国家自然科学基金(30400247)
- 作品数：10 被引量：26H指数：3
- 相关作者：粟永萍王军平王锋超冉新泽刘登群更多>>
- 相关机构：第三军医大学第三军医大学西南医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小肠上皮细胞电离辐射损伤修复的分子机制研究进展被引量：2
- 2007年
- 小肠属于快速自我更新组织，隐窝细胞对细胞毒性损伤十分敏感，全身放射性损伤（核爆炸、核事故所致）以及腹部肿瘤局部放射治疗等都可引起肠道粘膜屏障受损和吸收功能障碍。另一方面，小肠上皮有独特的组织学结构，隐窝前体细胞区和绒毛分化细胞区有明显界限，细胞增殖、分化移行路线清楚，用射线诱导隐窝细胞凋亡，观察肠上皮细胞的反应和细胞更新是研究小肠干细胞生物学的重要手段。笔者介绍了小肠上皮细胞等级性排列特点，以及对电离辐射的敏感性，
- 王锋超粟永萍宁宇冉新泽王军平王崧
- 关键词：小肠上皮细胞电离辐射分子机制组织学结构吸收功能障碍肠道粘膜屏障
- 骨髓移植后受体小鼠肠上皮内供体细胞的免疫电镜观察被引量：2
- 2009年
- 目的探讨骨髓移植后供体骨髓来源干细胞(bone marrow derived stem cells,BMDSCs)是否能够在受体肠上皮分化为具有正常超微结构和功能的肠上皮细胞。方法使用Percoll液分离GFP转基因小鼠骨髓有核细胞,经尾静脉移植后3个月取材。标本经戊二醛固定,饿酸后固定,常规电镜超薄切片。采用包埋后染色免疫电镜技术以GFP抗体识别供体细胞,5nm胶体金标记二抗识别一抗后,进行电镜染色和观察。结果透射电镜下可见电子密度高的单个或成簇分布的球形胶体金颗粒散布于肠上皮细胞内,阴性对照组未见胶体金颗粒。阳性细胞主要为杯状细胞和吸收细胞,且阳性细胞同其他上皮细胞之间存在有细胞连接。结论通过免疫电镜技术证实,移植后的供体骨髓来源细胞可以在受体小肠组织中分化为具有正常功能的肠上皮细胞。
- 刘登群王锋超陶忠芬董世武邹仲敏王军平冉新泽粟永萍
- 关键词：骨髓移植免疫电镜胶体金肠上皮细胞
- 电离辐射对肠上皮细胞NF-κB p65和Akt表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的观察电离辐射对肠上皮细胞PI3K/Akt通路和NF-κB通路的激活模式。方法将对数生长期的IEC-6细胞用无血清培养基培养24h后进行60Coγ射线12Gy照射,检测IEC-6细胞辐照前后不同时间Akt磷酸化水平和胞浆、胞核NF-κB P65蛋白水平变化。结果辐射可使肠上皮细胞受照20min后迅速诱导p65的核转位,但检测不到明显的Akt磷酸化;肠上皮细胞Akt磷酸化的高峰于受照后1h才出现。结论电离辐射诱导的NF-κB p65快速核转位早于辐射诱导Akt的磷酸化。
- 王锋超冉新泽杜智勇艾国平王军平粟永萍
- 关键词：IEC-6PI3K/AKTNF-ΚBP65
- 颈交感神经阻滞对严重烧伤大鼠的救治作用及其机制研究被引量：4
- 2010年
- 目的:观察颈交感神经阻滞(CSB)对严重烧伤大鼠的救治作用,并对其可能机制进行初步探讨。方法:将大鼠随机分为正常对照组、烧伤组和CSB组,烧伤组与CSB组均制作20%体表面积Ⅲ0烧伤模型,CSB组于致伤后进行颈交感神经阻滞,观察动脉血压和心率变化;测定大鼠血中皮质酮、肾上腺素浓度;观察伤后21天动物伤死情况。结果:1.颈交感神经对严重烧伤大鼠救治效果显著,烧伤组和CSB组动物21天死亡率分别为73.33%和53.33%;2.创伤后大鼠血浆内肾上腺素浓度在伤后24小时有明显上升,然后迅速下降,但是CSB组肾上腺素浓度上升幅度远远低于烧伤组;3.与正常组相比,烧伤后血清GC的水平升高非常显著,CSB治疗组虽较正常组也升高,但显著低于烧伤组。结论:颈交感神经阻滞对严重创伤动物具有明显保护效应,其保护作用机制可能与调节创伤后神经-内分泌-免疫系统功能紊乱有关。
