国家自然科学基金(21062001)
- 作品数：9 被引量：29H指数：4
- 相关作者：梁智群陈桂光曾伟贺杨扬王青龙更多>>
- 相关机构：广西大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西研究生教育创新计划广西大学博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 海洋枯草芽孢杆菌产纤溶酶的诱变育种与发酵工艺优化被引量：4
- 2022年
- 目的:对海洋来源的具有产纤溶酶能力的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)LC6-1进行紫外诱变,得到高产且稳定的突变株PW6-3,对该突变株发酵产酶的条件进行优化。方法:采用单因素和正交试验进行发酵培养基组分和培养条件的优化。结果:突变株PW6-3的酶活力为(6960.21±85.51)U/mL,较原始菌株提高了30.48%。以PW6-3为出发菌株,采用单因素及正交试验的方法对菌株进行发酵培养基组分与培养条件优化,最终得到的最佳培养基组分是:玉米淀粉30 g/L,玉米浆干粉40 g/L,CaCl23 g/L;最佳发酵培养条件是:32℃,转速200 r/min,接种量3%,pH 6.5,种龄18 h,发酵培养时间66 h,最终菌株的酶活力稳定在(9203.63±67.85)U/mL。结论:发酵工艺优化后,菌株PW6-3纤溶酶产量较诱变之前的菌株LC6-1提高72.53%,且发酵工艺成本较低,具有较好的经济效益。
- 庞光武梁智群
- 关键词：枯草芽孢杆菌纤溶酶诱变发酵优化
- γ-聚谷氨酸发酵液预处理及提取纯化工艺被引量：4
- 2014年
- 采用醇析和盐析结合的方法提取γ-PGA粗品。最佳稀释倍数为2倍,硅藻土和粉末活性炭(颗粒活性炭)用量分别定为10g/L和10g/L(15g/L),在室温下抽滤最佳pH为3.0。用5%NaCl和一倍体积乙醇提取γ-PGA,经过冷冻真空干燥可得到白色颗粒状γ-PGA粗品,提取率为95.21%,纯度可达96.89%,大大降低了乙醇用量,节约了生产成本。
- 贺杨扬曾伟王青龙陈桂光梁智群
- 关键词：Γ-聚谷氨酸预处理硅藻土活性炭
- 海洋纤溶酶高产菌株的选育及产酶条件优化被引量：5
- 2012年
- 以海洋枯草芽孢杆菌FA-7为出发菌株,经紫外诱变获得一株遗传稳定性良好的高产纤溶酶菌株Y-22,并对该菌株的发酵培养基和发酵条件进行优化,确定菌株Y-22的最佳产酶条件为可溶性淀粉4%,黄豆粕粉2.5%,CaCl20.025%,MgSO4.7H2O 0.35%,吐温-80 0.15%;接种量4%,装液量50mL/250mL,初始pH值为5.5,发酵温度30℃,180r/min振荡培养96h。在此条件下,菌株Y-22的发酵液粗酶酶活为(910±11.3)IU/mL,是出发菌株的3.05倍。
- 黎艳张兆峰田苗张云开陈桂光梁智群
- γ-聚谷氨酸产生菌的诱变选育被引量：1
- 2013年
- 以Bacillus subtilis GXA-28为出发菌株,采用紫外、微波、氯化锂3种单一诱变及紫外-氯化锂,微波-氯化锂两种复合诱变方式进行诱变育种。经过5轮诱变,13次初筛,8次复筛,总共初筛选3554株,复筛选236株突变菌株。获得1株底物(谷氨酸钠)耐受性为出发菌株的2倍;γ-聚谷氨酸产量达24.00g/L左右(比出发菌株高出约33%)的菌株,命名为U-59。经过6代遗传稳定性试验,该菌株性状稳定。
- 王大芸曾伟曾伟郑双凤贺杨扬陈桂光
- 关键词：枯草芽孢杆菌Γ-聚谷氨酸诱变育种
- 产纤溶酶海洋枯草芽孢菌的液体发酵条件优化被引量：2
- 2015年
- 目的采用响应面法对高产纤溶酶海洋菌株Y-6-A的液体发酵条件进行优化,以进一步提高产酶量并考察该法的有效性。方法先采用单因素实验考查各因素对菌株产酶的影响,并在此基础上利用PlackettBurman设计筛选到影响菌株产酶的主要因素,接着通过最陡爬坡实验逼近酶活最高区域,最后根据Box-Behnken中心组合实验设计对各显著因子进行优化。结果最终得到影响产酶的因素有4个:可溶性淀粉、黄豆粕粉、温度和转速,最佳发酵条件为:可溶性淀粉46.1g/L,黄豆粕粉23.3g/L,温度31.2℃,转速184r·min^(-1),在此发酵条件下得到的酶活为3 606.23IU/mL,经3次验证实验测得的酶活稳定在3 580.32±14.82IU/mL,较优化前提高了22.4%,此外,实验值与预测值之间的相对误差为0.63%。结论响应面的优化结果比较理想,经优化后能较好提高酶活。
