烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金(200305)
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 相关作者：黄跃生艾国平涂柳李敏粟永萍更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院第三军医大学重庆医科大学更多>>
- 发文基金：烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金海外青年学者合作研究基金全军“十五”指令性课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 双链小片段干扰RNA抑制缺氧条件下乳鼠心肌细胞缺氧诱导因子1α表达被引量：2
- 2004年
- 目的 构建含缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)小片段干扰RNA(siRNA)靶序列的U6启动子表达框结构 ,观察其对缺氧条件下乳鼠心肌细胞HIF 1α表达的影响。 方法 分离培养乳鼠心肌细胞 ,分为常规培养液对照组、RNA干扰 (RNAi)组 (转染无效干扰序列Ⅳ )、RNAi抑制组 (转染有效干扰序列并按下游引物不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 )。设计、合成 3对 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ )含HIF 1α编码基因片段(正、反义 )和 1对 (Ⅳ )随机序列 (正、反义 )的PCR下游引物。PCR法构建U6启动子表达框及相应正、反序列表达框 ,同时转染心肌细胞。每组每时相点 5皿细胞。于缺氧 1h后 ,用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定其蛋白水平表达 ,免疫组织化学法检验干扰效果。缺氧 6h后采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测HIF 1αmRNA的表达。 结果 筛选出的最佳抑制片段为Ⅱ组序列。缺氧 1h,对照组、RNAi组心肌细胞HIF 1α蛋白水平显著增高 ,Ⅰ、Ⅱ、ⅢRNAi抑制组HIF 1α蛋白水平较对照组明显降低 ,其中Ⅱ组降低最为显著 (P <0.0 1);缺氧 6h,RNAi组心肌细胞HIF 1αmRNA水平较常氧条件下明显增高 (P <0.0 1);RNAi抑制Ⅱ组未见明显增高 (P >0.0 5 )。 结论 构建的HIF 1αⅡ组表达框能有效地抑制缺氧乳鼠心肌细胞HIF
- 党永明黄跃生杨宗城张东霞李晓东张铭陈丽峰
- 关键词：细胞低氧心肌细胞蛋白免疫印迹法
- 颈交感神经阻滞对复合伤大鼠小肠黏膜血流量及屏障功能的影响被引量：7
- 2007年
- 目的了解颈交感神经阻滞(SB)对放烧复合伤大鼠小肠黏膜血流量及屏障功能的影响。方法将SD大鼠分为正常组(18只)、复合伤组(100只)和复合伤+SB组(100只)。后2组制成5 Gy^(60)Coγ射线全身性照射+15%TBSAⅢ度烧伤的复合伤模型,并设伤后即刻和伤后1、3、5、7 d为观察时相点(每时相点20只大鼠)。复合伤+SB组在特定时间颈后双侧注射盐酸罗哌卡因致SB,复合伤组同法给予等量等渗盐水,不造成SB。检测各组大鼠不同时相点小肠黏膜组织血流量、肠绒毛高度及隐窝深度,并测定肠黏膜Na^+、K^+-腺苷三磷酸(ATP)酶活性和小肠通透性的变化。结果与正常组大鼠小肠黏膜血流量[(1.26±0.23)ml·min^(-1)·g^(-1)]比较,复合伤组明显下降[伤后1 d为(0.29±0.07)ml·min^(-1)·g^(-1),P<0.01],且绒毛高度显著降低、隐窝细胞大量破坏,肠黏膜Na^+、K^+-ATP酶活性下降和小肠通透性显著升高。与复合伤组各项指标比较,复合伤+SB组损伤程度有所减轻[小肠黏膜血流量伤后即刻为(0.82±0.11)ml·min^(-1)·g^(-1),P<0.01]。结论SB可增加放烧复合伤大鼠小肠黏膜血流量、促进肠上皮修复、改善肠道屏障功能。
- 涂柳方海立粟永萍艾国平李新李敏陈勇黄跃生XU Jian-ming
- 关键词：烧伤自主神经传导阻滞小肠
