武汉市科技攻关计划项目(20036004056)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：陈忠张建华周四维杨为民伍庄更多>>
- 相关机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：武汉市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 骨髓间充质干细胞与PLGA体外附着的实验研究被引量：4
- 2005年
- 目的:研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)在可降解骨基质材料聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)上的黏附、增殖和分化能力,为进一步体内回植提供研究基础。方法:等比混合聚乳酸(PLA)和聚乙醇酸(PGA) ,有机溶剂注模法制备PLGA。体外培养BMSCs ,复合PLGA ,通过扫描电镜观察BMSCs在PLGA上的黏附、增殖,以及在成骨诱导情况下细胞形态的变化。结果:合成的PLGA呈多孔状,孔隙率为85 % ,孔径为10 0～40 0 μm。BMSCs可在PL GA上黏附、增殖、分泌胞外基质,并可在成骨诱导剂的作用下分化为多角形的成骨样细胞。复合后14d ,BMSCs和胞外基质已将基质材料颗粒完全覆盖。结论:BMSCs能在PLGA上粘附、增殖,PLGA可作为BMSCs的载体和骨组织工程的支架材料。
- 曹颖光王戎王华均吴慧华胡立桉
- 关键词：骨髓间充质干细胞扫描电镜
- CH50多肽在膀胱癌细胞系BIU-87中的表达和鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的:研究CH50多肽真核表达载体pCH510体外转染膀胱癌细胞系BIU87以及CH50多肽的表达和鉴定。方法:以脂质体LipofectimineTM2000为介导,将pCH510质粒体外转染给BIU87细胞,用免疫组化S P法、WesternBlot法鉴定CH50多肽的表达,RT PCR法鉴定导入基因的表达。结果:转染pCH510质粒的BIU87细胞明显阳性表达CH50多肽,对照组则不表达。结论:BIU87细胞体外转染pCH510质粒后能表达CH50多肽,改变了癌细胞的黏附属性,为临床治疗膀胱癌提供了新的途径。
- 伍庄陈忠叶章群叶仕桥
- 关键词：BIU-87细胞转染
- PTEN基因转染对人膀胱癌细胞系BIU87增殖及侵袭活性的影响被引量：6
- 2006年
- 背景与目的:PTEN(phosphataseandtensinhomologuedeletedfromchromosome10)是迄今为止发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,在多种原发性恶性肿瘤和肿瘤细胞株中均存在有较高频率的缺失或突变,其失活与肿瘤的进程和预后相关。本实验研究外源性PTEN转染后,人膀胱癌细胞系BIU87增殖和侵袭活性的改变。方法:将携有PTEN基因的重组真核表达质粒pBp-PTEN转化大肠杆菌DH5α并扩增,抽提纯化质粒并进行酶切鉴定,pBp-PTEN体外转染BIU87细胞(pBp-PTEN-BIU87),筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染了空质粒pBp的BIU87细胞(pBp-BIU87)和正常BIU87细胞为对照,用RT-PCR检测PTEN的表达情况,并用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)和细胞侵袭实验分别检测PTEN基因转染前、后BIU87细胞增殖和侵袭活性的变化。结果:pBp-PTEN的酶切鉴定证实含有目的基因PTEN;pBp-PTEN-BIU87细胞的RT-PCR产物经凝胶电泳有明显的阳性条带,而对照组则无;MTT发现,pBp-PTEN-BIU87细胞在第2、3和4天的吸光度(A值)明显低于两对照组(P<0.05),以正常BIU87细胞为对照,PTEN基因在第1、2、3、4天的细胞生长抑制率分别为4.27%、18.92%、19.54%、17.69%。细胞侵袭试验显示,各组细胞浸润穿透ECM膜的数目:pBp-PTEN-BIU8为39.3±7.7,BIU87和pBp-BIU87分别为48.1±13.2和48.9±11.0,pBp-PTEN-BIU87细胞明显少于两对照组(P<0.05)。结论:抑癌基因PTEN转染能降低膀胱癌细胞的增殖和侵袭活性。
- 张建华杨为民周四维陈忠
- 关键词：PTEN基因转染膀胱肿瘤
- PTEN基因转染对人膀胱癌细胞BIU-87凋亡的影响被引量：3
- 2005年
- 目的:研究外源性抑癌基因PTEN转染对人膀胱癌细胞系B IU-87凋亡的影响,探索膀胱癌基因治疗的新途径。方法:将携有PTEN基因的真核表达载体体外转染B IU-87细胞,筛选稳定转染的细胞并扩增培养,用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测PTEN的表达情况,应用细胞原位凋亡检测试剂盒和流式细胞仪分别研究PTEN基因转染前、后膀胱癌细胞凋亡的变化。结果:转染PTEN基因的膀胱癌细胞系B IU-87中PTEN mRNA能稳定表达,肿瘤细胞凋亡明显增多,与对照组比较有显著性差异。结论:转染外源性PTEN基因能显著诱导膀胱癌细胞凋亡,从而达到抑制肿瘤发生、发展的目的。
- 张建华杨为民周四维
- 关键词：PTEN基因转染膀胱癌
- pCH510转染膀胱癌细胞系BIU-87对卡介苗抑瘤作用的影响被引量：1
- 2005年
- 目的研究膀胱癌细胞系BIU-87体外转染pCH510后,CH50多肽的表达及其对卡介苗(bacilluscalmette-guerin,BCG)抑瘤作用的影响。方法在LipofectimineTM2000的介导下,将质粒pCH510体外转染给BIU-87细胞,采用免疫组织化学S-P法和WesternBlot法鉴定CH50多肽的表达;通过四唑盐比色法(MTT法)观察pCH510转染BIU-87对BCG细胞毒作用的影响。结果BIU-87细胞转染pCH510后阳性表达CH50多肽,对照组则不表达;CH50多肽阳性表达增强了BCG对BIU-87的细胞毒性作用(P<0.05)。结论转染pCH510后,BIU-87细胞表达CH50多肽,并因此促进了BCG对膀胱癌细胞的抑制作用。
- 伍庄陈忠叶章群叶仕桥张桂梅冯作化
- 关键词：膀胱癌细胞系BIU-87卡介苗转染
