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利用重组E2蛋白检测BVDV血清抗体间接Dot-ELISA方法的建立被引量：5: 2009年; 利用大肠杆菌表达的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白作为抗原,建立了检测BVDV血清抗体的间接Dot-ELISA。最佳工作条件为:E2蛋白抗原的最适包被质量浓度2.0 mg/L(2.0 ng/点),酶标抗体的工作浓度为1∶500,血清稀释度为1∶100,3%明胶-TBS作为封闭液,封闭45 min效果最佳。通过重复性试验、交叉试验、特异性试验和稳定性试验等证明,该方法重复性好、特异性强、灵敏度高;与用BVDV全病毒为抗原的IDEXX ELISA试剂盒相比,特异性96.67%,灵敏度90%,符合率95%。应用建立的检测方法对河北省4个奶牛场采集的178份腹泻奶牛血清样本进行检测,结果BVDV血清抗体阳性率40.45%,与IDEXX ELISA试剂盒的检出率无明显差异。; 赵月兰王建永左玉柱张磊郭红斌秦建华杨汉春

DL-乙硫氨酸建立大鼠脂肪肝体外模型的研究: 2008年; 为研究建立大鼠脂肪肝体外模型的方法,试验采用原代肝细胞体外培养的方法培养大鼠肝细胞。对正常贴壁培养的肝细胞用1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mmol/LDL-乙硫氨酸处理,分别测定处理前及处理后24,48小时细胞培养基上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性以及细胞裂解液中甘油三酯(TG)的含量。结果表明:贴壁培养的正常肝细胞用DL-乙硫氨酸处理后,培养基中ALT、AST的活性均有不同程度升高,其中5.0mmol/L处理组升高明显,与对照组相比差异极显著(P<0.01);4.0,5.0mmol/L组的细胞裂解液中TG含量与对照组相比差异极显著(P<0.01)。结果说明试验建立了大鼠脂肪肝药物损伤的体外模型,可以为在细胞水平筛选治疗脂肪肝的药物提供参考模型。; 高颖汪恩强马玉忠徐丽娜; 关键词：细胞培养脂肪肝甘油三酯

“抗暑一号”对热应激奶牛部分生理指标及生产性能的影响被引量：3: 2010年; 为减轻热应激对奶牛的不良影响,进行了中药方剂"抗暑一号"对奶牛抗热应激作用试验。结果表明,该中药制剂可以在一定程度上提高产奶量,改善乳品质,增强奶牛机体对内外环境的适应能力和调节能力,改善新陈代谢,提高抗热应激能力。; 焦玉兰史万玉秦建华包永占钟秀会赵玉龙; 关键词：奶牛热应激

猪附红细胞体病流行病学调查及不同药物治疗效果被引量：12: 2012年; 对保定市猪附红细胞体病进行流行病学调查,并对感染附红体断奶仔猪进行药物治疗试验。选择保定市6个县区30个不同规模的猪场和20个散养户,随机采集不同年龄阶段猪血液样品2 040份,进行直接压片镜检、血液涂片染色镜检和碘制动试验等病原学检测;选择阳性断奶仔猪进行药物治疗试验。结果保定市猪附红细胞体感染率为74.25%,不同年龄阶段的猪不同季节均可感染附红细胞体;临床治疗及体外药敏试验结果表明,贝尼尔、咪唑苯脲、盐酸多西环素、磺胺间甲氧嘧啶和土霉素对断奶仔猪附红细胞病的治疗具有较好的效果,尤以盐酸多西环素效果最佳。; 赵驻军蒋禄峰秦建华; 关键词：猪附红细胞体流行病学疗效

奶牛乳腺炎大肠埃希菌的分离鉴定及药敏试验被引量：3: 2011年; 从河北省某奶牛场采集乳腺炎病牛的乳汁,进行病原分离鉴定及耐药性检测。研究结果表明,该菌在形态特征、培养特性、生化特性、血清型、致病性等方面与大肠埃希菌基本一致,鉴定为大肠埃希菌。分离菌对卡那霉素、菌必治敏感,对莫能菌素,林可霉素,氨苄青霉素,链霉素、苯唑青霉素、阿齐霉素表现出耐药性。; 张磊冯雪领秦建华; 关键词：奶牛大肠埃希菌耐药性

