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应用实时荧光PCR检测各种环境标本中的嗜肺军团菌被引量：4: 2014年; 目的评价实时荧光PCR在检测各种环境标本中嗜肺军团菌的应用效果。方法选择针对mip基因的引物和探针,优化实时荧光PCR的反应条件,并对嗜肺军团菌和其他非嗜肺军团菌进行检测,验证方法的敏感性、特异性和重复性。将实时荧光PCR检测各种环境标本中嗜肺军团菌的效果与传统培养法进行比较。结果实时荧光PCR法最低检测限达6CFU/mL。该方法特异性好,嗜肺军团菌呈现阳性结果,而非嗜肺军团菌均为阴性结果。重复性好,Ct值变异系数较小。从菌株核酸的提取至检测完成仅需2h左右。实时荧光PCR法和传统培养法的检测嗜肺军团菌的阳性率差异有统计学意义(P<0.05),实时荧光PCR检测敏感性优于传统培养法。结论实时荧光PCR具有较好的敏感性、特异性和快速的特点,适于各种环境标本中嗜肺军团菌污染状况调查及应急事件的快速检测。; 李达张晶波王永全彭晓旻卢立新; 关键词：嗜肺军团菌聚合酶链反应

各种水体嗜肺军团菌污染状况和分布规律研究被引量：10: 2013年; 目的：探讨各种水体环境中嗜肺军团菌的污染状况和分布规律，为制定预防控制措施提供依据。方法：采取分层随机抽样方法采集自然环境及生活环境中各主水体样品，浓缩后经常规细菌培养得到的疑似菌株，用血清学鉴定与荧光定量PCR技术进行嗜肺军团菌的鉴定。结果：342件水样检出嗜肺军团菌阳性96件，总体阳性率为28．1％。淋浴热水、冷却塔水、喷泉水和河湖水阳性率分别为60．2％，35．8％，16．7％和6．7％，其余3种水体未检出军团菌。6月～10月嗜肺军团菌的阳性率差异没有统计学意义。血清分型结果总体以LPl型和LP7型为主。宾馆、医院和商场这三个场所的冷却塔水嗜肺军团菌阳性率最高的是医院，为60．0％。结论：空调冷却塔水、淋浴热水、喷泉水等与人群密切接触水体是嗜肺军团菌污染和传播的高危水体。LPl型是优势菌株。应加强军团菌监测管理，并以医院为重点对象，尽快采取切实有效的预防控制措施以保护广大人群身体健康。; 李达王永全张晶波李若岚康晓平王全意; 关键词：嗜肺军团菌污染状况

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北京市西城区科技计划项目(2011JH20)