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浙江省自然科学基金(Y205281)

作品数:3 被引量:7H指数:1
相关作者:王伟徐再春朱芸芸王兴华陈钦更多>>
相关机构:浙江省立同德医院浙江大学医学院附属邵逸夫医院更多>>
发文基金:浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 3篇腺病
  • 3篇腺病毒
  • 2篇蛋白
  • 2篇重组腺病毒
  • 2篇腺病毒科
  • 2篇骨形成
  • 2篇骨形成蛋白
  • 2篇BMP-7
  • 1篇形态发生蛋白
  • 1篇遗传学
  • 1篇硬化症
  • 1篇肾间质
  • 1篇肾间质纤维化
  • 1篇肾系膜细胞
  • 1篇肾小管
  • 1篇肾硬化
  • 1篇肾硬化症
  • 1篇鼠肾
  • 1篇重组腺病毒介...
  • 1篇系膜

机构

  • 3篇浙江省立同德...
  • 1篇浙江大学医学...

作者

  • 3篇徐再春
  • 3篇王伟
  • 2篇朱芸芸
  • 1篇杨肃文
  • 1篇刘连升
  • 1篇胡岗
  • 1篇陈钦
  • 1篇黄美春
  • 1篇王兴华

传媒

  • 1篇浙江大学学报...
  • 1篇中国中西医结...
  • 1篇国际泌尿系统...

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2009
  • 1篇2008
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
输尿管逆向注射重组腺病毒介导的BMP-7对大鼠肾间质纤维化的作用被引量:6
2008年
目的:构建出具有转染后能表达活性的骨形成蛋白-7(BMP-7)的重组腺病毒,将其直接导入肾纤维化大鼠肾脏,观察其抗肾纤维化的作用。方法:无菌级雄性SD大鼠48只随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻(UUO组)组、BMP-7治疗组,以免疫组织化学方法检测肾组织中α-SMA蛋白的表达水平,以逆转录-多聚酶链反应技术检测TGF-β1的表达水平。结果:免疫组化结果示:BMP-7组肾小管间质α-SMA表达显著减少(P<0.05)。RT-PCR结果显示:TGF-β1随梗阻时间延长而逐渐增多,第28天,有所下降,但无统计学意义。在治疗组,BMP-7组比同一识相点UUO组TGF-β1表达减少(P<0.05)。结论:BMP-7能够明显减轻肾间质纤维化,下调TGF-β1的表达,从而发挥其在单侧输尿管结扎模型中对肾脏的保护作用,延缓和抑制了肾间质纤维化的发展。
徐再春王伟王兴华刘连升陈钦胡岗
关键词:肾间质纤维化骨形成蛋白-7基因治疗
大鼠BMP-7重组腺病毒构建及在肾小管上皮细胞中表达
2010年
目的:利用AdEasyTMsystem构建携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并鉴定其在原代肾小管上皮细胞中的表达。方法:将BMP-7全长序列分为46个片段分段合成,再采用PCR方法将合成的46个寡核苷酸片段拼接成BMP-7基因,并克隆到测序载体中测序鉴定。经NotI和HindⅢ双酶切后接入pShuttle-CMV穿梭载体,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-BMP-7。EcoRI酶切重组pShuttle-BMP-7,与pAdEasyTMDNA电穿孔共转化BJ5183感受态菌,抽提重组AdBMP-7质粒,PacI酶切线性化重组质粒AdBMP-7后,转染Ad293细胞进行病毒包装和扩增,腺病毒荧光检测试剂盒测定其滴度。用AdBMP-7感染大鼠肾小管上皮细胞,以ELISA法和W estern-blot法检测BMP-7在大鼠肾小管上皮细胞中的表达。RT-PCR方法检测-αSMA mRNA的表达水平,以鉴定重组腺病毒AdBMP-7的生物学活性。结果:构建了BMP-7基因的重组腺病毒载体,并制备出高滴度重组腺病毒保存液。该重组腺病毒在体外能有效转染大鼠肾小管上皮细胞并高表达BMP-7蛋白,所表达的BMP-7蛋白能有效逆转由TGF-β1诱导的α-SMA表达增高。结论:成功地构建了携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并初步证实其具有一定的抗肾纤维化功能。
杨肃文王伟徐再春朱芸芸
骨形成蛋白7重组腺病毒的构建及对TGF-β1诱导的大鼠肾系膜细胞α-SMA表达的影响被引量:1
2009年
目的构建骨形成蛋白7重组腺病毒(adenovirus bone morphogenetic protein7,Adeno-BMP-7)及观察其对转化因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾系膜细胞(MC)a—SMA表达的影响。方法构建Adeno—BMP7并转染(M.O.I=100)大鼠肾系膜细胞,48h后用Western印迹法检测BMP-7蛋白的表达;分空白组,TGF-β1处理组(TGF-β1刺激24h,5ng/m1),Adeno-BMP7转染组(TGF-β1刺激24h,5ng/ml;Adeno—BMP7转染M.O.I=100),48h后用RT—PCR方法分别检测各组α-SMA的表达。结果Western-blot检测示转染骨形成蛋白7重组腺病毒后的大鼠肾系膜细胞可表达BMP-7蛋白;RT-PCR示Adeno-BMP7转染组α-SMA表达较TGF-β1处理组明显降低(Adeno—BMP7转染组α-SMA/GAPDH值0.108,TGF-β1处理组α-SMA/GAPDH值0.112,P〈0.05)。结论成功构建Adeno—BMP7,其转染能降低由TGF-β1诱导的大鼠肾系膜细胞α-SMA的表达。
徐再春朱芸芸王伟黄美春
关键词:腺病毒科
共1页<1>
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