- 李新涂柳李敏陈勇艾国平王军平粟永萍
- 关键词：交感神经阻滞烧伤救治
- 颈交感神经阻滞对严重烧伤大鼠肾脏的保护作用及其机制研究被引量：2
- 2010年
- 目的:观察颈交感神经阻滞(CSB)对严重烧伤大鼠肾脏的保护作用,并对其可能机制进行初步探讨。方法:制作放烧严重烧伤伤大鼠大鼠模型,在伤后即刻及连续4天内进行双侧颈交感神经阻滞,观察生命体征、肾功能指标、肾脏组织学改变、血流灌注、抗氧化能力、肾组织Bcl-2表达改变。结果:经过颈交感神经阻滞处理后,伤后各时相点动物肾功能均较对照组为好,组织学病变减轻,器官血流量下降幅度减小,总抗氧化能力好于对照组,免疫组化显示CSB组肾组织中Bcl-2的表达较严重烧伤组明显增高。结论:颈交感神经阻滞可改善严重烧伤大鼠肾脏血液灌注,增强抗氧化能力,预防伤后肾脏功能损害。
- 李新涂柳李敏陈勇艾国平王军平粟永萍
- 关键词：交感神经阻滞烧伤肾脏
- 供体骨髓来源干细胞在骨髓嵌合小鼠肠上皮中定植和分化研究被引量：7
- 2008年
- 目的观察骨髓移植后供体骨髓来源干细胞(bone marrowderived stem cells,BMDSCs)是否能够在受体肠上皮中定植并分化为肠上皮细胞。方法使用密度为1.073 g/mL的Percoll分离GFP转基因小鼠的骨髓有核细胞。利用60Co放射源对C57BL/6小鼠进行10 Gy致死剂量照射,照射后4 h经尾静脉移植绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)转基因小鼠骨髓细胞建立嵌合小鼠模型,移植后1月和6月取小肠标本石蜡包埋。使用GFP抗体鉴定GFP阳性供体细胞在小肠上皮的表达情况,并使用GFP抗体和细胞角蛋白(PCK)抗体进行双标以判断BMDSCs是否分化上皮细胞,同时结合绒毛蛋白(Villin)和GFP的免疫荧光双标及连续切片染色肠道特异转录因子CDX2和GFP来分析骨髓来源细胞是否分化为肠道功能性上皮细胞。结果供体骨髓来源细胞在嵌合鼠的骨髓和小肠上皮层中均有定植,且小肠上皮中GFP阳性细胞能够同时表达PCK、Villin和CDX2。结论供体骨髓来源干细胞可以在骨髓嵌合小鼠的肠上皮定植,并分化为具有正常功能的小肠上皮细胞。
- 刘登群王锋超董世武王连友徐辉冉新泽粟永萍
- 关键词：肠上皮细胞转分化
- 异体骨髓间充质干细胞在骨髓嵌合小鼠体内分化为肝细胞的实验研究被引量：6
- 2007年
- 目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)在体内分化为肝细胞的可行性。方法雌性C57BL/6J小鼠全身一次性接受10Gy60Coγ射线照射后立即接受同品系绿色荧光蛋白(green fluores-cence protein,GFP)转基因小鼠骨髓间充质干细胞移植。移植后1周、1、3个月取骨髓嵌合小鼠肝脏,石蜡切片行GFP抗体免疫组化,冰冻切片在荧光显微镜下观察GFP阳性细胞在肝内分布。石蜡切片行GFP抗体和白蛋白(albumin,Alb)抗体以及GFP抗体和细胞角蛋白18(cytokeratin18,CK18)抗体免疫荧光双标染色法,以此检测GFP阳性细胞在受体小鼠肝内的分化情况。结果移植后1周、1、3个月骨髓嵌合小鼠肝内皆可见GFP阳性细胞,且有随时间减少的趋势,并都可见GFP和Alb双阳性细胞。结论异体骨髓间充质干细胞可在骨髓嵌合小鼠体内分化为表达Alb和CK18的肝细胞,为肝组织的再生和修复提供了新思路。
- 王连友徐辉董世武粟永萍庞学利刘登群王军平冉新泽王锋超
- 关键词：骨髓间充质干细胞转分化肝细胞
- 骨髓源性干细胞的异质性及在肠道修复中的作用研究进展被引量：1
- 2008年
