江苏省自然科学基金(BK2007020)
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
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- 相关机构：江南大学浙江工业大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：理学轻工技术与工程生物学更多>>
- 脂肪酶催化酯化拆分与水解拆分2-甲基丁酸及其酯被引量：3
- 2009年
- 2-甲基丁酸手性中心碳原子上的基团差异较小,是一种典型的酶法动力学拆分较为困难的风味化合物.本文分别在不同体系中比较了几种商品化脂肪酶和华根霉脂肪酶(RCL)催化酯化和水解反应对2-甲基丁酸及其酯的拆分,结果表明,RCL不仅在非水相中具有一定的选择性酯化能力,而且在水相中具有更强的选择性水解2-甲基丁酸乙酯的能力,在40oC下优先水解(S)-型底物,反应10h后(R)-2-甲基丁酸乙酯的ee值为92.4%.进一步考察了温度对RCL催化酯化拆分与水解拆分的影响,结果表明,低温下反应的对映体选择性较高,在4oC下通过水解拆分获得的(R)-2-甲基丁酸乙酯的ee值可提高至95.0%.
- 李小路王栋徐岩耿亚维陈聪王楠
- 关键词：动力学拆分
- 华根霉菌丝体结合脂肪酶催化酯合成动力学拆分2-辛醇被引量：14
- 2008年
- 研究了华根霉CCTCC M201021菌丝体结合脂肪酶(RCL)在非水相中催化酯合成动力学拆分外消旋2-辛醇的能力.发现RCL对该反应具有较好的光学选择性(E>100),辛酸和异辛烷分别是最佳的酰基供体和反应溶剂,体系水活度的减少对反应的光学选择性没有明显影响,但能显著提高反应初速度.在相同转化率下,通过添加3A分子筛降低体系水含量可使反应初始速度提高7.3倍.当底物浓度提高到0.230 mol/L,反应40 h时转化率达44.4%,产物酯的ee值为94.7%.与三种商品化脂肪酶进行了比较,发现在相同条件下RCL对2-辛醇的拆分不但具有较好的光学选择性(E=103.1),而且也表现出较高的反应初速度和转化率.
- 单天宇王栋徐岩何军邀
- 关键词：华根霉动力学拆分2-辛醇
- 华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究被引量：2
- 2009年
- 以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)为出发菌株,提取总DNA,PCR扩增出前导肽脂肪酶基因(proRCL)及成熟肽脂肪酶基因(mRCL),克隆到原核载体pET-28a,转化E.coli BL21(DE3),诱导表达并纯化出活性目的蛋白。经SDS-PAGE分析,重组蛋白ProRCL和MRCL的分子量分别约43kD和33kD。两重组脂肪酶主要酶学性质基本相似,最适反应温度均为35℃,40℃下较为稳定;最适反应pH相近,分别为8.0和8.5;以pNP脂肪酸酯为底物,均对短链脂肪酸酯底物特异性较高。MRCL上述性质与野生型RCL基本一致。研究结果表明,通过条件控制可以利用E.coli表达系统表达具有活性的华根霉前导肽脂肪酶ProRCL和成熟肽脂肪酶MRCL。与米根霉脂肪酶(ROL)不同,前导序列对华根霉脂肪酶的主要酶学特性没有显著影响。
- 李飏王栋徐岩
- 关键词：华根霉克隆
- 华根霉脂肪酶催化合成乙酸香茅酯的研究被引量：3
- 2010年
- 研究了华根霉菌丝结合脂肪酶(RCL)非水相直接酯化合成乙酸香茅酯的反应条件。在醇酸比为1.2∶1,反应温度40℃时得到较高的转化率。但由于底物乙酸较强的抑制性,使得高底物浓度下RCL催化能力受限。通过采用分批流加的方法使在底物浓度0.2mol/L时转化率提高至94%。与10种商品化脂肪酶进行了比较,发现在相同条件下RCL表现出较高的转化效率。产物乙酸香茅酯的色泽好,气味纯正。
- 王楠王栋徐岩周艺博
- 关键词：华根霉
