国家高技术研究发展计划(819-04-10) 作品数:9 被引量:24 H指数:3 相关作者: 张学成 臧晓南 孙平楠 刘滨 王鹏 更多>> 相关机构: 中国海洋大学 青岛国家海洋科学研究中心 山东省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
鲑鱼降钙素基因异源表达研究进展 被引量:2 2008年 在不同来源降钙素中,鲑鱼降钙素的活性最高,在钙的代谢和治疗骨质疏松、Paget氏综合症、高钙血症等疾病中有巨大的药用价值。其C末端的酰胺化对它完整的生物活性起重要作用。本文综述了鲑鱼降钙素基因在大肠杆菌、链霉菌、乳酸杆菌和蓝藻等原核细胞,在酵母、昆虫、动植物等真核细胞中异源表达的研究进展,以及通过基因工程的方法能够改进生物表达系统,提高鲑鱼降钙素活性的动态。 张学成 孙平楠 陈云松关键词:鲑鱼降钙素 酰胺化 摄食转基因集胞藻牙鲆的安全性评价 被引量:4 2007年 评价转牙鲆生长因子基因集胞藻作为鱼类饲料添加剂的安全性。将摄食转基因集胞藻的牙鲆肌肉以10.0 g/kg.BW.d剂量给小鼠连续灌喂8周,对试验鼠的摄食量、体重、血液常规和血生化指标、脏体系数以及生殖机能进行了检测,对组织器官进行了病理学检查。研究结果显示,灌喂摄食转基因藻牙鲆的小鼠,其摄食量、体重、血液常规、血生化指标及脏体系数与对照小鼠无显著差异(P>0.05),其生殖机能和肝、肾等组织器官未受损害。表明转基因集胞藻作为牙鲆饲料添加剂不能通过食物链对食鱼生物造成不良影响,是安全无毒的。 刘顺梅 臧晓南 张学成 刘滨 张维芬 孙平楠 况成宏关键词:牙鲆 小鼠 安全性评价 转鲑鱼降钙素基因酵母对体外培养破骨细胞的影响 被引量:3 2011年 用机械分离的方法获得新生Wistar大鼠的破骨细胞,在培养液中分别加入经肠激酶酶切的转鲑鱼降钙素基因酵母的上清液和密钙息(Miacalcic,鲑鱼降钙素注射液),以HE染色观察破骨细胞形态,Image-Pro Plus图像软件分析骨片上骨吸收陷窝的面积,骨片培养7天,吸收陷窝结果显示,转鲑鱼降钙素对破骨细胞吸收功能具有明显的抑制作用。 姜勇 张辉 王鹏 赵喜喜 徐科凤 王健 张学成关键词:鲑鱼降钙素 破骨细胞 细胞培养 多拷贝表达转鲑鱼降钙素基因酵母的急性、亚急性毒性 2012年 口服转鲑鱼降钙素基因酵母为鲑鱼降钙素的应用开辟了一条新的途径.为评价转鲑鱼降钙素基因酵母的安全性,将转基因酵母分别灌胃昆明种小鼠和Wistar大鼠进行急性毒性实验(7 d)、亚急性毒性实验(8周).急性毒性实验结果表明灌喂转基因酵母对小鼠无致死效应(LD50>10 000 mg/kg);亚急性毒性实验中高(2.0 g/kg)、低(0.5 g/kg)剂量组动物的一般状况、体重、主要脏器系数、血液学指标及血液生化指标与各对照组比较,均未见明显差异(P>0.05),组织病理切片检查未发现病理性变化.实验结果说明转鲑鱼降钙素基因酵母不会对实验动物造成不良影响,是安全无毒的. 王鹏 姜勇 田敬云 马健 张学成 路兴波关键词:急性毒性 亚急性毒性 Effects of oral administration recombinant Saccharomyces cerevisiae expressing human-salmon calcitonin on hypercalcemia rats~ 2012年 Recombinant human-salmon calcxtonin (hsCT) was synthesized and expressea on the cell surtaces ot recombinant Saccharomyces cerevisiae (yAGA2-hsCT) using the pAGA2-hsCT expression vector. Expression of recombinant hsCT was verified by flow cytometer.The resorption activity of osteoclasts was inhibited by recombinant hsCT protein which released from the cell surface of yAGA2-hsCT. Blood calcium determination in rats showed the activity of yAGA2-hsCT following oral administration of 5 mg/kg lyophilized transformant yeast to hypercalcemia rats decreases the serum calcium from 2.82 ±0.023 mM to 2.662 ± 0.012 mM. Jiang Yong Zhang Xuecheng Sun Pingnan Chen Yunsong关键词:FACS OSTEOCLAST HYPERCALCEMIA 转鲑鱼降钙素基因酵母的亚急性毒性实验 2007年 评价转鲑鱼降钙素基因酵母的安全性。