国家自然科学基金(30400215)
- 作品数：12 被引量：30H指数：4
- 相关作者：王惠明吴玉章杨曌赵婷婷阮志华更多>>
- 相关机构：第三军医大学第三军医大学大坪医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IFN-γ诱导人单核细胞MICs分子表达被引量：2
- 2007年
- 目的:研究IFN-γ对MHC-I类链相关分子(MICs)表达的调节作用。方法:采用密度梯离离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),以免疫磁珠法从PBMC中特异性分选单核细胞,以细胞因子IFN-γ、TNF-α或IFN-α刺激PBMC、纯化单核细胞或单核细胞系U937、THP-1后,以流式细胞术检测单核细胞表面MICs分子表达。结果:IFN-γ选择性上调人PBMC中单核细胞表面MICs表达;IFN-γ对人原代单核细胞及单核细胞系U937、THP-1细胞表面MICs分子表达均有诱导或上调作用,细胞因子TNF-α、IFN-α对单核细胞MICs分子表达无影响。IFN-γ诱导或上调表达的MICs分子不能被MICA或MICB特异性单克隆抗体(mAb)所识别,可能是一种新的MIC分子或MIC等位基因。结论:IFN-γ能诱导或上调人单核细胞表面MICs分子表达。
- 王惠明阮志华王沂芹傅晓岚徐文岳赵婷婷吴玉章
- 关键词：单核细胞IFN-Γ
- 基于HPV16肿瘤基因治疗载体的构建与鉴定
- 2008年
- 目的:构建基于人乳头状瘤病毒16型(human papilloma virus type-16,HPV16)的肿瘤基因治疗载体,并鉴定其对Hela肿瘤细胞的转染活性。方法:利用昆虫杆状病毒表达系统表达病毒蛋白,在体外变性与复性过程中用病毒蛋白包装绿色荧光表达质粒EGFP形成治疗载体。透射电镜观察治疗载体的结构,并转染Hela肿瘤细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测其转染效率。结果:透射电镜观察证实病毒蛋白可自我组装成病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的结构,在转染Hela肿瘤细胞后,荧光显微镜和流式细胞仪成功检测到荧光的表达。结论:基于HPV16的新型肿瘤基因治疗载体能成功转染Hela肿瘤细胞,为肿瘤的基因治疗策略提供了理想的工具。
- 杨曌王惠明
- 关键词：乳头状瘤病毒基因疗法
- 基于HPV16的新型伪病毒治疗MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的实验研究
- 2008年
- 目的构建基于人乳头状病毒(human papilloma virus,HPV)16型的新型伪病毒,探讨对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用,为临床治疗系统性红斑狼疮提供实验依据。方法将12只3月龄MRL/lpr狼疮小鼠随机均分为治疗组和对照组,治疗前后测定尿蛋白、血清尿素氮、肌酐及抗ds-DNA抗体滴度。结果治疗组小鼠治疗后的尿蛋白、血清尿素氮、肌酐及抗ds-DNA抗体均下降,与治疗前有显著性差异(P<0.05),而对照组治疗前后无显著性差异(P>0.05),并且治疗组小鼠的平均生存期比对照组明显延长(P<0.05)。结论基于人乳头状病毒16型的新型伪病毒可显著改善MRL/lpr小鼠的免疫状况和肾脏功能,提高平均生存期。该研究结果为临床治疗系统性红斑狼疮提供了新的启示。
- 杨曌王惠明
- 关键词：系统性红斑狼疮
- 直视下腹膜透析管置入术腹壁固定与非固定效果观察被引量：8
- 2008年
- 目的探讨腹膜透析置管术中行腹壁固定与非固定两种方式的效果差异。方法慢性肾功能衰竭患者38例,均选择腹膜透析作为肾脏替代治疗模式。按腹膜透析置管术式分为腹壁固定组与非固定组,比较不同术式的透析液出入速度及超滤量、腹透管移位发生率。结果两组透析液出入及超滤量无明显差异;但腹壁固定组腹透管移位发生率为零,非固定组腹透管移位发生率为15%,二者相差显著(P<0.01)。结论采用腹壁固定术可有效减少术后腹膜透析导管移位发生。
- 王惠明何娅妮李展旭任姜汶杨聚荣李开龙丁涵露张建国
- 关键词：导管移位慢性肾功能衰竭
- IFN-γ上调的单核细胞表面MHC-I类链相关分子促进NK细胞活化被引量：5
- 2008年
- 目的:研究IFN-γ诱导上调表达的单核细胞MHC-I类链相关分子(MICs)分子对NK细胞的活化作用。方法:采用密度梯离离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),以免疫磁珠法从PBMC中特异性分选单核细胞及NK细胞,以细胞因子IFN-γ、TNF-α刺激单核细胞后,再将单核细胞与NK细胞共培养,以流式细胞术(FCM)检测NK细胞表面CD69分子及胞内IFN-γ表达,以51Cr释放试验检测NK细胞对K562细胞的杀伤效应。结果:IFN-γ上调人单核细胞表面MICs表达;IFN-γ刺激的单核细胞能促进异体NK细胞CD69及胞内IFN-γ表达,能增强NK细胞对K562细胞的杀伤效应;单核细胞的这种效应至少部分依赖于IFN-γ上调的MICs分子,因为用抗MIC抗体封闭或用细胞小室阻断细胞接触,可以明显地抑制NK细胞的活化。结论:IFN-γ上调人单核细胞表面MICs分子介导了NK细胞的活化。
