美国中华医学基金(CMBParasitology98-674)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：杨静王少华魏骏飞诸欣平黄松更多>>
- 相关机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：美国中华医学基金北京市教委科技发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 旋毛虫成虫部分cDNA表达质粒文库的构建被引量：1
- 2006年
- 目的 为寻找更多有效的旋毛虫病疫苗候选抗原分子，构建旋毛虫成虫部分cDNA质粒文库。方法 以旋毛虫成虫cDNA文库为模板，进行PCR扩增。扩增产物500-2000bp之间的DNA片段用BamHⅠ、HindⅢ酶切，将酶切产物克隆入真核表达载体pcDNA3．1，对部分转化子进行酶切鉴定。结果 构建了插入片段在500-1500 bp之间的旋毛虫成虫部分cDNA质粒文库，90％以上的转化子都含有插入的DNA片段。结论 成功构建一个旋毛虫成虫部分cDNA质粒文库。
- 杨静杨雅平魏骏飞王少华黄松诸欣平
- 关键词：旋毛虫
- 旋毛虫抗原基因Ts87在毕赤酵母系统中优化表达的研究被引量：1
- 2006年
- 目的优化旋毛虫抗原基因Ts87在毕赤酵母系统中的表达,提高其表达量。方法选择去除自身信号肽序列的Ts87基因构建天然N末端的重组质粒,电击转化经锂盐处理过的酵母细胞X-33,摸索诱导起始细胞浓度、甲醇诱导浓度及其添加的时间间隔、pH值及诱导时间等条件对重组菌株表达的影响,并对表达产物进行Western blotting鉴定。结果采用锂盐处理毕赤酵母细胞的感受态制备方法可以极大的提高电击转化效率,并确定pPICZαA-Ts87nature/X-33株最佳表达条件为:OD600 nm=1.0,1.0%/24 h体积比添加甲醇,pH值7.0或8.0,诱导表达72 h。将此条件下的培养物上清液30μL直接上样,表达产物可被感染旋毛虫的兔血清所识别。结论本研究优化了Ts87在毕赤酵母系统中的表达条件,为后续研究工作打下基础。
- 魏骏飞顾园王少华杨静黄松诸欣平
- 关键词：旋毛虫毕赤酵母
