博士科研启动基金(2006-182)
- 作品数：10 被引量：34H指数：4
- 相关作者：文明李少林柏玮李必波欧阳羽更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学重庆大学更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金重庆市卫生局医学科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- SPIO标记的反义探针磁学性能检测被引量：1
- 2008年
- 采用化学交联法制备超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的c-erbB2癌基因反义脱氧寡核苷酸探针,经过1.5T磁共振仪测定,其T2弛豫率为0.156×106mol-1.s-1;振动样品磁强计测定出探针的磁化强度为69.4238 emu/g Fe,比饱和磁化强度68.4134 emu/g,比剩余磁化强度为30.3541 emu/g,剩磁为19.7345 Gs。为了检测探针的有效性,进一步使用该探针转染高表达c-erbB2癌基因的SK-Br-3肿瘤细胞株,同时使用正义和无义探针转染SK-Br-3肿瘤细胞株、反义探针转染正常小鼠肝细胞作对照,结果发现反义探针能够特异性进入SK-Br-3肿瘤细胞内,且能明显改善该细胞的磁学参数并降低磁共振扫描下的信号强度。
- 文明柏玮李必波韩忠陆云峰李少林杨学恒
- 关键词：分子影像学反义脱氧寡核苷酸细胞成像
- 分子影像学中的肿瘤反义基因显像被引量：5
- 2007年
- 分子影像学是在分子水平针对活体特征和生物进程的一种成像技术，相对于传统的影像学，它偏向于了解疾病的基础变化、基因分子水平的异常，而不是对由这些分子改变所构成的最终结果进行成像。所以，它最突出的特点，就是用影像手段非创伤性地对活体内参与生理和病理过程的分子进行定性或定量的可视化观察。在分子成像中，制备特异性高亲和力的靶向探针是显像的关键因素，也是进行分子影像学研究的先决条件。研究显示，采用反义基因技术制备的癌基因特异性探针，能够提高探针在肿瘤组织内的靶，非靶比值，经相应的成像系统扫描，可从影像上实现对基因表达的有效检测，从而对肿瘤作出早期、特异性的诊断，因此成为生命科学关注的一个焦点。
- 文明柏玮李少林
- 关键词：分子影像学基因显像肿瘤反义分子水平病理过程
- 纳米级超顺磁性氧化铁的制备及其对小鼠急性毒性作用的观察被引量：8
- 2007年
- 目的：自制纳米级超顺磁性氧化铁（superparamagnetic iron oxide,SPIO）,观察其对小鼠的急性毒性作用,为进一步研究其长期毒性及将其作为载体应用于磁共振（magnetic resonance,MR）基因成像奠定基础。方法：采用共沉淀法制备纳米级SPIO,应用透射电镜、原子力显微镜及1.5 T超导型MR仪等测定其相关理化指标。90只小鼠按纳米级SPIO给药方式和剂量随机分为口服灌胃、静脉注射、腹腔注射组（n=30）,分别按总剂量2 104.8 mg/kg、给药容积40 ml/kg口服灌胃;总剂量438.5 mg/kg、给药容积25 ml/kg静脉注射;以及总剂量1 578.6 mg/kg,给药容积30 ml/kg腹腔注射;各组另设10只小鼠按相应方式给予等量生理盐水作为对照（n=10）。给药后饲养14 d,观察饲养期间小鼠的一般情况,检测小鼠血清主要生化指标;观察主要脏器的病理学改变。结果：成功制备纳米级SPIO,其核心颗粒为Fe3O4晶体,颗粒大小20-35 nm,T2弛豫率0.155×10^6mol-1·s^-1,比饱和磁化强度68.395 68 emu/g,剩磁21.463 74 Gs。观察期间各组小鼠均未见死亡;各组小鼠血清生化指标无显著差异;H-E染色及Wright骨髓染色见各组小鼠肝、脾、肾、心、肺和骨髓细胞均无水肿、变性、坏死等改变;普鲁士蓝染色见给药组小鼠肝、脾内分布少许铁蓝色颗粒,而对照组未见。结论：自制的纳米级SPIO符合作为MR成像对比剂的要求,对小鼠无明显急性毒性,值得进一步研究以用于磁共振基因成像。
- 文明宋琳柏玮李少林李必波
- 关键词：超顺磁性氧化铁毒性试验
- 超小型Fe_3O_4纳米的磁学性能测定被引量：3
- 2007年
- 对共沉淀法制备的超小型Fe3O4纳米,采用1.5 T磁共振扫描仪测定其弛豫率为0.155×106mol-1.s-1;振动样品磁强计测定出饱和磁化强度为13.40186 A/m(Fe),比饱和磁化强度13.20380 A/m,比剩余磁化强度为5.8812 A/m,剩磁为2.1464 mT;磁化曲线显示样品具有超顺磁性.上述测定参数与文献记载的国外同类产品磁学性能十分相近,提示其磁学性能达到作为载体用于磁共振成像的要求.
