上海市科学技术发展基金(03ZR14004)
- 作品数：3 被引量：25H指数：3
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- 相关机构：复旦大学昆士兰大学山东省立医院更多>>
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- 肺腺癌SPC-A-1细胞表皮生长因子受体表达水平对其增殖的影响被引量：5
- 2005年
- 目的探讨采用体外化学合成的针对表皮生长因子受体(EGFR)设计的双链RNA(doublestrandedRNA,dsRNA),是否能诱导肺非小细胞肺癌(NSCLC)细胞出现序列特异性基因沉默,及抑制EGFR基因表达后NSCLC细胞的生物学特征。方法体外合成EGFR序列特异性dsRNA(dsRNAEGFR),结合脂质体2000转染肺腺癌SPC-A-1细胞,用荧光显微镜及流式细胞仪测定转染细胞的EGFR受体数量;适时定量聚合酶链反应检测其EGFR基因表达水平。采用集落形成试验检测SPC-A-1细胞的增殖和集落形成能力。建立裸鼠肿瘤模型,计算肿瘤抑制率。结果dsRNAEGFR可使EGFR在蛋白水平表达下降71.3%、基因水平表达下降50.0%,SPC-A-1细胞集落形成下降66.8%,并显著抑制在体肿瘤生长,肿瘤抑制率为75.0%。结论dsRNAEGFR可序列特异性下调NSCLC细胞EGFR在基因及蛋白水平的表达,有效抑制肿瘤生长。
- 张敏白春学张新高磊毛翎陈杰
- 关键词：SPC-A-1细胞肺腺癌增殖集落形成能力细胞集落形成
- RNA干扰技术抑制A549细胞表皮生长因子受体表达的研究被引量：18
- 2004年
- 目的探讨RNA干扰(RNAi)技术抑制非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549细胞表皮生长因子受体(EGFR)表达后,对A549细胞生物学特性的影响。方法体外化学合成EGFR序列特异性双链RNA(dsRNA),用Lipofectamine2000转染A549细胞,采用Westernblot技术和流式细胞仪检测EGFR的表达,并观察A549细胞周期、集落形成、化疗敏感性等生物学特性的改变。结果序列特异性dsRNAEGFR可显著抑制A549细胞EGFR表达;dsRNAEGFR组细胞生长抑制率为85.0%,集落形成抑制率63.3%;细胞周期分析结果表明,dsRNAEGFR组G0～G1期细胞数较对照组增加了12.7%,进入S期的细胞数较对照组减少了6.6%。转染dsRNAEGFR后,可将A549细胞对顺铂的敏感性提高约4倍。结论dsRNAEGFR可有效抑制A549细胞EGFR的表达,并将更多的细胞阻滞在G0～G1期,抑制细胞增生,显著增加细胞对顺铂的敏感性。RNAi可能为NSCLC的基因治疗提供新策略。
- 张敏张新白春学陈杰MinQ.Wei
- 关键词：RNA干扰技术A549细胞表皮生长因子受体上皮源性肿瘤非小细胞肺癌
- RNA干扰技术抗非小细胞肺癌作用的体内实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的探讨体外化学合成表皮生长因子受体（EGFR）基因序列特异性双链RNA（dsRNA）在体内诱导非小细胞肺癌（NSCLC）细胞出现序列特异性基因沉默的可行性。方法体外化学合成EGFR序列特异性dsRNA（dsRNA-EGFR），结合脂质体Lipofectamine2000转染肺腺癌细胞株SPC-A1后，将200μl细胞悬液接种于裸鼠，建立荷瘤鼠模型，计算肿瘤抑制率。采用免疫组织化学技术、Westernb lot技术和实时逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR），检测肿瘤组织中EGFR蛋白和mRNA的表达水平。结果dsRNA-EGFR可显著抑制体内肿瘤生长，肿瘤抑制率为75．0％，并可将EGFR蛋白表达水平降低53．6％、mRNA表达水平降低32．3％。结论dsRNA-EGFR在体内可有效抑制NSCLC细胞中EGFR蛋白和mRNA的表达水平，抑制肿瘤生长。
- 张敏白春学张新毛翎王悦红
- 关键词：表皮生长因子受体RNA干扰双链RNA非小细胞肺癌