- 温健潘诗翰郑鑫鄢凯舟梁智群
- 关键词：枯草芽孢杆菌纤溶酶液体发酵响应面法
- 响应面法优化枯草芽孢杆菌产γ-聚谷氨酸发酵工艺被引量：9
- 2014年
- 以1株谷氨酸依赖型γ-聚谷氨酸(poly-γ-glutamic acid,γ-PGA)产生菌Bacillus subtilis GXA-28为研究对象,利用响应面法系统优化其γ-聚谷氨酸发酵培养基成分。通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验以及Box-Behnken试验构建响应方程,利用该方程预测得到最优培养基:蔗糖33.65 g/L、酵母膏0.4 g/L、NH4Cl 1.6 g/L、谷氨酸钠15 g/L、KH2PO4 0.4 g/L、K2HPO4·3H2O 1.68 g/L、MgSO4·7 H2O 0.1 g/L、MnSO4·H2O 0.04 g/L。利用优化培养基,在40.2℃、160 r/min条件下摇瓶发酵22 h,γ-PGA产量达到16.63 g/L,底物谷氨酸钠转化率比优化前提高了20%,达到100%。
- 贺杨扬曾伟王青龙王大芸陈桂光梁智群
- 关键词：Γ-聚谷氨酸枯草芽孢杆菌发酵培养基
- 两种粗提纯法对纤溶酶纯化效果的比较研究被引量：3
- 2014年
- 采用硫酸铵盐析法及乙醇沉淀法对海洋枯草芽孢杆菌纤溶酶的纯化效果进行比较研究,得到的最佳纯化方案为:取一定体积的纤溶酶发酵液进行预处理,再进行分段盐析及分级沉淀,在分段盐析中,30%和70%饱和度的硫酸铵分别用于去除杂蛋白和沉淀纤溶酶,最后进行碱处理及超滤除盐;在分级沉淀中,最佳乙醇沉淀时间为1.5 h,去除杂蛋白和沉淀纤溶酶的乙醇体积比分别为25%和165%,最后将两种方法得到的粗提液进行冷冻干燥,硫酸铵法的酶活回收率为83.52%,纯化倍数为1.42,冻干粉得率为4.812 g/L,单位酶活为76 755.82 IU/g;乙醇纯沉淀法的酶活回收率为89.7%,纯化倍数为1.72,冻干粉得率为7.611 g/L,单位酶活为137 190.57 IU/g,该结果表明乙醇沉淀法对纤溶酶的粗提效果要优于硫酸铵盐析法。
- 温健潘师翰焉凯舟郑鑫梁智群
- 关键词：枯草芽孢杆菌纤溶酶乙醇沉淀纯化
- 产纤溶酶海洋枯草芽孢杆菌的发酵工艺研究被引量：5
- 2012年
- 对一株产纤溶酶的海洋枯草芽孢杆菌LJ-22的固、液体发酵条件分别进行了优化,确定该菌株的最佳液体发酵条件为温度31℃,初始pH7.0,转速180r/min,接种量4%,培养时间72h,最佳固体发酵条件为温度34℃,初始pH7.0,接种量10%,装样量10g,静置培养时间72h。在上述条件下,菌株LJ-22的液体发酵产纤溶酶酶活为(830±12.5)IU/mL,是优化前的1.69倍,固体发酵产纤溶酶酶活为(4300±12.8)IU/g,是优化前的1.56倍。通过比较固、液体发酵条件及产酶酶活,得出该菌株更适合液体发酵,便于大规模工业生产。
- 陈桂光李文杰黄梅华田苗张云开梁智群
- 关键词：纤溶酶液体发酵固体发酵
- 海洋源纤溶酶高产菌株的诱变育种及液体培养基优化被引量：2
- 2016年
- 为获得纤溶酶高产菌株及其最优发酵条件,以海洋环境来源的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)H-A-03为出发菌株,经过^(60)Co辐射诱变获得了一株遗传稳定性好的纤溶酶高产菌株F8-C,其酶活力较出发菌株提高28.78%。采用统计学优化方法获得了组分更简单、用量更少、更利于菌株产酶的培养基:可溶性淀粉41.6g/L、黄豆粕粉26.2g/L、CaCl_2 1.0g/L,KH_2PO_42.0g/L。在此基础上,3L摇瓶放大试验结果显示,菌株F8-C的产酶量达到(3231±21)U/mL,较出发菌株H-A-3提高44.8%。结果表明利用^(60)Co辐射诱变育种,并采用统计学方法优化培养基,对于提高枯草芽孢杆菌纤溶酶的产酶量是一种有效策略。该研究结果也将为下一步发酵罐扩大试验奠定基础。
- 刘延廖漆光辉李培玲梁智群陈桂光曾伟
- 关键词：纤溶酶发酵培养基发酵条件