- 文明柏玮李少林李建李必波李强张志伟
- 关键词：磁学性能磁共振成像
- 超顺磁性氧化铁标记反义寡脱氧核苷酸探针在转染细胞磁共振成像中的应用被引量：6
- 2008年
- 目的制备超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针,探讨其应用于转染细胞磁共振(MR)成像的可行性。方法采用化学交联法将SPIO标记于c-erbB2癌基因的ASODN制成ASODN探针,原子力显微镜检测探针形态,高效液相凝胶色谱法检测联接率和生物活性,聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测稳定性。将ASODN探针转染高表达c-erbB2癌基因的SK-Br3肿瘤细胞株,普鲁士蓝染色后于光学显微镜下观察细胞内铁分布,原子吸收光谱法测定细胞内铁含量,MR扫描观察细胞信号强度变化情况。结果制备的ASODN探针近似球形,粒径在25～40nm间,分散均匀,联接率为100%,仍保持原有生物活性,稳定性好。转染ASODN探针后的SK-Br3细胞胞浆内可见多少不等的蓝色铁颗粒,细胞内铁含量明显高于未转染ASODN探针的其他各组细胞(P均<0.01);MR扫描显示其信号强度最弱,信噪比值明显低于其他各组细胞(P均<0.05)。结论成功制备SPIO标记ASODN探针,该探针能有效进入SK-Br3细胞内,明显降低MR扫描下的转染细胞信号强度。
- 文明李必波欧阳羽蒋明东罗弋李少林
- 关键词：磁共振成像超顺磁氧化铁反义寡脱氧核苷酸靶向对比剂
- 磁标记反义探针对小鼠的急性毒理观察被引量：2
- 2009年
- 目的评价SPIO标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针对小鼠的急性毒性,为进一步将该探针用于活体MR基因成像与靶向基因治疗奠定基础。方法60只清洁级昆明种小鼠分为口服灌胃、静脉注射、腹腔注射3组,采用最大给药量法,口服灌胃:总剂量为2 104.8 mg/kg,给药容积40 ml/kg;静脉注射:总剂量为438.5 mg/kg,给药容积25 ml/kg;腹腔注射:总剂量为1 578.6 mg/kg,给药容积30 ml/kg;各组还另设20只小鼠按相应方式给予等量生理盐水作为对照。所有实验小鼠均在25℃室温下连续饲养14 d,观察并记录饲养期间小鼠的一般情况、主要脏器的病理学、血常规、凝血指标和血清主要生化指标改变。结果在观察期间,各组小鼠均未出现死亡,仅个别出现食欲下降、饮水量增多、腹泻、嗜睡、活动增加等,但均在3 d内恢复正常。脏器系数无统计学差异,肝、脾、肾、心、肺、骨髓、生殖器等主要脏器颜色、形态未见明显异常改变,HE染色切片肝、脾、肾、心、肺、生殖器等细胞和Wright染色的骨髓细胞均无水肿、变性、坏死等改变,普鲁士蓝染色仅见肝、脾内分布少许蓝色铁颗粒。各组血常规、凝血指标及生化指标无统计学差异。结论SPIO标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针对小鼠无急性毒性。
- 文明欧阳羽柏玮罗弋李少林
- 关键词：反义寡脱氧核苷酸超顺磁性氧化铁毒理实验
