公共文化服务平台

间充质干细胞诱导糖尿病小型猪同种异体胰岛移植的免疫耐受被引量：2: 2013年; 背景:胰岛移植为有望根治糖尿病的一种方法,而移植排斥问题阻碍了移植的开展,诱导受体对供体移植物的免疫耐受是解决同种异体移植排斥反应的关键。目的:观察骨髓间充质干细胞输注对糖尿病小型猪同种异体胰岛移植物存活时间的影响。方法:无菌条件下抽取动物骨髓,离心弃上清。取单核细胞层,洗涤后加入L-DMEM培养基,调整细胞浓度为1×109L-1。培养48h后换液去除未贴壁的细胞,依据贴壁培养法分离和扩增间充质干细胞。取第5代细胞作为移植供源,调整细胞浓度为1×1010L-1。四氧嘧啶制备糖尿病小型猪模型,随机分为骨髓细胞组和干细胞+骨髓细胞组,经肝门静脉分别植入胰岛细胞、骨髓细胞,胰岛细胞、骨髓细胞和骨髓间充质干细胞。结果与结论:骨髓间充质干细胞联合骨髓细胞输注较单纯骨髓细胞输注能显著延长同种异体小型猪胰岛移植物存活时间(P<0.05),同时受体血清胰岛素能较长时间维持较高水平。提示骨髓间充质干细胞输注能显著延长猪胰岛移植物存活时间,并促进胰岛移植物正常功能的发挥。; 杨锐马昭杰陈容平王梅张振蔡德鸿陈宏; 关键词：干细胞胰岛同种异体胰岛移植免疫耐受胰岛细胞小型猪

同种异基因大鼠间充质干细胞移植对体内CD4^+CD25^+T细胞的影响被引量：10: 2009年; 背景:间充质干细胞的免疫抑制作用近年来逐渐得到证实并开始应用于临床,但相关研究成果主要来源于体外细胞实验。目的:观察同种异基因大鼠骨髓间充质干细胞从静脉输入后对体内CD4+CD25+调节性T细胞的影响。设计、时间及地点:以动物为对象的对照观察实验,于2008-03/09在南方医科大学珠江医院移植免疫研究所完成。材料:Wistar大鼠6只用于制备骨髓间充质干细胞,SD大鼠20只作为输注骨髓间充质干细胞的受体鼠。方法:从Wistar大鼠骨髓分离培养间充质干细胞,取第3~5代细胞进行实验。①体外淋巴细胞增殖实验:首先将间充质干细胞悬液从尾静脉注入SD大鼠体内10d后脱臼处死,取大鼠脾脏制备脾淋巴细胞。实验分5组:分别为脾淋巴细胞/骨髓间充质干细胞为1∶10,1∶50,1∶100+ConA5μg组,脾淋巴细胞+ConA5μg组(增殖组),单纯淋巴细胞组(空白组),检测共培养体系中CD4+CD25+/CD4+T淋巴细胞比率。②体内注射骨髓间充质干细胞实验:将5×109L-1,5×108L-1,5×107L-1间充质干细胞及PBS静脉输入SD大鼠体内,10d后取受体鼠胸腺、脾脏、外周血检测CD4+CD25+/CD4+T淋巴细胞比率。主要观察指标:①淋巴细胞增殖体系中CD4+CD25+/CD4+比率的变化。②SD大鼠胸腺、脾脏、外周血CD4+CD25+/CD4+比率的变化。结果:①体外淋巴细胞共培养体系中,1∶10组T细胞亚群CD4+CD25+/CD4+细胞百分率较增殖组显著升高(P<0.01)。②体内输注间充质干细胞达5×109L-1的受体鼠外周血和脾脏CD4+CD25+/CD4+T细胞比率上升,与输注PBS组相比有显著差异(P<0.05),而在胸腺中各组比率无明显差异。结论:高浓度同种异基因大鼠间充质干细胞不仅可以在体外实验中增加CD4+CD25+/CD4+T细胞比率,静脉输入后仍具有相同作用。; 余劲明蔡德鸿张桦袁小澎陈宏; 关键词：骨髓间充质干细胞

