国家奶牛产业技术体系项目(CARS37) 作品数:27 被引量:200 H指数:8 相关作者: 王旭荣 李建喜 杨志强 王磊 王孝武 更多>> 相关机构: 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 中国动物卫生与流行病学中心 唐山市动物疫病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家奶牛产业技术体系项目 甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目 科技基础性工作专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
牛结核病的传播与控制 被引量:9 2017年 牛结核病是由牛分枝杆菌引起的一种慢性细菌性人兽共患病。牛分枝杆菌可在相同或不同的物种之间、动物到人之间自然传播,但在人与动物之间或人与人之间的自然传播则较为罕见。牛结核病从牛到牛传播的主要途径是通过呼吸道传播,封闭条件下同圈传播的效率远高于开放条件下的传播效率。人感染牛结核病的风险主要存在于饲养员、兽医等职业人群中。对于普通大众来说,主要风险是食用未经巴氏消毒的生乳及乳制品。本文分析了该病的几种主要防控手段,包括牛奶巴氏消毒、检疫和扑杀阳性牛、发挥公共卫生部门的作用等,以期为我国牛结核病的防控提供参考。 张喜悦 孙明军 范伟兴关键词:牛结核病 牛分枝杆菌 人兽共患病 诃子、矮紫堇、甘青乌头提取物对牛病毒性腹泻病毒的体外抑制作用 被引量:8 2018年 为探讨诃子、矮紫堇、甘青乌头3种藏药的体外抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)作用效果,利用细胞培养技术,对BVDV进行增殖并检测TCID50;通过CPE观察和CCK8检测相结合的方法测定3种藏药和利巴韦林的最大药物安全浓度和药物半数中毒浓度(CC50);采用先加药后加病毒、先加病毒后加药、药和病毒预先作用的3种不同加药方式进行体外抗病毒抑制试验,计算不同作用方式下抗病毒有效率、药物半数有效浓度(EC50)和治疗指数(TI),进一步明确各个药物对BVDV的抑制作用。结果表明,经Reed-Muench氏法计算出病毒的TCID50为10-4.67·0.1mL^(-1);诃子、矮紫堇、甘青乌头和利巴韦林的最大安全浓度分别为1mg·mL^(-1)、1mg·mL^(-1)、8mg·mL^(-1)和2μg·mL^(-1);3种藏药及利巴韦林在药物和病毒预先作用方式下的最大有效抑制率均高于50%,其中矮紫堇浓度为1mg·mL^(-1)时,有效抑制率可达到72.86%,抑制效果极显著高于利巴韦林(P<0.01);在先加药后加病毒、先加病毒后加药两种作用方式下的最大有效抑制率均小于30%,药物的吸附阻断作用和复制阻断作用并不明显。综上所述,3种藏药对BVDV均有一定的直接杀灭作用。其中,矮紫堇直接杀灭效果最佳且优于利巴韦林,有望被进一步开发成抗病毒药物。 王丹阳 张康 王旭荣 王海瑞 王磊 张凯 张景艳 李建喜 王学智关键词:藏药 牛病毒性腹泻病毒 抗病毒 利巴韦林 “乳宁散”对小鼠急性和大鼠亚慢性毒性的试验研究 被引量:4 2013年 通过小鼠急性毒性试验和大鼠亚慢性毒性试验评价防制奶牛隐性乳房炎中药"乳宁散"的安全性。将"乳宁散"制备成相当于原药材1.0g/mL的水煎提取浓缩液,选取50只小鼠,随机分为5组,以5000、7500、10000、15000mg/kg体重的剂量1次灌胃给药,观察中毒症状,记录死亡数和计算半数致死量(LD50);另取40只小鼠,随机分为2组,给药组以最大浓度(1.0g/mL)、最大容积(0.04mL/g)1次灌胃受试药物,对照组用等体积生理盐水,给药后连续观察7d,测定最大给药量;再取80只大鼠,随机分成药物处理高、中、低剂量组和对照组,药物组按大鼠体重3000、1500和750mg/kg剂量灌胃给药,连续30d,对照组用生理盐水,检测大鼠体重、血常规指标、血液生化指标、脏器系数及组织病理变化情况。结果表明,急性毒性试验各剂量组均无小鼠死亡,无法计算LD50,经口给药的最大剂量为40.0g/kg体重,表明该产品实际无毒;亚慢性毒性试验中,药物处理组大鼠体增重、血常规、血液生化指标和脏器系数与对照组相比无显著差异(P>0.05),组织病理学观察实质器官无异常病变。提示,临床合理使用中药"乳宁散"不会对靶动物产生毒性作用。 王国庆 王旭荣 张凯 张景艳 王学智 孟嘉仁 常瑞祥 杨志强 李建喜关键词:奶牛 隐性乳房炎 中药 毒性试验 致病性奇异变形杆菌和大肠杆菌混合感染致奶牛关节脓肿和腹泻的研究 被引量:6 2013年 试验旨在查明2012年底甘肃省某奶牛场奶牛关节脓肿和腹泻的病因并选择合适的治疗药物。