- 超顺磁性氧化铁标记的反义探针在动物体内的药动学及主要脏器分布研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxide,SPIO)标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸探针在新西兰大白兔及BALB/c小鼠体内的药动学及主要脏器分布。方法 18只新西兰大白兔随机分为高、中、低剂量3组,选择注射前30 min、注射后1、3、5、10、20、40、60、120、180、360、720 min等时间点,从对侧耳缘静脉采血,测定铁含量以了解探针的药动学;BALB/c小鼠60只随机分为MR扫描组及取脏器组,在注射反义探针后10、30、60、180、360 min这5个时间点,同步进行MR扫描及取肝、脾、心、肾、肌肉标本,测定观察脏器的信噪比及铁含量,观察反义探针在BALB/c小鼠的主要脏器分布。结果高、中、低剂量的反义探针注射后的药动学符合二室模型,半衰期长;反义探针在脾脏富集量最高,以下依次为肝脏、肌肉、心脏及肾脏。结论了解反义探针在活体内的药动学及主要脏器分布,可以为进一步的活体MR成像时间及剂量选择等提供依据。
- 谭书德欧阳羽文明李梦雅
- 关键词：反义寡脱氧核苷酸超顺磁性氧化铁药动学
- 超顺磁性氧化铁纳米粒子的制备及性能检测被引量：12
- 2007年
- 目的:制备超顺磁性磁共振对比剂四氧化三铁纳米颗粒,并检测其物理和磁学性质,以探讨作为反义基因载体的可能性。方法:共沉淀一步法制备葡聚糖包被的四氧化三铁纳米颗粒,采用X射线粉末衍射法分析其结构,用透射电镜及原子力显微镜测量其大小及分布,用振动样品磁强计检测磁化率等参数。结果:所得样品核心为四氧化三铁晶体,核心粒径为5nm左右,包被葡聚糖后整体颗粒直径为20～35nm,驰豫率为0.155×106(/mol.s),质量饱和磁场强度为69.42162emu/g Fe。结论:制备的样品具有粒径小,分散性好,超顺磁性等优点,符合作为磁共振对比剂的要求,可以作为磁共振成像反义基因载体。
- 柏玮宋琳文明李少林李必波彭志平
- 关键词：超顺磁性氧化铁磁共振成像对比剂
- 高精度原子力显微镜用于超顺磁性氧化铁纳米粒子的表征被引量：4
- 2007年
- 目的：将高精度原子力显微镜用于葡聚糖包被的超顺磁性氧化铁（SPIO）纳米粒子表征,探讨它作为载体用于磁共振成像的可能性。方法：通过共沉淀法合成SPIO,分别采用透射电镜和高精度原子力显微镜对粒子进行观察。结果：透射电镜显示葡聚糖包被的SPIO核心部分即铁粒子外形主要为球形,分布比较均匀,粒径不超过5nm,不能显示葡聚糖包被后的整个粒径;而高精度原子力显微镜显示葡聚糖包被的SPIO呈立方体形,颗粒均匀,核心铁粒子直径在5nm内,葡聚糖包被后的实际粒径在20-35nm之间。结论：对于葡聚糖包被的SPIO表征检测,高精度原子力显微镜大有可为。
- 文明柏玮李少林杨学恒李必波唐泰国苏小平
- 关键词：原子力显微镜超顺磁性氧化铁葡聚糖
- 高精度原子力显微镜显示磁性反义探针与SK-Br-3肿瘤细胞mRNA核苷酸连接
- 2011年
- 为了将高精度原子力显微镜(AFM)用于显示超顺磁性氧化铁标记的c-erbB2癌基因反义寡脱氧核苷酸探针(磁性反义探针)与SK-Br-3肿瘤细胞mRNA核苷酸的连接,我们在磁性反义探针转染SK-Br-3肿瘤细胞基础上,用AFM对转染后的肿瘤细胞进行观察,并同时对转染后的肿瘤细胞进行蛋白表达检测及MRI成像,以进一步证实AFM的观察结果。从AFM显示的磁性反义探针转染SK-Br-3肿瘤细胞后单个细胞的全貌图及局部放大图发现,探针中反义寡脱氧核苷酸中的脱氧胞嘧啶核苷酸闭环与肿瘤细胞mRNA嘌呤核苷酸环相连接;此外,磁性反义探针能特异性抑制SK-Br3细胞c-erbB2的蛋白表达,MRI显示磁性反义探针转染SK-Br-3肿瘤细胞的信号强度最低(P<0.05)。实验表明,AFM可以清楚显示磁性反义探针与SK-Br-3肿瘤细胞核mRNA核苷酸的连接。
- 谭书德欧阳羽欧阳羽李信友文明
- 关键词：原子力显微镜反义寡脱氧核苷酸超顺磁性氧化铁
