浙江省自然科学基金(Y205180)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 相关机构：浙江大学医学院附属第二医院更多>>
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- 神经干细胞团的悬浮不稳定性及其解决方法
- 2006年
- 目的探讨体外培养的神经干细胞团不能稳定悬浮的相关因素,建立一种适合神经干细胞长期、稳定悬浮培养的方法。方法在培养过程中动态检测培养基密度和粘滞系数,神经干细胞团密度和半径,同时观测神经干细胞贴壁现象。探讨调节培养基密度和粘滞性、利用琼脂糖凝胶包被培养瓶等方法的抗贴壁效果,及其对干细胞增殖和分化的影响。结果神经干细胞团半径逐渐增大,同时细胞团的沉降速率明显增大。传代第3天细胞团开始贴壁。而培养基密度、粘滞系数和细胞团密度均无明显变化。通过调节培养基密度和粘滞系数,使细胞团保持悬浮,但S期标记指数(LI)下降,细胞逐渐死亡。通过在培养瓶底包被凝胶隔离层,神经干细胞团保持快速增殖而不贴壁,长期培养分化率低。结论神经干细胞团的悬浮不稳定性主要与细胞团体积相关。通过琼脂糖凝胶包被培养瓶底,可以防止贴壁,有利于神经干细胞持续增殖并保持未分化,适合神经干细胞长期培养。
- 郑学胜杨小锋刘伟国冯军峰胡未伟李谷罗鸣陈向日
- 关键词：神经干细胞贴壁
- 小鼠神经干细胞免疫原性的研究被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨小鼠神经干细胞(NSCs)免疫原性,以利于解决神经干细胞移植中的免疫排斥问题。方法:(1)首先将30只C57BL/6近交系小鼠随机分成两组,以BALB/c近交系小鼠的NSCs及肝细胞(作为体细胞对照组)分别进行腹腔主动免疫,然后将NSCs及肝细胞分别与各自免疫后小鼠的T淋巴细胞进行单向混合淋巴细胞培养,通过液闪计数仪检测各自T淋巴细胞增殖程度,从而比较两者免疫原性的强弱。(2)利用异硫氰酸荧光素标记抗体(FITC)及Phycoery-thrin(PE)抗体分别标记BALB/c小鼠NSCs主要组织相容性抗原复合物Ⅰ、Ⅱ(MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ),然后通过流式细胞术(FCM)分别检测BALB/c小鼠NSCs及其肝细胞的MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ阳性细胞比例,从而推断小鼠NSCs的免疫原性。结果:(1)NSC组液闪计数仪检测所得cpm值为16592.8±2865.3,肝细胞组为27815.0±2416.3,NSC组明显低于肝细胞组,差别有统计学意义(P<0.01)。(2)小鼠NSCs实验组中,约(87.55±3.65)%的增殖期神经干细胞没有检测到MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ分子表达;而作为对照组的小鼠肝细胞组中,仅有约(27.45±1.86)%的肝细胞未表达MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ分子。且NSC组MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ阴性细胞比例明显高于肝细胞组,差别有统计学意义(P<0.01)。结论:小鼠神经干细胞具有较弱的免疫原性,且其免疫原性明显低于同一个体的肝细胞。
- 高峰杨小峰郑学胜沈罡刘伟国
- 关键词：神经干细胞免疫原性主要组织相容性抗原流式细胞术
- 颅脑损伤后移植神经干细胞诱发的淋巴细胞浸润被引量：2
- 2007年
- 目的探讨在外伤性脑损伤的条件下,移植同种异体神经干细胞所诱发的淋巴细胞浸润现象。方法60只SD大鼠随机分配到实验组（n=30）和对照组（n=30）,制作脑损伤模型,实验组将Wistar大鼠来源的神经干细胞移植到损伤灶,对照组注射等量生理盐水。通过脑组织切片HE染色、免疫组织化学以及流式细胞术检测局部淋巴细胞浸润的表现,并通过流式细胞术检测神经干细胞的MHC-Ⅰ分子。结果神经干细胞表达MHC-Ⅰ分子的阳性率为6.57%±0.44%。HE染色和免疫组织化学显示,实验组脑损伤灶有相当数量的淋巴细胞浸润,对照组未见淋巴细胞浸润。流式细胞术显示,在损伤脑组织中,实验组的CD4^＋淋巴细胞数/总细胞数比率为13.28%±1.60%,对照组为0.41%±0.12%,P〈0.01）;实验组的CD8^＋淋巴细胞/总细胞数比率为5.11%±1.03%,对照组为0.57%±0.26%,P〈0.01）。结论神经干细胞具有一定免疫原性,当移植到外伤性脑损伤病灶中时,可以诱发局部淋巴细胞浸润。
- 刘伟国郑学胜杨小锋罗鸣陈向日冯军峰
- 关键词：外伤性脑损伤神经干细胞淋巴细胞
