河南省科技攻关计划(0524040001)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：田香勤王自良李学斌王三虎何启盖更多>>
- 相关机构：华中农业大学河南科技学院新乡医学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌flic基因的克隆表达及生物信息学分析被引量：1
- 2009年
- 【目的】构建猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actionobacillus pleuropneumoniae,App)鞭毛蛋白(flic)编码基因的重组表达质粒,对其编码蛋白进行生物信息学分析,并将其在原核细胞中进行表达。【方法】利用PCR方法扩增flic基因片段,将其克隆至pMD-18T载体后测序,利用生物信息学软件对其编码蛋白的二级结构及跨膜区进行预测。构建重组表达质粒pGEX-flic,转化大肠杆菌工程菌BL21,经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE及Western-blo对表达蛋白进行鉴定。【结果】获得的目的基因片段长度为528 bp,测序表明其序列与GenBank公布的一致;软件预测结果显示,该蛋白具有多个明显的二级结构成分及跨膜区;SDS-PAGE检测表明,在约50 ku处有一特异性条带;Western-blot检测表明,表达蛋白具有良好的抗原活性。【结论】成功获得了App的flic基因,其编码的蛋白质具有较多的α螺旋区和无规则卷曲区域,表达的鞭毛蛋白具有生物学活性。
- 李任峰田香勤何启盖王自良赵坤李学斌王三虎
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌鞭毛蛋白生物信息学