- 目的对骨髓源性干细胞(bone marrow derived stem cells,BMDSCs)的异质性及其形成机制和意义进行综述,分析其在肠上皮重建中的作用和可能机制。方法查阅和分析近年有关BMDSCs异质性和其在肠上皮损伤修复中作用的相关文献,并作进一步综合分析。结果BMDSCs异质性可以解释其多向分化能力,可能以直接定植于肠道或通过和肠道干细胞融合以及促进损伤微环境的重建等多种机制参与肠上皮功能修复。结论BMDSCs在炎症性肠病等胃肠道损伤和修复中具有广阔的应用前景。
- 刘登群粟永萍
- 关键词：肠上皮炎症性肠病
- 颈交感神经阻滞对重度烧伤大鼠肝脏的保护机制初探被引量：1
- 2010年
- 目的观察颈交感神经阻滞(cervical sympathetic block,CSB)对严重烧伤大鼠肝脏功能与结构的保护作用,并对其可能保护机制进行探讨。方法将动物按随机数目表随机分为对照组、严重烧伤组和CSB治疗组,制作重度烧伤模型(TBSA20%Ⅲ度),CSB治疗组伤后以0.1%罗哌卡因行颈交感神经双侧阻滞。通过检测肝功能、肝组织抗氧化能力、Bcl-2表达以及肝组织病理改变判断CSB对肝脏的保护作用。通过检测监测血压变化及检测肝脏、下丘脑血流灌注量来推断其可能机制。结果 CSB组大鼠伤后血浆白蛋白下降及谷丙转氨酶上升不明显,1、3、5、7d时相点血浆白蛋白含量分别为(48.98±6.89)、(38.61±4.35)、(24.05±3.62)和(22.57±4.10)mmol/L,血浆ALT浓度分别为(48.15±7.37)、(58.21±5.43)、(62.07±8.16)、(56.87±5.88)IU/L,较烧伤组为好(P<0.01);CSB组肝组织总抗氧化能力分别为(3.16±0.17)、(2.88±0.15)、(2.71±0.16)、(2.61±0.58)U/mg,较烧伤组明显增强(P<0.01);CSB组大鼠伤后血压较为稳定,伤后1、3、5、7d时相点分别为(90.58±5.69)、(82.69±3.81)、(70.61±9.51)、(82.05±2.36)mmHg,与烧伤组相比差异显著(P<0.01);CSB组动物伤后脏器血流灌注较好,伤后即刻、1、3、5d时相点肝血流量分别为(0.302±0.041)、(0.284±0.024)、(0.16±0.023)、(0.256±0.03)ml/(min.g),下丘脑血流量分别为(1.013±0.113)、(0.721±0.110)、(0.944±0.438)、(0.765±0.316)ml/(min.g),均较烧伤组有明显升高(P<0.01);肝组织Bcl-2的表达明显增高;CSB组大鼠伤后肝组织病理改变较轻,主要表现为肝细胞浊肿,嗜酸性变,肝细胞脂肪变性。结论颈交感神经阻滞对重度烧伤大鼠肝脏具有保护作用,这种保护作用可能是通过调节下丘脑HPA轴和交感-肾上腺轴来进行的。
- 李新李敏涂柳艾国平王军平王峰超粟永萍
- 关键词：交感神经阻滞烧伤肝脏
- 在体分离小鼠小肠隐窝、绒毛上皮细胞的生化完整性研究被引量：2
- 2009年
- 目的:检测低温条件下用螯合剂沉淀法分离的小鼠小肠上皮隐窝和绒毛细胞是否具有生化完整性。方法:使用螯合剂在低温(冰浴)条件下分离和富集小肠上皮绒毛和隐窝细胞;抽提DNA、RNA和总蛋白,用电泳的方法检测完整性;用Real-time PCR检测溶菌酶Lysozyme的表达以判断隐窝、绒毛细胞富集程度。结果:低温条件下分离的肠上皮隐窝、绒毛细胞形态完整;基因组DNA完整,未出现明显的DNA ladder现象;富集细胞的RNA完整;富集隐窝、绒毛细胞的蛋白未降解,两组总蛋白具有表达谱差异性;隐窝细胞富集物溶菌酶mRNA表达水平较绒毛细胞富集物高30倍以上。结论:小肠隐窝绒毛的生物学性状可在低温螯合剂沉底法分离过程中得到保存,提示此方法可以用来分析生理和创伤病理条件下小肠上皮基因和蛋白表达改变。
- 宁宇王锋超刘登群冉新泽粟永萍
- 关键词：肠上皮隐窝绒毛