一种简单快速分离纯化小型猪胰岛的方法: 2009年; 目的探索一种简单快速分离纯化小型猪胰岛的方法。方法摘取小型猪胰腺,经胰管插管后注入胶原酶V,用自制的半自动消化分离装置消化,胰腺消化物经自制的推进式离心管及单一密度(1.096g/mL)的Ficoll400纯化后行双硫腙(DTZ)染色,倒置显微镜下观察计数胰岛的数量及纯度,胰岛素释放试验检测胰岛细胞的功能。结果纯化后平均每克小型猪的胰腺可以获得(2645±234)IEQ(胰岛细胞当量),平均纯度为(74.2±5.1)%。纯化后的胰岛细胞对胰岛素释放刺激反应良好,高糖时的胰岛素释放量为低糖时的3.14倍(P<0.01)。结论采用自制的半自动消化分离装置及单密度梯度法对小型猪胰岛进行分离纯化,为小型猪胰岛细胞的研究建立了一种简单快速分离纯化胰岛的方法,纯化后的胰岛细胞功能良好。; 马昭杰蔡徳鸿张桦孙嘉王先宝陈宏; 关键词：小型猪胰岛细胞纯化

叙利亚金黄地鼠胰岛局部血管紧张素Ⅱ的生成途径与机制探讨被引量：1: 2009年; 目的探讨以不同抑制剂阻断局部肾素血管紧张素系统(RAS)后叙利亚金黄地鼠胰岛细胞生成血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的变化。方法分离纯化叙利亚金黄地鼠胰岛细胞,分为对照组、卡托普利组、糜蛋白酶抑素组、抑肽酶组、α-抗胰蛋白酶组、卡托普利+糜蛋白酶抑素组共6个组,加入血管紧张素Ⅰ后按组别依次加入PBS、卡托普利(终浓度1mmol/L)、糜蛋白酶抑素(终浓度1mmol/L)、抑肽酶(终浓度1mmol/L)、α-抗胰蛋白酶(终浓度50μg/ml)、卡托普利联合糜蛋白酶抑素(终浓度均为1mmol/L)干预胰岛细胞,然后以酶联免疫分析法(ELISA)检测各组上清中AngⅡ的含量。结果卡托普利组、糜蛋白酶抑素组上清AngⅡ含量差异无统计学意义(P=0.72),但分别较不加抑制剂的对照组减少了42.50%和50.94%(P<0.01),而α-抗胰蛋白酶和抑肽酶组分别较对照组减少了20.04%和18.67%(P<0.05),卡托普利+糜蛋白酶抑素组则较对照组减少了81.82%(P<0.01)。结论胰岛局部AngⅡ的生成除经典的血管紧张素转换酶(ACE)途径之外还存在糜蛋白酶途径;非疾病状态下由ACE途径和糜蛋白酶途径所生成的AngⅡ的量无显著差异。; 孙侃孙嘉陈宏张桦蔡德鸿; 关键词：胰岛肾素-血管紧张素系统糜蛋白酶

一种简易高效建立小鼠胰岛移植模型的方法被引量：3: 2008年; 目的探索一种简便高效建立小鼠胰岛移植模型的方法。方法摘取4只C57BL/6小鼠的胰腺,0.25 mm penfine针对胰腺反复多点注射胶原酶P后静止消化20 min;采用自制的推进式离心管,以单一密度梯度Ficoll液(1.088 g/ml)纯化胰腺消化物,双硫腙对胰岛进行特异性染色,利用胰岛素释放试验检测胰岛细胞的功能;纯化后的胰岛移植到实验性糖尿病BALB/c小鼠的肾包囊下,术后观察其血糖变化。结果纯化后共得到(789.6±26.4)个胰岛细胞当量(IEQ),平均纯度为(77.12±3.23)%;胰岛细胞对胰岛素释放刺激反应良好,高糖时胰岛素的释放量为低糖时的2.35倍(P<0.01)。移植后可逆转糖尿病小鼠的高血糖平均达(16.3±2.9)d。结论提供了快速获取小鼠胰岛细胞的方法,为胰岛移植的实验研究建立了一种简易高效的制作动物模型的方法。; 李明蔡德鸿张桦许兆忠袁小澎余劲明陈宏; 关键词：小鼠胰岛移植多点注射

大鼠间充质干细胞对BALB/c小鼠体外淋巴细胞的影响被引量：4: 2009年; 目的研究大鼠间充质干细胞(MSCs)对BALB/c小鼠淋巴细胞增殖和CD4+CD25+调节性T细胞亚群的变化。方法分离、扩增SD大鼠MSCs,流式细胞术检测表面标志以鉴定。取第5代MSCs与分离的小鼠淋巴细胞在刀豆蛋白(ConA)刺激下共培养5d,流式细胞仪测定细胞增殖,CD4+CD25+调节性T细胞亚群比例的变化。结果当淋巴细胞:MSCs在1∶10及1∶50时均可抑制ConA刺激下可抑制小鼠淋巴细胞增殖,淋巴细胞:MSCs在1∶10时CD4+CD25+调节性T细胞亚群比例明显升高。; 余劲明蔡德鸿张桦袁小澎陈宏; 关键词：骨髓间质干细胞免疫抑制淋巴细胞 CD4+CD25+调节性T细胞

