国家高技术研究发展计划(863-103-13-01-01)
- 作品数：5 被引量：7H指数：1
- 相关作者：冯佑民张舟黄一丁梁镇和唐月华更多>>
- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 类胰岛素生长因子-1的C结构域不影响胰岛素二硫键的热力学稳定性被引量：1
- 2002年
- 胰岛素和类胰岛素生长因子-1（IGF-1）都属于胰岛素超家族,两者不但一级、三级结构有较高的同源性,而且生理功能也有少量交叉.然而两者的折叠行为却有很大的差别:胰岛素及其重组前体（PIP）只折叠成一种热力学稳定的二硫键配对,而IGF-1却折叠成两种热力学稳定的二硫键异构体.为了了解两者折叠行为差异的分子机制,制备了由胰岛素的A,B 链和IGF-1的C结构域构成的单链杂交分子——[B10Glu]Ins/IGF-1（C）,研究了该杂交分子二硫键的热力学稳定性以及它在含有少量流基试剂的变性剂中的解折叠程度,同时还纯化了该杂交分子一种主要的非天然二硫键异构体,并研究了它的再折叠情况.观察到IGF-1中C结构域的引入并未改变胰岛素分子的折叠热力学,但是影响了折叠的动力学过程.
- 郭占云冯佑民
- 关键词：胰岛素解折叠再折叠热力学稳定性
- 一个简便、经济的转化胰岛素基因表达产物为重组胰岛素的方法及其应用被引量：1
- 2003年
- 建立了直接用胰蛋白酶酶解重组胰岛素基因表达产物的方法,并用以加工猪胰岛素前体(PIP),[B16Ala]PIP和[B26Ala]PIP,分别获得保留了各自亲本全部生物活力的(去B30)胰岛素、(去B30)[B16Ala]胰岛素和(去B30)[B26Ala]胰岛素,进一步证明胰岛素的B链C末端残基不是胰岛素生物活力所必需的,该方法比转肽方法简便、产品得率高、避免了使用有机溶剂;比胰蛋白酶/羧肽酶方法,省去了羧肽酶制剂的使用。(去B30)[B16Ala]胰岛素和(去B30)[B26Ala]胰岛素还保留了其亲本的无自身聚合能力的性质,是单体胰岛素,在临床应用中可代替原单体胰岛素,[B16Ala]胰岛素和[B26Ala]胰岛素。
- 张舟陈晖唐月华冯佑民
- 关键词：基因表达产物
- 胰岛素蛋白质工程:[B16Ala]胰岛素和[B26Ala]胰岛素——两个新型的速效人胰岛素被引量：1
- 2002年
- 用大动物（猪）降血糖实验证明田[B16Ala]胰岛素和[B26Ala]胰岛素是快速降血糖胰岛素.它们的前体[B16Ala]PIP和[B26Ala]PIP,在甲醇酵母体系中的分泌表达量分别为650和130 mg/L.由于它们是新型的分别保留全部和几乎全部胰岛素体内生物活力的速效胰岛素,且在甲醇酵母表达体系中得到比较高的表达量,所以具有很好的临床应用前景.
- 张舟唐月华冯佑民姚矢音朱尚权
- 关键词：糖尿病降血糖作用
- 重组单链胰岛素的连接肽与其生物功能的关系被引量：4
- 2001年
- 为研究重组单链胰岛素的生物活性与连接肽之间的关系, 用基因定点突变的方法分别以二肽A-K, 七肽A-A-A-A-A-A-K和十二肽A-A-A-A-A-A-A-A-A-A-A-K连接胰岛素的B30和A1, 得到3个单链胰岛素分子PIP, [A]5PIP和[A]10PIP. 它们的受体结合能力分别为胰岛素的0.14%, 14.3% 和11.1%, 体内生物活性与受体结合能力一致, 而它们的促生长活性分别为胰岛素的17%, 116.3%和38%. 结果表明: (ⅰ) 单链胰岛素也具有胰岛素的促代谢和促生长功能; (ⅱ) 单链胰岛素与胰岛素受体的结合能力与连接肽的长度和氨基酸组成密切相关, 其受体结合能力随连接肽的改变, 可由无到100%, 进一步说明胰岛素与其受体结合时, B链C端远离A链N端是必需的; (ⅲ) 单链胰岛素的促细胞生长能力也与连接肽长度和组成密切相关, 且比其自身的促代谢能力强.
- 黄一丁梁镇和冯佑民
- 关键词：受体结合生物活性连接肽