- 王惠明王沂芹阮志华傅晓岚徐文岳赵婷婷吴玉章
- 关键词：IFN-ΓNK细胞
- HPV16的新型伪病毒对DNA特异性B细胞的靶向实验研究
- 2008年
- 目的:构建人乳头状病毒(human papilloma virus,HPV)16型的新型伪病毒,并检测其对DNA特异性B细胞(R4A)的靶向性。方法:利用昆虫杆状病毒表达系统表达病毒蛋白,在体外变性与复性过程中将病毒蛋白包装绿色荧蛋白EGFP表达型质粒,形成伪病毒。透射电镜观察病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的结构,并转染R4A细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测其转染效率。结果:透射电镜观察证实病毒蛋白可自我组装成VLP,在转染R4A细胞后,荧光显微镜和流式细胞仪成功检测到荧光的表达。结论:HPV16的新型伪病毒能成功转染R4A细胞,为系统性红斑狼疮(SLE)的靶向治疗提供了理想的策略。
- 杨曌王惠明
- 关键词：人乳头状瘤病毒16型靶向性
- 免疫受体NKG2D介导的细胞免疫及其与疾病的关系被引量：2
- 2008年
- NKG2D是一种重要的淋巴细胞活化受体。它以同源二聚体形式表达于NK细胞、某些T细胞或巨噬细胞表面。NKG2D启动的信号对淋巴细胞起着刺激或共刺激的作用。NKG2D受体拥有多种配体，这些配体在正常细胞表面不表达或低水平表达，当细胞处于应激状态或恶变时，这些配体在细胞表面诱导性表达。NKG2D介导的细胞免疫应答对于肿瘤或感染起着重要的免疫监视作用，同时与某些自身免疫性疾病也密切相关。
- 王惠明
- 关键词：单核细胞IFN-Γ表型
- 以病毒样颗粒为平台的分子载体和疫苗设计被引量：9
- 2006年
- 病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)在形态结构上类似于病毒,但不含病毒基因组。依据来源可分为源于病毒VLPs和人工VLPs。前者主要通过基因工程制备,后者由人工化学合成而来。VLPs的表面组分可进行灵活多样的修饰改造以满足不同需求;在适宜条件下VLPs可以包裹核酸或其它小分子物质。作为分子运载工具,VLPs可靶向性地递送基因、药物或其它小分子物质。VLPs具有独特的免疫学特性,不但能通过影响APC发挥佐剂效应,还可以作为其它佐剂、肽疫苗和核酸疫苗的整合平台设计多种形式的疫苗。VLPs在载体和疫苗设计中具有良好的应用前景。
- 王惠明吴玉章
- 关键词：病毒样颗粒疫苗设计
- Prostein_(31-39)特异的、HLA-A*2.1限制性NKT细胞表型及功能初步研究
- 2006年
- 目的诱导培养前列腺癌相关抗原Prostein特异性NKT细胞,并对其表型及功能作初步研究鉴定。方法以Prostein31-39肽、IL-2、IL-12反复刺激培养HLA-A*2.1+健康志愿者外周血单个核细胞(PBMCs),对得到的细胞系进行细胞毒功能试验,并以多色流式细胞检测技术进行表型分析。结果Prostein31-39肽、IL-2、IL-12可以诱导PBMCs产生肽特异性CD3+/CD56+NKT细胞,具有较强的肽特异性细胞毒活性及NK样细胞毒活性。结论Prostein31-39肽、IL-2及IL-12可以协同诱导培养肽特异性NKT细胞,这为研究抗原特异性NKT细胞在前列腺癌免疫治疗中的作用奠定了基础。
- 王惠明王沂芹阮志华徐文岳邹丽云赵婷婷吴玉章
- 关键词：NKT细胞IL-12
- IFN-γ促进人单核细胞向不典型成熟DC分化被引量：5
- 2008年
- 目的:研究IFN-γ对人单核细胞表型及分化的影响。方法:采用免疫磁珠法从健康志愿者外周血单个核细胞(PBMCs)中特异性分选单核细胞,以细胞因子IFN-γ、TNF-α、IFN-α刺激单核细胞后,观察单核细胞生长特性,并以流式细胞术检测单核细胞表面CD1a、CD14、CD80、CD83、CD86、HLA-DR等分子表达。结果:细胞因子IFN-γ、TNF-α、IFN-α对单核细胞形态、生长及表型转化有不同影响。IFN-γ促进单核细胞黏附聚集形成"细胞小岛结构",刺激单核细胞形态向梭形及多角形转化;IFN-γ上调单核细胞表达CD80、CD83、CD86及HLA-DR分子,同时下调CD14分子表达。结论:IFN-γ促进单核细胞向不典型的成熟DC方向分化。
- 王惠明王沂芹阮志华傅晓岚徐文岳赵婷婷吴玉章
- 关键词：单核细胞IFN-Γ表型