间充质干细胞联合骨髓细胞输注对糖尿病胰岛移植大鼠细胞因子的影响被引量：2: 2012年; 目的探讨同种异基因大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)联合骨髓细胞(BMCs)输注对胰岛移植大鼠体内细胞因子水平的影响。方法制备SD大鼠DM模型,Wistar大鼠骨髓传代纯化获得MSCs。经静脉输注供体MSCs和/或BNCs后7d,糖尿病SD大鼠进行同种异体胰岛移植,观测胰岛移植物存活时间,检测白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)、白介素-6(IL-6)及转化生长因子-β1(TGF-β1)含量。结果预输注高浓度MCSs联合BMCs能显著延长移植胰岛的生存时间,平均为30d。该组大鼠体内IL-2、IFN-γ水平降低,IL-10和TGF-β1水平升高(P<0.05)。结论高浓度同种异基因大鼠MSCs联合BMCs输入体内后,使胰岛移植大鼠血清细胞因子发生显著变化,可能是诱导胰岛移植免疫耐受的原因之一。; 余劲明蔡德鸿张桦陈宏; 关键词：骨髓细胞细胞因子移植免疫耐受

同种异基因大鼠间质干细胞注射对活体细胞免疫功能的影响: 2009年; 目的探讨静脉输注同种异基因大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)对体内细胞免疫功能的影响。方法从Wistar大鼠骨髓分离培养MSCs,通过形态学观察及流式细胞术检测表面标志以鉴定其纯度。选择20只正常SD大鼠,随机均分为4个组,分别经静脉输注5×106/ml、5×105/ml、5×104/ml的MSCs及PBS各1ml。10d后取受体SD大鼠脾脏行混合淋巴细胞反应(MLR)检测淋巴细胞增殖率、外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及CD4+CD25+/CD4+T淋巴细胞比率,以评价体内MSCs对正常大鼠细胞免疫功能的影响。结果输注MSCs达5×106/ml的受体SD大鼠脾脏淋巴细胞增殖率为8.58%±0.27%,明显低于输注PBS大鼠(24.40%±5.21%,P<0.01)。输注5×106/ml MSCs的SD大鼠脾脏、外周血CD4+下降,CD4+CD25+/CD4+T细胞比率上升,与注射PBS大鼠相比差异有统计学意义(P<0.01)。输注5×105/ml、5×104/ml MSCs的大鼠各项指标与输注PBS大鼠相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论高浓度同种异基因MSCs静脉输入后可以部分抑制活体的细胞免疫功能,提高CD4+CD25+/CD4+T细胞的比率,为诱导移植免疫耐受及治疗自身免疫疾病提供了理论基础。; 余劲明蔡德鸿张桦袁小澎陈宏; 关键词：间质干细胞免疫耐受

间充质干细胞在移植免疫中的作用及其临床应用: 2007年; 李明陈宏蔡德鸿; 关键词：间充质干细胞移植免疫特异性免疫耐受慢性排斥反应免疫抑制治疗嵌合状态

磁标记猪骨髓间充质干细胞肝脏移植示踪研究被引量：5: 2009年; 目的探索1.5TMR I活体示踪经大动物门静脉移植的磁标记干细胞技术及最长示踪时间。方法菲立磁-多聚赖氨酸(FE-PLL)复合物标记猪骨髓间充质干细胞后,经门静脉移植入猪的肝脏,分别于移植前及移植后1 d、1周、2周、3周行扫描。结果移植后1 d、1周、2周、3周肝脏信噪比(SNR)分别为2.30±0.16、9.15±1.01、11.21±1.08、15.21±1.04,前2周肝脏信噪比与移植前比较有显著的降低(P<0.05)。结论1.5TMR I能有效示踪经大动物门静脉移植的磁标记干细胞,可示踪2周。; 王先宝蔡德鸿张桦杨建明孙嘉张振马昭杰陈宏; 关键词：间充质干细胞菲立磁

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

国家自然科学基金(30570884)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家自然科学基金(30570884)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