线的半最大激活电压(V1/2)在培养的第3、6和9d逐渐向负向转移,在第12d又逐渐回复,其改变和膜静息电位的变化趋势一致。结论:本研究提供了一种HERG基因在爪蟾卵母细胞长期持续表达的方法,并为HERG通道的分子位点和药物作用研究在不同实验条件电生理实验数据的差异提供依据。
- 王宪沛李璐邹安若涂丹娜廖玉华
- 关键词：HERG钾通道爪蟾卵母细胞
- 酮色林对人类ether-a-go-go相关基因钾通道的阻断作用(英文)被引量：1
- 2008年
- 采用双电极电压钳技术,研究酮色林对表达在非洲爪蟾卵母细胞上的野生型和Y652突变型人类ether-a-go-go相关基因(human ether-a-go-go-related gene,HERG)钾通道的阻断效应,观测HERG通道的分子位点特性改变对其阻断效应的影响。结果显示,酮色林以电压依赖性和浓度依赖性的方式阻断野生型的HERG钾通道电流。尾电流包裹程序记录电流显示酮色林对HERG钾通道微小的张力性阻断。阻断特征符合对开放状态通道的阻断特征。酮色林也能调节失活状态的HERG钾通道。位于孔道S6区的氨基酸位点突变Y652A和Y652R可显著减弱酮色林对HERG通道的阻断作用。同野生型HERG钾通道的阻断相比,Y652A突变使阻断的IC50提高72倍,而Y652R突变使阻断的IC50提高53倍。Y652A和Y652R的阻断效应之间没有明显的差别。以上结果提示,酮色林优先阻断开放状态的HERG钾通道,而Y652是酮色林与通道结合的关键位点之一。
- 涂丹娜邹安若廖玉华杜以梅王宪沛李璐
- 关键词：钾通道酮色林突变
