国家自然科学基金(81170780)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：赵子建李晓曦林艳刘微邹俊杰更多>>
- 相关机构：南京医科大学第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 构建及鉴定表达胃泌酸调节素的乳酸乳球菌
- 2015年
- 目的 :构建食品级表达胃泌酸调节素(oxyntomodulin,OXM)的乳酸乳球菌,鉴定其在体外、体内的表达水平。方法:构建重组质粒p NZ8149-OXM电转至乳酸乳球菌中,用Western blot检测重组乳酸乳球菌OXM表达水平。给小鼠喂食表达OXM的乳酸乳球菌后,用液质联用质谱检测小鼠血清OXM的含量。结果:重组质粒经测序鉴定正确,制备的重组乳酸乳球菌在nisin诱导5 h后OXM表达量最高,食用后小鼠血清OXM含量是对照组的2.5倍左右。结论:成功构建了表达胃泌酸调节素的乳酸乳球菌,为进一步探讨其减肥降脂效应提供了基础。
- 向荣林艳李晓曦张欣巩思嘉赵子建
- 关键词：乳酸乳球菌食品级
- mTOR信号通路中上游调控蛋白Rheb在脂肪细胞分化中的作用被引量：6
- 2012年
- 目的观察mTOR信号通路中上游调控蛋白Rheb对脂肪细胞分化的影响。方法构建Rheb(Ras homologenriched in brain)的重组质粒(pCAG-Insulator-Rheb),并将其注射到B6小鼠的胚胎内,产生全身高表达Rheb的转基因小鼠。提取怀孕雌鼠第13.5天的胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast cells,MEFs),PCR鉴定基因型之后进行成脂诱导分化。通过检测分化第12天MEFs内三酰甘油的含量、油红O染色的结果、实时定量PCR方法检测脂肪细胞特异性转录因子PPARγ和C/EBPα的表达情况,来观察Rheb在脂肪细胞分化过程中的作用。结果成功构建了全身高表达Rheb的转基因小鼠模型,并且检测到在高表达Rheb后,可以促进MEFs内脂滴的生成,三酰甘油含量增高,油红O染色有明显区别,并且脂肪细胞特异性转录因子PPARγ和C/EBPα的表达量均升高。结论 Rheb过表达以后可以促进脂肪细胞的分化。
- 刘微邹俊杰李晓曦赵子建刘志民
- 关键词：RHEBMTOR脂肪细胞细胞分化
- Rheb过表达在前体脂肪细胞株3T3-L1分化中的作用
- 2015年
- 目的:利用前体脂肪细胞株3T3-L1细胞观察mTOR(mammalian target of rapamycin)信号通路中上游调控因子Rheb(Ras homolog enriched in brain)对其分化的影响。方法:利用高表达Rheb的基因重组质粒转染前体脂肪细胞株,3T3-L1。通过蛋白质免疫印迹实验鉴定质粒成功转染细胞后,诱导该细胞脂肪分化。予以分化第8天的3T3-L1细胞油红染色,并检测细胞内甘油三酯的含量。另外,我们用Western blot方法检测脂肪细胞特异性转录因子PPAR-γ(Peroxisome proliferator-activated receptor-γ)和C/EBP-α(CCAAT-enhancer-binding protein-α)的表达情况来研究Rheb在脂肪细胞分化过程中的作用。结果:我们成功构建了高表达Rheb的3T3-L1细胞株,发现高表达Rheb后可以促进脂滴的生成,油红O染色有显著区别,与对照组相比Rheb高表达组的三酰甘油含量明显升高(P<0.05);C/EBP-α和PPAR-γ等脂肪细胞特异性的转录因子蛋白表达量与对照组相比也均有升高(P<0.05)。结论:Rheb基因作为mTOR通路上游调控因子,可以促进脂肪细胞的分化。
- 鲍晶晶葛欧洋李璐林艳李晓曦赵子建
- 关键词：RHEBMTOR
