河南省科技攻关计划(092102110161)
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 相关作者：余燕马金友张建新朱岩昆吴世秀更多>>
- 相关机构：河南科技学院河南师范大学安阳工学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省基础与前沿技术研究计划项目高层次人才科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 两类猪ADP-核糖基化因子的克隆分析与原核表达载体构建
- 2012年
- 哺乳动物小G结合蛋白——二磷酸腺苷-核糖基化因子(ADP-ribosylation factors,Arfs)除在囊泡运输、细胞骨架重排和调节细胞吞噬等方面起重要作用外,还与病毒的感染有关.前期研究发现猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染早期ARFs基因表达明显上调,然而在猪只中ARFs与PRRSV的感染至今知之甚少.本研究中,猪ARF1和ARF4分别被克隆,序列分析发现:ARF1包含一个长度为546bp的开放阅读框(Open reading frame,ORF),预测编码181个氨基酸,理论分子质量为20.70kDa,pI为6.62;ARF4包含一个长度为543bp的开放阅读框,预测编码180个氨基酸,理论分子质量为20.50kDa,pI为5.46.蛋白序列结构分析显示猪ARF1和ARF4蛋白含有典型的p loop,switch区,interswitch区和N端疏水区的Hasp,在第二位都含有可被肉豆蔻酰基化的甘氨酸.猪ARF1和ARF4的原核表达载体也被构建,为进一步研究其在PRRSV感染过程中的调控提供基础.
- 朱岩昆余燕卢全伟吴世秀张建新马金友
- 关键词：原核表达PRRSV
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR诊断方法的建立与应用被引量：5
- 2013年
- 根据GenBank登录的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)血清1～14型的表面抗原蛋白D15和16SrRNA基因序列,设计2对特异性引物,分别扩增出637、431bp两条核苷酸片段,建立了APP的多重PCR检测方法。特异性结果表明,血清1、3、5a、8、10型能扩增出两条与预期大小的片段,而扩增的大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、链球菌、葡萄球菌均成阴性。敏感性试验结果表明,最低检出浓度为50/μL。对临床分离的5株疑似APP菌株进行PCR,结果表明,其中4株为阳性,1株为阴性。提示,该方法的特异性和敏感性均良好。
- 张建新朱岩昆马金友赵杰余燕韩科芳
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎RRNA
- 猪繁殖与呼吸综合征组织病理学变化
- 2010年
- 利用冰冻切片、H.E染色技术,对实验室确诊患猪繁殖与呼吸综合征病猪的皮肤、甲状腺、胸腺、肺脏、心脏、肝脏、脾脏、淋巴结和肾脏等器官进行了组织病理学研究.光学显微镜下可以观察到肺脏间质明显增宽,有浆液性渗出物,肺脏各管腔和肺泡内含有大量粒细胞、淋巴细胞、脱落的黏膜上皮细胞及组织细胞坏死崩解产物,肺泡Ⅱ型细胞代谢旺盛;脾脏呈急性脾炎变化,脾小体及脾索中有许多细胞碎片;淋巴结呈急性淋巴结炎或坏死性淋巴结炎变化,皮质和髓质内含有红细胞;皮肤、甲状腺、肾脏和肝脏内毛细血管出现出血现象.结论:PRRS可引起肺脏间质水肿及全身各组织器官广泛性充血和出血;巨噬细胞和淋巴细胞等变性、坏死擞量减少;淋巴器官内出现许多嗜酸性粒细胞等组织病理学变化.
- 马金友刘俊伟余燕徐之勇王天有
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征组织病理学
- 猪二磷酸腺苷-核糖基化因子6的克隆与原核表达被引量：1
- 2013年
- 为了探索二磷酸腺苷-核糖基化因子6(ADP-ribosylation factor 6,ARF6)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染的关系及ARF6在PRRSV感染过程中的调控作用,本试验克隆猪arf6基因和构建PGEX-4T-arf6融合蛋白质原核表达载体。结果显示:arf6包含一个长度为528bp的开放阅读框(Open reading frame,ORF),预测编码175个氨基酸,理论分子质量为20 080,pI为8.97。结构特征分析显示,猪ARF6蛋白质含有典型的p loop、switch区、interswitch区和N端疏水区的Hasp,在N端第二位含有可被肉豆蔻酰基化的甘氨酸。arf6分布没有组织特异性。经过表达和纯化的ARF6-GST融合蛋白质可作为制备抗血清的抗原。
- 马金友余燕吴世秀张金洲赵恒章徐之勇
- 关键词：原核表达猪繁殖与呼吸综合征病毒