经牛病毒性腹泻黏膜病毒(BVDV)和牛轮状病毒(BRV)检测、细菌分离鉴定、小鼠致病性试验、药敏试验及血清中钙磷含量测定等综合分析,确诊该病是由致病性奇异变形杆菌和大肠杆菌混合感染引起的。这2种分离菌对青霉素、阿莫西林、庆大霉素、卡那霉素、四环素、氟哌酸及复方新诺明等常用药物严重耐药,均对氟苯尼考中度敏感。经氟苯尼考治疗和加强饲养管理后该病得到有效控制。 王旭荣 王国庆 张景艳 杨志强 孟嘉仁 李建喜关键词:奇异变形杆菌 大肠杆菌 腹泻 奶牛 奶牛临床型乳房炎的细菌分离鉴定与耐药性分析 被引量:25 2012年 2011年山西省多个奶牛场发生了较严重的乳房炎,对76份采集的奶样进行细菌分离鉴定并采用药敏纸片法检测主要分离菌的抗生素耐药情况。所分离细菌以革兰氏阳性菌为主,革兰氏阳性球菌和其他革兰氏阳性菌分别占60.67%和23.59%。分离出多种病原菌和机会致病菌,主要的病原菌有链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等,检出率为2.24%~11.24%,其中无乳链球菌的检出率最高;机会致病菌有粪链球菌、微球菌、克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌等,检出率为1.12%~11.24%,其中粪链球菌和微球菌的检出率较大,分别为11.24%和6.74%。药敏试验检测结果显示,在所选的15种药物中,主要分离菌均对丁胺卡那霉素、氟哌酸和恩诺沙星3种药物敏感;大肠杆菌、克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素类和β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂类药物产生了极强的耐药性,耐药率均为100%;乳房链球菌对该类药物也产生不同程度的耐药,耐药率为20%~100%;对链霉素产生100%耐药的细菌有大肠杆菌、克雷伯菌、无乳链球菌、乳房链球菌、停乳链球菌等细菌;部分分离菌对卡那霉素、庆大霉素、链霉素、四环素、红霉素、先锋霉素Ⅴ、复方新诺明等药物产生不同程度耐药。被检奶牛场混合感染较为严重,应进一步加强环境卫生管理,临床治疗应合理有效用药。 王旭荣 李宏胜 李建喜 王小辉 孟嘉仁 杨峰 杨志强关键词:临床型乳房炎 细菌分离 耐药性 多重PCR和间隔区寡核苷酸分型技术应用于不同流行地区的牛结核病研究 被引量:7 2015年 目的在牛结核病监测中联合应用菌株的多重PCR鉴定和间隔区寡核苷酸分型(spoligotyping),快速鉴定分离菌株并分析不同地区流行菌株的特点。方法分别在牛结核病清净地区和流行地区进行牛型PPD变态反应试验,扑杀阳性牛后进行病理检查,并采集病料分离细菌。获取分离菌株,进行多重PCR鉴定和spoligotyping分型,分析不同地区的菌株特征。结果结核病清净地区监测到16头牛型PPD阳性牛,扑杀后未见有病变,采集病料分离到4株分枝杆菌,经多重PCR鉴定均为非典型分枝杆菌。流行地区监测牛型PPD阳性23头,扑杀后发现14头有病变,采集病料后共有11头分离到疑似菌,经多重PCR鉴定均为牛型分枝杆菌。用spoligotyping分析共分为4个型,其中2个为未见报道的新型,报英国AHVLA牛结核spoligotyping数据库后获取通用编号SB1903和SB1904。结论分离菌株中的优势菌株为首次报道的SB1903,但也检出有国际流行菌株SB0140,证实该地区牛结核病的流行是以"独特菌型地域内相互传播为主、输入性感染为辅"为特征。本次监测发现国内有SB0140菌株分布,提示应调查该型菌是否已经传染至我国人间。 张喜悦 范承祥 杜鹏飞 曹瑞 呼西旦 王淑娟 范伟兴关键词:牛结核 多重PCR 间隔区寡核苷酸分型 牛分枝杆菌FixB、HspX和MPB83基因的原核表达及鉴定 2017年 为了给原核表达牛分枝杆菌Fix B、Hsp X和MPB83基因并纯化Fix B、Hsp X和MPB83蛋白,进一步研究它们在牛结核病诊断中作为特异性抗原的诊断价值及应用奠定基础,试验用PCR方法从牛结核分枝杆菌AF2122/97基因组中扩增出Fix B、Hsp X和MPB83基因片段,构建p ET-28a-Fix B、p ET-28a-Hsp X和p ET-28a-MPB83重组质粒,克隆到DH5ɑ感受态细胞,提取测序正确的阳性重组质粒,转化BL21(DE3)感受态细胞,用1 mmol/L IPTG于37℃诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达形式,Western-blot分析鉴定并用Ni-NTA层析柱纯化蛋白。