复方中药软膏剂的透皮效果研究: 目的:评价中药复方软膏剂透皮效果,筛选最佳组方。方法:以中药软膏剂中绿原酸成分为标记物,运用高效液相色谱法(HPLC)测定透过液中绿原酸的含量,评价不同的中约剂型和不同的透皮促渗剂对中药软膏剂透皮效果的影响。结果:中药超...; 张少华任丽琴史万玉秦建华钟秀会包永占; 关键词：中药软膏剂乳房炎 HPLC; 文献传递

家兔子宫内膜细胞炎症模型的建立被引量：11: 2009年; 胶原酶消化法分离和培养家兔子宫内膜细胞,大肠杆菌细菌脂多糖(LPS)诱导子宫内膜细胞炎症,以培养细胞的形态学和传统炎症指标作为炎症发生和发展的判断标准。以不同浓度的LPS作用于细胞,收集不同时段培养上清液,ELISA法测定TNF-α、IL-1β的含量。结果表明,100ng/ml LPS是体外培养的子宫内膜细胞诱导炎症的最适浓度。炎症模型组培养上清液中TNF-α、IL-1β的含量比同期空白组高(P<0.01),表明炎症模型建立成功。; 杜金梁徐丽娜马玉忠秦建华; 关键词：家兔子宫内膜细胞 LPS 炎症模型

河北省部分奶牛场奶牛子宫内膜炎病原菌分离与鉴定被引量：10: 2009年; 为研究奶牛子宫内膜炎的发病原因,本试验以河北省邢台市某农场3个大型牛场饲养的奶牛为调查对象,对20头患病奶牛子宫分泌物通过显微镜检查、细菌分离培养、生化鉴定等方法进行病原学研究。共检出6种病原菌,其中金黄色葡萄球菌8株(占34.78%)、表皮葡萄球菌6株(占26.09%)、链球菌和沙门氏菌各2株(各占8.70%)、大肠杆菌4株(占17.40%)、蜡状芽孢杆菌1株(占4.35%)。; 张义冉汪恩强秦建华马玉忠程晶晶; 关键词：奶牛子宫内膜炎病原

牛病毒性腹泻病毒E2基因在毕赤酵母GS115中的表达与鉴定被引量：4: 2010年; 将牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhoea-mucosal disease virus,BVDV)河北分离株HB-bd毒株E2基因去除跨膜区获得sE2基因,将sE2基因克隆入巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)分泌型表达载体pPIC9K中,筛选培养后提取阳性重组质粒,经酶切和PCR鉴定,命名为pPIC9K-sE2。重组质粒pPIC9K-sE2经SalⅠ酶切后,电穿孔导入P.pastorisGS115基因进行整合,使外源基因sE2稳定地整合到P.pastoris染色体中,G418筛选得到阳性高拷贝转化子GS115-pPIC9K-sE2。经甲醇诱导表达后,sE2融合蛋白获得了表达,表达产物经SDS-PAGE、Western-blot和Dot-ELISA分析,确定其表达的sE2融合蛋白相对分子质量大小为37 000,且具有天然蛋白的抗原特异性。免疫活性研究证明,P.pastoris表达的sE2蛋白能刺激动物产生抗体。; 赵月兰左玉柱范京惠王安忠杨汉春秦建华; 关键词：BVDV E2基因毕赤酵母分泌型表达

不同中药对奶牛乳房炎病原菌抑菌效果的观察被引量：10: 2009年; 试验采用琼脂平板扩散法(打孔法),研究了黄芩等21种中药对从乳房炎奶牛乳汁中分离出的3种主要致病菌的体外抑菌情况。结果发现,大肠杆菌对黄芩高度敏感,对丹参、青翘属中度敏感;金黄色葡萄球菌对黄芩、青翘、丹参、地榆、红花、蒲公英高度敏感,对枳壳、忍冬藤、萹蓄、苦地丁、蟾酥、木通中度敏感;无乳链球菌对地榆、当归属高度敏感,对青翘、黄芩、蒲公英、丹参、苦地丁、红花、川芎、枳壳中度敏感。为防治奶牛乳房炎有效中药复方的筛选提供了理论依据。; 张少华孙丹丹史万玉秦建华钟秀会包永占任丽琴; 关键词：中药奶牛乳房炎病原菌

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