国家高技术研究发展计划(SS2012AA020405)
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 相关作者：王天有陈燕飞师晓东刘嵘胡梦泽更多>>
- 相关机构：首都儿科研究所附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小干扰RNA沉默survivin基因表达对肿瘤细胞A549、Hela S3和K562的影响及小干扰RNA序列的筛选被引量：5
- 2014年
- 目的 探讨针对survivin基因的小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）对人肺癌A549、宫颈癌Hela S3及急性髓系白血病K562细胞株的效应,筛选有效的siRNA序列.方法 设计并合成3条针对survivin基因的siRNA,通过Hiperfect脂质体转染试剂分别转染A549、Hela S3及K562细胞,培养48 ～ 72 h后,用SYBR Green Ⅰ的实时定量PCR （RT-PCR）方法检测肿瘤细胞survivin mRNA的表达,用WST-8细胞计数试剂盒检测肿瘤细胞的增殖.结果 转染了特异性siRNA的肿瘤细胞survivin基因的表达量明显下降,转染后48 h基因表达抑制率为57.47％～88.53％,72 h为69.94％～95.03％;转染后各组肿瘤细胞增殖受到明显抑制,转染后48 h的细胞增殖抑制率为27.88％～47.36％,72 h为42.59％～57.29％;其中序列1的效果最为显著,对3种肿瘤细胞survivin基因表达的抑制率48 h均在75％以上、72 h均在90％以上,对细胞增殖的抑制率48 h均在40％以上、72 h均达50％以上.结论 siRNA能有效沉默survivin基因在多种肿瘤细胞中的表达,抑制肿瘤细胞的增殖,所设计的3条survivin siRNA序列均有活性,以序列1作用最强.
- 胡梦泽师晓东王天有刘嵘玄立田陈燕飞
- 关键词：SURVIVIN基因实时定量聚合酶链反应
