江苏省科技支撑计划项目(BE2011390)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 相关作者：陆兆新张充吕凤霞别小妹赵海珍更多>>
- 相关机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省科技支撑计划项目苏州市科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 重组脂肪氧合酶基因工程菌破碎条件优化及其酶活力测定方法研究被引量：7
- 2012年
- 建立适用于从重组E.coli中提取重组脂肪氧合酶非机械法的破碎条件。采用化学渗透法、冻融法和酶解法破碎重组E.coli细胞,并采用单因素试验和L25(56)正交试验对细胞破碎条件进行优化。结果表明:溶菌酶添加量为1.5mg/mL、溶菌酶处理时间40min、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)添加量为2.0mmol/L、吐温-60添加量为2%、冻融温度(-70℃冷冻37℃融解)、冻融次数3次,效果最佳,获得粗酶液的脂肪氧合酶(LOX)酶活力为6840U/mL,比优化前(4750U/mL)提高了0.44倍;并在此条件下,比较分光光度法、碘化钾-淀粉法和二甲苯酚橙法测定LOX酶活力,其中碘化钾-淀粉法简单、灵敏、快速,且测定体系具备肉眼可辨的特征颜色,可用于LOX酶活性高通量筛选。
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- 关键词：脂肪氧合酶酶解法
- 小麦面粉强筋改良酶制剂研究进展被引量：4
- 2013年
- 面粉改良剂可以提升面粉品质,溴酸钾作为面粉强筋改良剂在面制品加工过程中已被禁止使用,寻找安全的替代品成为食品添加剂研究领域的热点之一。酶本质是蛋白质,经过食品加工后对人体安全无害,是标准的可替代溴酸钾的绿色食品添加剂。本文对目前国内外有关面粉强筋改良酶制剂的研究进展,包括面粉改良酶制剂的种类、强筋的作用机制以及在应用中存在的问题进行综述。
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- 关键词：小麦面粉强筋酶制剂
- 重组大肠杆菌产脂肪氧合酶发酵条件优化被引量：3
- 2016年
- 为进一步提高重组大肠杆菌(pET-23a-pse-LOX)产脂肪氧合酶(lipoxygenase,LOX)的酶活力,利用响应面法对其发酵条件进行优化。通过单因素试验确定诱导时机、诱导剂浓度、诱导时间、诱导温度、接种量、培养基初始pH值和装液量对其发酵产酶的影响。在此基础上,采用Plackett-Burman试验设计从7个因素中筛选出对LOX产量具有显著效应的因素为诱导时机、诱导时间和培养基初始pH值,并利用Box-Behnken试验设计和响应曲面法分析以确定其产酶的最优发酵条件,即诱导时机为菌液OD600nm达到1.6、诱导时间34h、培养基初始pH7.0。在此条件下,LOX酶活力为(21261.60±264.03)U/mL,比优化前的(13553.96±46.64)U/mL提高了56.87%。
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- 关键词：脂肪氧合酶发酵条件响应面法
- 重组鱼腥藻脂肪氧合酶定点突变及突变酶酶学性质研究
- 2015年
- 重组鱼腥藻脂肪氧合酶(Ana-LOX)基因来自于Anabaena sp.PCC 7120。利用定点突变技术将Ana-LOX的421位和40位的缬氨酸(Val)突变为丙氨酸(Ala),获得突变体V421A、V40A和V421A/V40A。野生型Ana-LOX在50℃下半衰期为3.8 min。而突变酶V421A和V40A在50℃的半衰期分别为4.4 min和7.0 min。突变酶V421A/V40A的半衰期为8.3 min,与野生型Ana-LOX相比,提高了1.18倍。相对于野生酶,突变酶V421A、V40A和V421A/V40A的比活力分别提高了4.83%、41.58%、80.07%。突变酶的最适反应温度均比野生酶(35℃)高5℃。改造后的突变酶更能适合工业生产的需要,对于实际应用具有重要价值。
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- 关键词：脂肪氧合酶定点突变酶学性质
- 重组脂肪氧合酶对面团流变性质及面包品质的影响被引量：2
- 2015年
- 通过测定酶促作用前后面筋蛋白(wheat gluten,WG)的自由巯基含量、表面疏水性、黏弹性等的变化,研究了重组脂肪氧合酶(p ET-32a-ana-lipoxygenase,ana-r LOX)对水溶性阿拉伯木聚糖(water-soluble arabinoxylan,WEAX)和WG相互作用的影响,并探讨了ana-r LOX对面包品质改良的作用。结果表明,与添加WEAX的样品相比,加入ana-r LOX和WEAX后WG的自由巯基含量下降了21%,表面疏水性指数增大,流体动力学半径增大了27.3%,WG的黏弹性明显增加;面包的硬度、胶着性、咀嚼性降低,回复性增强,明显改善了面包品质。
- 任娣谢亚娟陆兆新张充别小妹赵海珍吕凤霞
- 关键词：水溶性阿拉伯木聚糖面筋蛋白黏弹性面包品质
