国家杰出青年科学基金(30625030)
- 作品数:3 被引量:14H指数:3
- 相关作者:周继勇宋翥远时莉张秀美肖朝庭更多>>
- 相关机构:浙江大学湖南农业大学新疆农业大学更多>>
- 发文基金:国家杰出青年科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 鸡白介素-2受体基因γ链的转录分析与原核表达
- 引言:白细胞介素-2(IL-2)是一种具有广泛生物学活性的细胞因子,通过与其受体的相互作用,影响 T 细胞、B 细胞和 NK 细胞等的生长、分化、成熟及生物学功能的发挥。白介素-2受体由α、β、γ三种成分组
- 顾建友滕巧泱黄振宇周继勇
- 关键词:原核表达受体基因白介素
- 文献传递
- 乳猪“高热症”猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与致病性分析被引量:5
- 2008年
- 本研究针对疑似高热症疫情的猪场,从分离病原的致病特性及基因特征,对高热症的病因进行了探索。以RT-PCR/PCR从临床病料中检测出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)核酸,利用Marc-145细胞从病料中分离到PRRSV(XS070425毒株)。测序结果显示,XS070425毒株Nsp2基因无高致病性PRRSV Nsp2基因533~561位连续29个氨基酸"RPVTPLSEPIPVPAPRRKFQQVKRLSSAA"的缺失;但遗传进化分析显示,XS070425毒株Nsp2、ORF5基因与近期我国报道的高致病性PRRSV-HuN4和JXA1有较高的同源性,达95%~96%。致病性试验显示,PRRSV-XS070425原始病料悬液和Marc-145细胞分离物接种健康猪后,病毒血症可持续26d,并出现典型的PRRS临床症状和体温升高,但不致死感染猪。这些结果说明,无NSP2蛋白29个氨基酸残基缺失的PRRSV也是猪高热症的重要病原。
- 杨明娴邢刚孙文博黄杰姜学涛周继勇
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 鹅IL-2基因在大肠杆菌中的表达及其可溶性单体的分离被引量:3
- 2008年
- 将去除信号肽编码序列的鹅IL-2基因克隆到原核表达载体pET-28a(+),构建了重组表达质粒pET-28a (+)-goIL-2,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,实现了重组鹅IL-2(rgoIL-2)蛋白在大肠杆菌中的表达。SDS-PAGE和Western-blotting分析显示,表达蛋白的分子量约为15.0 kD,能被抗鹅IL-2单克隆抗体特异识别。可溶性分析表明表达蛋白大部分以包涵体形式存在,部分以可溶形式存在,非变性电泳可见可溶性蛋白存在单体和多聚体组分。镍柱亲和层析法纯化的rgoIL-2蛋白过滤后,利用(?)KTA FPLC(快速蛋白分离纯化系统)进作逐级分离,非变性电泳可见单一的鹅IL-2可溶性蛋白单体。体外生物学活性分析显示鹅IL-2可溶性蛋白单体能刺激鹅淋巴细胞增殖。这为进一步研究鹅IL-2的生物学功能及其临床应用奠定基础。
- 齐静陈吉刚王金勇方杰吴佳俊周继勇
- 关键词:原核表达纯化
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定
- 本研究针对高热症疫情,分离猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),研究分离毒的分子遗传进化特征,进而探讨PRRSV在高热症疫情中的作用。利用Marc-145细胞从浙江杭州等11个地区35个养殖场152份患病猪病料中共分离到...
- 杨明娴姜学涛孙文博黄杰王俊桦周继勇
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传进化
- 文献传递
- 我国部分地区1996~2008年传染性支气管炎病毒分离株膜蛋白基因的遗传变异与系统进化分析被引量:6
- 2009年
- 1996-2008年从我国不同地区分离30株传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Viruses,IBV)野毒株的M基因,采用RT-PCR方法克隆测定所分离的野毒株和澳大利亚T株的M基因序列,利用生物信息学软件与GenBank中公布的部分国内外IBV毒株的M基因序列进行比较分析,研究我国IBV的分子流行学特点和分子遗传变异规律。结果发现所测毒株M基因具有4种不同长度的开放阅读框:669bp、672bp、678bp和681bp,分别编码222、223、225和226个氨基酸的多肽,这些长度的差异是由5′端的核苷酸插入或缺失造成的。30个IBV分离株间的同源性在89.5%~100%之间。以疫苗株H120氨基酸位置为参照,在被比较的73株IBVM蛋白中发现62个位点存在变异,其中以2~5、10~16、44~46、217~222等4个区域氨基酸取代率较高。系统进化分析显示,被比较的73个IBV毒株分为5个进化群,我国的IBV分属于其中的4个群,其中第一群和第四群与我国所使用的疫苗病毒株相距较远。同时发现部分近年的分离株与10多年前分离株具有很近遗传进化关系。从M基因看,在我国出现了多种基因型IBV共存的现象,分离株与疫苗株的遗传差异提示我们需要对疫苗的选用做出重新评估。
- 时莉肖朝庭宋翥远张秀美阿合买提.买买提周继勇
- 关键词:传染性支气管炎病毒膜蛋白基因分子流行病学