结果表明:成功扩增了大小依次约为957 bp、435 bp和663 bp的Fix B、Hsp X和MPB83基因,将其连接p ET-28a原核表达载体,原核表达的Fix B、Hsp X和MPB83重组蛋白均以包涵体形式存在,分子质量依次约为37 ku、21 ku和28 ku。经Western-blot鉴定表达产物为Fix B、Hsp X和MPB83重组蛋白,Ni-NTA成功洗脱出目的蛋白。说明试验成功构建了牛分枝杆菌Fix B、Hsp X和MPB83基因的原核表达载体,并纯化了Fix B、Hsp X和MPB83重组蛋白,可用于进一步的应用研究。 陈爽 许芳 张林波 张喜悦 范伟兴关键词:牛分枝杆菌 HSPX 原核表达 纯化 Ⅰa型和Ⅱ型牛源无乳链球菌sip基因的遗传进化分析 被引量:6 2012年 为分析8株Ⅰa型和10株Ⅱ型牛源无乳链球菌的sip基因特征和遗传进化关系,采用PCR方法扩增目的基因并克隆入pGEM-T Easy载体后测序,进行了同源性分析和构建了遗传进化树。结果显示,18株菌株的sip基因全长均为1 305bp,无基因缺失。8株Ⅰa型菌株之间的sip基因核苷酸同源性和推导的氨基酸同源性分别为99.8%~100%和99.5%~100%;而10株Ⅱ型菌株之间的sip基因核苷酸同源性和推导的氨基酸同源性均为100%。18株菌株与其他不同来源、不同血清型参考菌株相应序列的核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为97.8%~100%和96.8%~99.8%。sip基因的遗传进化树分析显示18株菌株处于2个不同的大分支上,其中Ⅱ型菌株处于同一分支上,与中国菌株Mf32和美国菌株GB01068、GB01089的亲缘关系最近,而Ⅰa型菌株处于另一个分支上,与中国菌株Ly2和美国菌株GB00549的亲缘关系最近。说明8株Ⅰa型菌株和10株Ⅱ型菌株分别来源于不同的菌株,但它们的sip基因同源性很高,而且与参考菌株的sip基因相比,目前仍属于保守基因。 王旭荣 张世栋 杨峰 王国庆 杨志强 李建喜 李宏胜关键词:无乳链球菌 遗传进化 基于web of science数据库的全球“奶牛”研究论文的产出分析 被引量:7 2014年 本研究旨在通过对2004-2013年间web of science数据库有关"奶牛"研究的论文产出分析,了解全球范围内"奶牛"研究概况。采用文献计量学方法,以"奶牛"作为标题词,分析"奶牛"研究领域论文的学科、国家/地区、科研机构、重点期刊分布以及论文发表量高的作者及被引次数高的前10篇文献。美国在"奶牛"科研领域实力最强;期刊《Journal of Dairy Science》刊载的"奶牛"研究论文最多;论文发表数量最多的国家是美国,其次是加拿大和德国;加拿大农业与农业食品部、法国农业科学院及奥尔胡斯大学的论文发表量居全球前3位,中国农业科学院与中国农业大学的论文发表数量居国内前2位;"奶牛"研究主要集中在农学、兽医科学和食品科学与技术;被引次数最多的论文来自加拿大圭尔夫大学。结果表明,我国"奶牛"研究的技术追踪目标应为美国,重点关注学科应为兽医科学和食品科学与技术。 王孝武 王旭荣 王磊 李建喜 杨志强 王学智关键词:奶牛 文献计量学 甘肃省某奶牛场肠杆菌性乳房炎主要病原菌的分离鉴定与耐药性分析 被引量:4 2016年 为查明甘肃省某奶牛场发生临床型奶牛乳房炎的主要病原菌并选择治疗用敏感药物,随机无菌采集了6份临床型病牛乳样和1份大罐乳样,采用划线分离、菌落形态观察、革兰染色镜检、生化鉴定及16SrDNA序列分析等方法进行细菌分离鉴定,同时采用K—B法测定主要分离菌株对抗菌药物的敏感性。结果表明,从临床型乳房炎乳样中分离鉴定出大肠埃希菌、芽胞杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌(腐生葡萄球菌)3种细菌,其中大肠埃希菌的分离率最高,为66.67%;从大罐奶样中也分离出大肠埃希菌。药敏试验结果表明,大肠埃希菌对氨苄青霉素、阿莫西林、头孢噻吩、杆菌肽、红霉素均存在不同程度的耐药,耐药率为29%~100%;对诺氟沙星、恩诺沙星、氟苯尼考、头孢哌酮等药物敏感。说明此次牛场临床型乳房炎的主要病原菌是大肠埃希菌、葡萄球菌和芽胞杆菌,而且分离的大肠埃希菌具有多重耐药性。根据检测分析结果,给奶牛场提出针对性的防控措施,临床型乳房炎的发病率下降,病情得以控制。 王海瑞 王旭荣 张景艳 王磊 曹明泽 李建喜 王学智关键词:奶牛 肠杆菌 乳房炎 病原菌 药敏试验