取转基因酵母分别以高(5 g/kg)、中(0.5 g/kg)、低(0.1 g/kg)3种剂量组对大鼠连续灌胃给药,30 d后观察其行为,测试大鼠体重、血常规、生化指标及病理组织学观察。结果:转基因酵母各剂量组动物的一般状况、体重、主要脏器系数、血液学指标及血液生化指标,与正常对照组比较,均未见明显差异;病理检查未见与药物毒性相关的主要脏器组织形态学改变。转鲑鱼降钙素基因酵母对实验大鼠安全无毒,且在试验期内本试验所用剂量对于试验大鼠来说是安全的。 陈云松 张学成 孙平楠关键词:鲑鱼降钙素 酵母 亚急性毒性 转基因集胞藻PCC6803培养条件的优化 被引量:1 2007年 通过研究培养基中硝酸盐、磷酸盐、碳酸盐等单因子对转牙鲆生长激素基因的集胞藻PCC6803生长的影响,再对以上3营养因子进行三水平的正交实验,得到培养基中硝酸盐、磷酸盐、碳酸氢盐的优化组合。还对培养温度、光照强度、pH值进行三因素三水平的正交实验,以确定最适的培养条件。实验结果表明,转基因集胞藻PCC6803在30℃,光照强度3 000lx,pH值8培养条件下,培养基中NaNO31.25 g/L,K2HPO40.04 g/L,Na2CO30.03 g/L(其它同BG-11培养基),藻细胞的生物量得到有效提高,特定生长速率达到20.64,这为转牙鲆生长激素基因集胞藻PCC6803进一步高密度放大培养提供了依据。 张晓青 张学成 臧晓南关键词:正交试验设计 转鲑鱼降钙素基因酵母及RANKL对大鼠血管平滑肌细胞体外钙化的影响 2009年 观察核因子kB受体激活物配体(RANKL)对大鼠血管平滑肌细胞体外钙化的调节作用,以及转鲑鱼降钙素基因酵母对RANKL调节作用的影响。体外培养大鼠血管平滑肌细胞,建立体外血管平滑肌细胞钙化模型,在培养介质中分别加入RANKL及转鲑鱼降钙素基因酵母蛋白上清液,观察细胞钙沉积、细胞碱性磷酸酶活性及骨钙素的变化情况。结果表明,RANKL促进钙化培养的大鼠血管平滑肌细胞的钙沉积、细胞碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达,而转鲑鱼降钙素基因酵母能够抑制RANKL的促钙化作用。RANKL可能通过增加细胞碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达从而促进血管平滑肌细胞向成骨细胞转化;转鲑鱼降钙素基因酵母可能通过OPG/RANKL/RANK途径抑制血管平滑肌细胞钙化。 高岩 王敬东 张学成关键词:钙化 血管平滑肌细胞 RANKL 节旋藻和螺旋藻对7种抗生素敏感性的比较研究 被引量:14 2004年 对两种丝状蓝藻(钝顶节旋藻和盐泽螺旋藻)在基因工程中常用作选择试剂的7种抗生素———氯霉素、氨苄青霉素、红霉素、链霉素、卡那霉素、庆大霉素和新霉素的敏感性作比较实验.结果表明,两种蓝藻对抗生素的敏感性既有共同的特点,也有明显的差异.它们对红霉素、氯霉素和链霉素最敏感,致死浓度分别为0 1,0 5和5μg/cm3.两种蓝藻对氨苄青霉素比较敏感,1μg/cm3的氨苄青霉素即可抑制Arthrospira 341和Spirulina 351的生长,但6d后生长恢复.Arthrospira 341和Spirulina 351对卡那霉素、庆大霉素和新霉素均有抗性,而且存在很大差异:300μg/cm3的卡那霉素对Arthrospira 341的生长仍然没有影响,但对于Spiruli na 351,50μg/cm3的卡那霉素即对其生长有明显抑制作用;200μg/cm3的卡那霉素即可将其全部致死.200μg/cm3的庆大霉素和300μg/cm3的新霉素不能抑制Arthrospira 341和Spirulina 351的生长,但在这两种抗生素环境中两种藻的生长状态有很大差异.并验证了氯霉素、红霉素和链霉素是节旋藻和螺旋藻基因转化过程中的有效的抗性选择剂,也从对抗生素敏感性方面表明节旋藻和螺旋藻两个属的遗传差异. 臧晓南 张学成 王高歌 刘金姐 张晓辉 刘滨关键词:节旋藻 螺旋藻 抗生素 敏感性