广东省科技计划工业攻关项目(2009[627]-2)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：庄建朱平郭惠明周正芳陈寄梅更多>>
- 相关机构：广东省人民医院汕头大学第二军医大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 西罗莫司促进TGF-β分泌对小鼠调节性T细胞体外增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的通过观察西罗莫司或环孢霉素A与CD4+CD25+调节性T细胞((regulatory T cell,Treg)体外共培养对CD4+CD25+Treg增殖情况及对Foxp3和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的表达的影响,探讨西罗莫司促进TGF-β分泌诱导Treg体外分化和增殖的机制。方法无菌条件下取C57BL/6小鼠脾脏,分离单个核细胞,免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg,设空白对照组、西罗莫司组、环孢霉素A组,共培养96h。上流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg。反转录聚合酶链、酶联免疫吸附试验法检测西罗莫司或环孢霉素A处理后的CD4+CD25+Treg的FoxP3+、TGF-βmRNA表达水平和分泌情况;Western blot分析TGF-β信号通路重要的活化分子Smad蛋白的表达情况,观察其对CD4+CD25+FoxP3+Treg增殖的影响;使用TGF-β中和抗体进一步验证TGF-β在西罗莫司促进CD4+CD25+FoxP3+Treg分化增殖过程中的重要作用。结果与对照组相比,西罗莫司处理的CD4+T细胞分泌的TGF-β水平增加近2.5倍,差异有统计学意义(P<0.01);而环孢霉素A处理的CD4+T细胞分泌的TGF-β水平则有所下降,但与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,环孢霉素A组CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞比例明显降低,差异有统计学意义(41.25%vs.69.22%,P<0.01);西罗莫司组CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞稍有下降,但差异无统计学意义(65.21%%vs.69.22%,P>0.05)。西罗莫司组FoxP3+T细胞的比例明显高于对照组,差异有统计学意义(53.7%vs.40.2%,P<0.05);而环孢霉素A组FoxP3+T细胞比例明显低于对照组,差异有统计学意义(23.6%vs.40.2%,P<0.01)。结论西罗莫司在体外培养促进CD4+CD25+Treg的增殖与生长,而环孢霉素A体外抑制CD4+CD25+Treg的增值与生长。西罗莫司通过诱导TGF-β表达分泌来促进CD4+CD25+FoxP3+Treg的增殖。
- 麦明杰陈星权叶秀娟朱平郑少忆刘怀普黄晶晶肖泽周王全兴沈攸云陈寄梅庄建
- 关键词：西罗莫司环孢霉素A调节性T细胞FOXP3小鼠
- 低温对脊髓缺血再灌注损伤保护机制的研究进展被引量：2
- 2013年
- 下肢截瘫或者轻度瘫痪是外科大血管手术后严重的并发症,这不仅给患者带来了身体上和精神上的沉重打击,对临床医生也是一种严峻的挑战。随着低温在改善颅脑损伤方面的广泛应用,脊髓损伤的低温保护作用也受到了极大的关注,但目前低温保护机制尚不十分清楚。本文将低温对脊髓缺血再灌注损伤保护机制的研究进展做一综述。
- 周正芳郭惠明庄建朱平
- 关键词：脊髓缺血再灌注损伤外科手术
- 白藜芦醇联合经猪副半奇静脉逆行灌注低温保护液对脊髓缺血再灌注的保护作用
- 2013年
- 目的 观察白藜芦醇联合经猪副半奇静脉逆行灌注低温保护液对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及对脊髓组织中微管相关蛋白-2表达的影响.方法 将18只西藏小型猪随机分为3组：手术对照组（I/R组,n=6）,冷液逆灌组（CL组,n=6）,白藜芦醇联合冷液逆灌组（CL＋ Res组,n=6）.L/R组：常温阻断降主动脉60 min;CL组：阻断前游离出副半奇静脉,阻断降主动脉60 min,同时经副半奇静脉逆行灌注低温（4 ℃C）生理盐水,灌注流速为16.65 ml/min;CL＋ Res组：手术过程同CL组,术后立即管饲白藜芦醇10 mg/kg.各组术中监测动脉压、血气分析、椎管温及鼻咽温的变化.于术后6h、1、2d、1、2、4周进行神经功能评分,术后4周取L2～L4段脊髓,采用Western blot法检测脊髓组织中微管相关蛋白-2的表达变化.多组均数比较采用单因素方差分析,两两组间比较用LSD法检验.结果 18只西藏小型猪全部存活.I/R组行为学评分显著降低,6h、1、2dCL组和CL＋ Res组评分均高于I/R组（F=8.612、17.276和11.985,P=0.035,0.011和0.023）,术后6h、2dCL组和CL＋ Res组评分差异无统计学意义（P=0.526和0.114）,术后1 dCL组和CL＋Res组评分差异有统计学意义（P =0.021）,随着再灌注时间的延长行为学评分逐渐增加.降主动脉阻断后各组实验动物的鼻咽温及椎管温均有下降,I/R组和两实验处理组分别在阻断60 min和再灌注20 min时,鼻咽温及椎管温降至最低,明显低于阻断前（F=23.187～ 55.029,P＜0.01）;再灌注后,I/R组动物的鼻咽温及椎管温均逐渐回升,至再灌注60 min时,鼻咽温及椎管温与阻断前相近（P=0.115和0.302）;而CL＋ Res组与CL组鼻咽温及椎管温回升不明显,在再灌注60min时,鼻咽温及椎管温明显低于阻断前（CL组：P=0.005和0.001;CL＋ Res组：P=0.002和0.001）.Western blot检测微管相关蛋白-2的表达分别为I/R组0.37±0.18,CL组0.54±0.26,CL＋ Res组0.66±0.31,在CL＋ Res组表达�
- 周正芳郭惠明富旗李小辉范瑞新范小平陈寄梅庄建朱平
- 关键词：脊髓损伤再灌注损伤抗氧化剂
- 腺苷预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后B细胞白血病/淋巴瘤-2、B细胞白血病/淋巴瘤-2相关蛋白X表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的 观察腺苷对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后细胞凋亡及B细胞白血病/淋巴瘤-2（bcl-2）和B细胞白血病/淋巴瘤-2相关蛋白X（bax）表达的影响,探讨其对脊髓损伤的保护作用.方法 通过阻断大鼠肾动脉水平的腹主动脉90 min建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型.27只成年健康雄性SD大鼠随机分成3组,每组9只.实验分组如下：A组：假手术组;B组：缺血再灌注损伤组;C组：腺苷预处理组.每组分别设置再灌注12、24、48h3个时间点,于各时间点观察大鼠并对其后肢运动功能进行评分,取再灌注48 h大鼠的L2～L5节段脊髓组织作苏木素-伊红（HE）染色及尼氏（Nissl）染色,透射电镜观察超微结构,Western blot、实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）分别检测bcl-2和bax蛋白及mRNA的表达.结果 HE染色及Nissl染色结果显示：C组细胞水肿、尼氏体溶解等组织形态学变化较B组轻;透射电镜观察结果显示：C组的神经元超微结构损伤较B组轻;Western blot及RT-qPCR检测结果显示：腺苷能降低bax的表达,增强bcl-2的表达.结论 腺苷可减轻脊髓缺血再灌注损伤所造成的损害,促进神经功能的恢复.
- 富旗朱平周正芳李小辉范瑞新范小平陈寄梅庄建郭惠明
