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中央高校基本科研业务费专项资金(21610407)
作品数:
1
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相关作者:
江向武
罗羽宏
吴胜兰
张小娟
张少华
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相关机构:
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发文基金:
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2014
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乙型肝炎病毒X蛋白通过诱导P3启动子低甲基化促进胰岛素样生长因子-II基因表达
被引量:2
2014年
目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对胰岛素样生长因子-II(IGF—II)基因P3启动子驱动的mRNA表达的影响及其表观遗传机制。方法分别采用定量RT-PCR和亚硫酸氢盐测序法检测HBV感染阳性和阴性肝癌组织中P3mRNA、HBxmRNA表达水平及P3启动子甲基化状态;进一步分析稳定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx及其对照细胞株HepG2-control中P3mRNA表达水平及P3启动子甲基化状态;最后,将体外甲基化的IGF—II基因P3启动子驱动的荧光素酶报告载体pGL3-P3及携带HBx基因的pCMV-tag2B—X质粒共转染HepG2细胞,采用亚硫酸氢盐测序法及双萤光素酶试验检测HBx蛋白对P3启动子转录活性和甲基化状态的影响。计数资料采用x^2或Fisher精确检验,计量资料采用独立样本f检验或Mann-WhitneyU检验,线性相关分析采用Pearson相关系数评价。结果(1)HBV感染阳性的肝癌组织中P3mRNA表达水平(△cT为-9.59±3.22)明显高于HBV阴性的肝癌组织(△cT为-12.97±3.08),P=0.006;而P3启动子17个cpG位点的平均甲基化水平(36.9%土15.5%)明显低于HBV阴性的肝癌组织(52.1%±19.1%),P:0.025;P3mRNA丰度与HBxmRNA表达水平呈正相关,而与P3启动子甲基化水平呈负相关。(2)在HepG2-HBx及其对照细胞中,也显示了类似的P3mRNA表达水平及P3启动子甲基化水平变化。(3)体外转染的HBx蛋白显著降低了P3启动子甲基化水平,提高了其转录活性。结论HBx蛋白可能通过降低P3启动子甲基化水平促进肝细胞癌IGF—II基因表达,本结果为充分理解HBx蛋白介导的肝细胞癌发病机制提供了新的信息。
汤绍辉
张少华
张小娟
吴胜兰
李俊峰
江向武
周鸿科
罗羽宏
曹明溶
关键词:
胰岛素样生长因子II
低甲基化
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